公开(公告)号：CN119464247A

公开(公告)日：2025-02-18

申请号：CN202510045489.2

申请日：2025-01-13

Applicant: 苏州近岸蛋白质科技股份有限公司

Inventor： 徐子勇 ,  李亚丽 ,  张清仪 ,  常思佳 ,  董卓倬

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12P19/34

Abstract: 本发明涉及一种T7 RNA聚合酶突变体及其应用。具体地，本发明公开了一种T7 RNA聚合酶突变体，所述聚合酶突变体具有在对应于野生型T7 RNA聚合酶的选自下组的位点发生至少一个氨基酸突变：第44位、第45位、第46位、第172位、第389位、第425位、第441位、第632位、第643位、第754位和第789位；所述突变位点的编号基于SEQ ID NO:1所示的序列，所述突变导致酶合成mRNA过程中产生的副产物dsRNA显著降低，同时降低RNA聚集体的产生。

公开(公告)号：CN116949137B

公开(公告)日：2023-12-22

申请号：CN202311212061.X

申请日：2023-09-20

Applicant: 苏州近岸蛋白质科技股份有限公司

Inventor： 王子洋 ,  李亚丽 ,  周玲云 ,  李永娟

IPC: C12Q1/6816 ,  G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/72 ,  G01N30/88

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及RNA沉淀液在检测mRNA加帽效率中的用途。本发明的RNA沉淀液包含LiCl和乙醇。本发明的RNA沉淀液用于检测mRNA加帽效率。本发明检测mRNA加帽效率时，不需要将酶切产物单独纯化出来；并且相较于常规检测方法，更快捷方便，可同时进行批量样品的处理，并且对于酶切探针要求低，不需要进行生物素修饰，不仅降低了合成成本，合成周期也显著缩短。样品在进行酶切处理后可直接补加沉淀液，沉淀洗脱后用无酶水复溶即可上机检测，操作简单、回收率高。

公开(公告)号：CN118726510A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202310338519.X

申请日：2023-03-31

Applicant: 苏州近岸蛋白质科技股份有限公司

Inventor： 李亚丽 ,  朱化星 ,  位小丫 ,  张清仪

IPC: C12P19/34

Abstract: 本发明提供了一管法酶促合成加帽mRNA的方法。本发明的方法省略了IVT后的纯化mRNA的步骤，并获得了加帽效率更高、副产物更少的加帽产物。本发明提供了工艺简便、流程较短、快速高效的酶促合成加帽mRNA的方法，简化了mRNA加帽产物的生产工艺、降低了生产成本，有利于工业化的生产。

公开(公告)号：CN116836974B

公开(公告)日：2024-02-20

申请号：CN202311118503.4

申请日：2023-09-01

Applicant: 苏州近岸蛋白质科技股份有限公司

Inventor： 李亚丽 ,  张清仪 ,  朱化星 ,  王子洋

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种体外合成加帽mRNA的方法。具体地，涉及一种酶法加帽反应缓冲液及其应用。本发明的反应缓冲体系中，对于未经纯化的上游产物可以有效进行加帽，得到高加帽率的加帽mRNA。本发明的加帽缓冲体系极大地提高生产效率，降低生产成本，可用于实验室和工业化的mRNA原液的生产。

公开(公告)号：CN116836974A

公开(公告)日：2023-10-03

申请号：CN202311118503.4

申请日：2023-09-01

Applicant: 苏州近岸蛋白质科技股份有限公司

Inventor： 李亚丽 ,  张清仪 ,  朱化星 ,  王子洋

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种体外合成加帽mRNA的方法。具体地，涉及一种酶法加帽反应缓冲液及其应用。本发明的反应缓冲体系中，对于未经纯化的上游产物可以有效进行加帽，得到高加帽率的加帽mRNA。本发明的加帽缓冲体系极大地提高生产效率，降低生产成本，可用于实验室和工业化的mRNA原液的生产。

公开(公告)号：CN114395613B

公开(公告)日：2022-06-28

申请号：CN202210298041.8

申请日：2022-03-25

Applicant: 苏州近岸蛋白质科技股份有限公司

Inventor： 郑紫君 ,  李亚丽 ,  汤玉洁 ,  周玥 ,  赵曼曼 ,  张清仪 ,  王明明 ,  朱化星

IPC: C12Q1/48 ,  C12Q1/44 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明提供了一种体外检测牛痘病毒加帽酶活性的方法。具体地，所述方法包括：A.利用T7 RNA聚合酶转录出目的基因RNA；B.利用3'biotin‑GTP和牛痘病毒加帽酶对步骤A中RNA进行加帽反应；C.利用链霉亲和素磁珠对步骤B中的RNA进行加帽RNA吸附反应；D.利用RT‑qPCR方法检测步骤B、C中CT值差异，从而判定步骤B中牛痘病毒加帽酶的活性。本发明的方法重复性很好，测定的加帽与不加帽mRNA产量差异显著，可成功地定量检测牛痘病毒加帽酶活性。

公开(公告)号：CN116949137A

公开(公告)日：2023-10-27

申请号：CN202311212061.X

申请日：2023-09-20

Applicant: 苏州近岸蛋白质科技股份有限公司

Inventor： 王子洋 ,  李亚丽 ,  周玲云 ,  李永娟

IPC: C12Q1/6816 ,  G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/72 ,  G01N30/88

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及RNA沉淀液在检测mRNA加帽效率中的用途。本发明的RNA沉淀液包含LiCl和乙醇。本发明的RNA沉淀液用于检测mRNA加帽效率。本发明检测mRNA加帽效率时，不需要将酶切产物单独纯化出来；并且相较于常规检测方法，更快捷方便，可同时进行批量样品的处理，并且对于酶切探针要求低，不需要进行生物素修饰，不仅降低了合成成本，合成周期也显著缩短。样品在进行酶切处理后可直接补加沉淀液，沉淀洗脱后用无酶水复溶即可上机检测，操作简单、回收率高。

公开(公告)号：CN114395613A

公开(公告)日：2022-04-26

申请号：CN202210298041.8

申请日：2022-03-25

Applicant: 苏州近岸蛋白质科技股份有限公司

Inventor： 郑紫君 ,  李亚丽 ,  汤玉洁 ,  周玥 ,  赵曼曼 ,  张清仪 ,  王明明 ,  朱化星

IPC: C12Q1/48 ,  C12Q1/44 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明提供了一种体外检测牛痘病毒加帽酶活性的方法。具体地，所述方法包括：A.利用T7 RNA聚合酶转录出目的基因RNA；B.利用3'biotin‑GTP和牛痘病毒加帽酶对步骤A中RNA进行加帽反应；C.利用链霉亲和素磁珠对步骤B中的RNA进行加帽RNA吸附反应；D.利用RT‑qPCR方法检测步骤B、C中CT值差异，从而判定步骤B中牛痘病毒加帽酶的活性。本发明的方法重复性很好，测定的加帽与不加帽mRNA产量差异显著，可成功地定量检测牛痘病毒加帽酶活性。