公开(公告)号：CN107299131A

公开(公告)日：2017-10-27

申请号：CN201710373391.5

申请日：2017-05-24

Applicant: 暨南大学

Inventor： 叶蕾 ,  刘雪美 ,  闫鹤 ,  石磊 ,  陈洵 ,  常彦磊

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q2600/106 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2521/514

Abstract: 一种检测人EGFR基因外显子21L858R点突变的智能恒温扩增检测引物组、检测试剂盒及方法。引物组包括TP引物、FP引物、BP引物、OP1引物和OP2引物；检测试剂盒包括引物液、反应液、Bst DNA聚合酶、错配结合蛋白、显色剂和对照。检测方法是利用具有链置换活性的DNA聚合酶，采用四条特异性引物及一种错配结合蛋白，在63℃对样品DNA模板进行扩增，可检测到DNA的pg级，其鉴定方式是将扩增产物加入 Green I并在ESE-tube scanner仪器检测判断扩增与否，确定待检样品是否含有人EGFR基因外显子21L858R点突变DNA。本发明的方案具有成本低、容易操作、快速、灵敏等优点，而且能够克服传统恒温扩增法无法进行基因多态性检测的局限，准确地检测基因多态性，特异性强，适于推广应用。

公开(公告)号：CN107287289A

公开(公告)日：2017-10-24

申请号：CN201710372395.1

申请日：2017-05-24

Applicant: 暨南大学

Inventor： 叶蕾 ,  刘雪美 ,  闫鹤 ,  石磊 ,  陈洵 ,  常彦磊

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q2600/106 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2521/514

Abstract: 一种检测人EGFR基因T790M点突变的智能恒温扩增引物组、检测试剂盒和检测方法。引物组包括TP引物、FP引物、BP引物、OP1引物和OP2引物；检测试剂盒包括引物液、反应液、Bst DNA聚合酶、错配结合蛋白、显色剂和对照。检测方法利用具有链置换活性的DNA聚合酶，采用四条特异性引物及一种错配结合蛋白，在63℃对样品DNA模板进行扩增，可检测到DNA的pg级，其鉴定方式是采用在反应体系中加入 Green I并在ESE-tube scanner仪器检测判断扩增与否，确定待检样品是否含有人EGFR基因T790M点突变DNA。本发明的方案具有成本低、容易操作、快速、灵敏等优点，而且能够克服传统恒温扩增法无法进行基因多态性检测的局限，准确地检测基因多态性，特异性强，适于推广应用。