一种谷氨酰胺转胺酶编码基因阻断吸水链霉菌及其应用

    公开(公告)号:CN101906393B

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN201010211057.8

    申请日:2010-06-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种谷氨酰胺转胺酶编码基因阻断吸水链霉菌及其应用。本发明主要采用同源重组技术,利用单交换使谷氨酰胺转胺酶编码基因被插入失活,从而得到不产谷氨酰胺转胺酶的重组子。本发明得到的吸水链霉菌,阻断了其分化过程,但是不影响其基内菌丝生长。以该阻断菌株为宿主构建了一株基因工程菌,用于生产谷氨酰胺转胺酶,表明该阻断菌株可以作为一个良好的链霉菌表达宿主,可用于解决链霉菌在发酵过程中由于分化过程而引起的代谢产物变化,提高发酵产量及稳定性,将极大促进后续链霉菌基因改造和微生物生理学研究,为链霉菌发酵生产提供一个新的模式菌。

    一种提高PVA降解速度的发酵方法

    公开(公告)号:CN101850167B

    公开(公告)日:2012-05-30

    申请号:CN201010181314.8

    申请日:2010-05-25

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高PVA降解速度的发酵方法。通过在发酵过程中添加1,4-丁二醇,提高了PVA降解速度。通过分批补料发酵方法和连续补料发酵方法,平均PVA降解速度分别达到了0.073g/L/h、0.150g/L/h和0.547g/L/h,与不添加1,4-丁二醇相比,平均降解速度分别提高了1.5倍、3.1倍和11.2倍,为消除PVA所导致的环境污染提供了一种可行的方法。本发明还具有操作简单、原料价格便宜等优点。

    一种谷氨酰胺转胺酶编码基因阻断吸水链霉菌及其应用

    公开(公告)号:CN101906393A

    公开(公告)日:2010-12-08

    申请号:CN201010211057.8

    申请日:2010-06-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种谷氨酰胺转胺酶编码基因阻断吸水链霉菌及其应用。本发明主要采用同源重组技术,利用单交换使谷氨酰胺转胺酶编码基因被插入失活,从而得到不产谷氨酰胺转胺酶的重组子。本发明得到的吸水链霉菌,阻断了其分化过程,但是不影响其基内菌丝生长。以该阻断菌株为宿主构建了一株基因工程菌,用于生产谷氨酰胺转胺酶,表明该阻断菌株可以作为一个良好的链霉菌表达宿主,可用于解决链霉菌在发酵过程中由于分化过程而引起的代谢产物变化,提高发酵产量及稳定性,将极大促进后续链霉菌基因改造和微生物生理学研究,为链霉菌发酵生产提供一个新的模式菌。

    一种提高PVA降解速度的发酵方法

    公开(公告)号:CN101850167A

    公开(公告)日:2010-10-06

    申请号:CN201010181314.8

    申请日:2010-05-25

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高PVA降解速度的发酵方法。通过在发酵过程中添加1,4-丁二醇,提高了PVA降解速度。通过分批补料发酵方法和连续补料发酵方法,平均PVA降解速度分别达到了0.073g/L/h、0.150g/L/h和0.547g/L/h,与不添加1,4-丁二醇相比,平均降解速度分别提高了1.5倍、3.1倍和11.2倍,为消除PVA所导致的环境污染提供了一种可行的方法。本发明还具有操作简单、原料价格便宜等优点。

    一种用添加山梨醇提高发酵生产碱性果胶酶产量的方法

    公开(公告)号:CN101525604A

    公开(公告)日:2009-09-09

    申请号:CN200910030831.2

    申请日:2009-04-17

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种用添加山梨醇提高发酵生产碱性果胶酶产量的方法,涉及碳源添加策略在发酵过程优化中的应用技术领域。本发明用重组毕赤酵母GS115为发酵菌株,在发酵诱导期以恒速或加速添加山梨醇到发酵液中,以提高细胞活力,减弱甲醇的毒害作用,进而提高碱性果胶酶的产量。较低的山梨醇添加量不仅不会抑制甲醇对菌体的产酶效果,还可以从一定程度上削弱菌体受到的甲醇毒害作用,从而进一步提高产酶效率。当山梨醇采用变速流加(0.9g/h-7.2g/h)时,酶活从对照的930U/ml提高到1541U/ml。本发明工艺简单有效,而且可应用于今后果胶酶的工业化生产中,且对其它的毕赤酵母发酵过程优化具有一定的指导意义。

    添加胰蛋白酶提高发酵法制备谷氨酰胺转胺酶产量的方法

    公开(公告)号:CN100447236C

    公开(公告)日:2008-12-31

    申请号:CN200610097160.8

    申请日:2006-10-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种添加胰蛋白酶提高发酵法制备谷氨酰胺转胺酶产量的方法,涉及吸水链霉菌发酵制备谷氨酰胺转胺酶技术领域。本发明采用吸水链霉菌为发酵菌株,经斜面培养和种子培养后,接种在发酵培养基中经液体发酵制备谷氨酰胺转胺酶。通过在发酵过程中添加胰蛋白酶,最终实现了提高谷氨酰胺转胺酶产量的目标。本发明的优点是所用胰蛋白酶用量较少,且价格低廉,可显著提高谷氨酰胺转胺酶的产量,在其它培养条件相同的情况下,本发明比不添加胰蛋白酶的对照例产量提高达35%,达到发酵法制备谷氨酰胺转胺酶的先进水平。

    一种谷氨酰胺转胺酶激活蛋白酶抑制因子的分离纯化方法

    公开(公告)号:CN101121747A

    公开(公告)日:2008-02-13

    申请号:CN200710023721.4

    申请日:2007-07-06

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种谷氨酰胺转胺酶激活蛋白酶抑制因子的分离纯化方法,属于生物制品的分离纯化技术领域。本发明采用吸水链霉菌为出发菌株,经液体深层发酵制备的谷氨酰胺转胺酶激活蛋白酶抑制因子,在经过乙醇沉淀、阳离子交换色谱和疏水色谱之后,得到了电泳纯的谷氨酰胺转胺酶激活蛋白酶抑制因子溶液,可用于后续的蛋白质测序和性质研究。该方法步骤简单,酶纯度高,是一种简便有效的酶分离纯化方法。

    添加十六烷基三甲基溴化铵提高谷氨酰胺转胺酶产量的方法

    公开(公告)号:CN1944633A

    公开(公告)日:2007-04-11

    申请号:CN200610097161.2

    申请日:2006-10-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 添加十六烷基三甲基溴化铵提高谷氨酰胺转胺酶产量的方法,涉及吸水链霉菌发酵制备谷氨酰胺转胺酶技术领域。本发明采用吸水链霉菌为发酵菌株,经斜面培养和种子培养后,接种在发酵培养基中经液体发酵制备谷氨酰胺转胺酶。通过在发酵过程中添加十六烷基三甲基溴化铵,实现了提高谷氨酰胺转胺酶产量的目标。本发明的优点是所用十六烷基三甲基溴化铵用量较少,且价格低廉,可显著提高谷氨酰胺转胺酶的产量,在其它培养条件相同的情况下,本发明比不添加十六烷基三甲基溴化铵的对照例提高产量达24.7%,达到发酵法制备谷氨酰胺转胺酶的先进水平。

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