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公开(公告)号：CN101974512B
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201010521015.4
申请日：2010-10-27
Applicant: 重庆大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明提供了一种适用于microRNAs分析的番茄总RNA提取方法。本方法特征在于通过80℃预热的酚和TLES缓冲液(100mM三羟甲基氨基甲烷(Tris，pH 8.0)、10mM氯化锂、10mM乙二胺四乙酸(EDTA，pH 8.0)、1％十二烷基硫酸钠(SDS，w/v))，并结合异丙醇和乙酸钠/乙醇提取总RNA，不仅能分离大片段RNA，而且能够有效沉淀小分子RNA。提取的RNA质量高，完整性好，可以用于RT-PCR、northern杂交等基因分离和表达分析，以及microRNAs等小分子RNA的研究。该方法具有简单、廉价、高效、易于操作等优点，适合在分子生物学实验中使用。
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公开(公告)号：CN101285101B
公开(公告)日：2011-06-29
申请号：CN200810069713.8
申请日：2008-05-22
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明是一种采用植物基因作为番茄遗传转化筛选标记基因的方法与应用。该方法包括植物基因的克隆、表达载体的构建、番茄的转化和转基因番茄的鉴定等步骤。该方法简单，操作安全，开创了利用植物基因作为番茄转化安全筛选标记基因的途径，能够代替目前广泛使用的抗生素基因、抗除草剂基因以及xylA、pmi、GUS等异源基因作为标记基因存在的弊端，获得具有食品安全性、生物安全性和生态安全性的转基因番茄，解除公众对标记基因安全性的顾虑，必将促进转基因番茄的商业化应用。
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公开(公告)号：CN101285101A
公开(公告)日：2008-10-15
申请号：CN200810069713.8
申请日：2008-05-22
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明是一种采用植物基因作为番茄遗传转化筛选标记基因的方法与应用。该方法包括植物基因的克隆、表达载体的构建、番茄的转化和转基因番茄的鉴定等步骤。该方法简单，操作安全，开创了利用植物基因作为番茄转化安全筛选标记基因的途径，能够代替目前广泛使用的抗生素基因、抗除草剂基因以及xylA、pmi、GUS等异源基因作为标记基因存在的弊端，获得具有食品安全性、生物安全性和生态安全性的转基因番茄，解除公众对标记基因安全性的顾虑，必将促进转基因番茄的商业化应用。
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公开(公告)号：CN102533779A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010591174.1
申请日：2010-12-16
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种番茄生长素受体同源基因SlTIR1，其具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；使用该基因cDNA编码框序列转化所得的转基因农作物能够产生单性结实果实。本发明还公开了一种DNA质粒，其含有上述番茄生长素受体SlTIR1基因或者其中编码框序列所构建得到的超表达框。将本发明基因的编码序列通过重组超表达载体导入植物组织、细胞或器官，再将被转化的植物细胞、组织或器官培养成植株，可以得到单性结实的转基因植株。本发明的基因对于单性结实机制的研究，提高植物的单性结实相关性状的改良具有重要的理论及实际意义，在作物的改良工作中具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN101245102A
公开(公告)日：2008-08-20
申请号：CN200810069227.6
申请日：2008-01-10
Applicant: 重庆大学
IPC: C07K14/765 , C07K16/18 , C07C69/608
Abstract: 本发明涉及天然杀虫剂除虫菊酯多克隆抗体的制备方法，是专门针对除虫菊酯免疫分析技术中的关键问题而建立起来的一种多克隆抗体的制备方法。首先，采用合成含羧基半抗原的方法在除虫菊酯五元环的酮基上引入羧基制备6种单体的半抗原；其次，采用碳二亚胺(EDC)法将合成的半抗原与牛血清白蛋白(BSA)偶联制得除虫菊酯6种人工完全抗原；进而免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。通过颜色反应，紫外光谱分析和间接ELISA检测证实，该方法制备除虫菊酯6种人工抗原及多克隆抗体的技术路线是可行的。合成的6种完全抗原及多克隆抗体为开发一种简单、快速，适于天然除虫菊酯残留现场监控的痕量免疫分析方法具有重要的现实意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1815217A
公开(公告)日：2006-08-09
申请号：CN200610054103.1
申请日：2006-03-02
Applicant: 重庆大学 , 重庆重大生物技术发展有限公司
Abstract: 本发明涉及一种利用反相液相色谱法检测、分离纯化天然除虫菊酯有效成分的方法，其色谱条件为NUCLEODUR (闪电)C18色谱柱，流动相：乙腈－水溶液，A液为水，B液为90％乙腈，柱温40℃，检测波长235nm。采用本发明能够成功地分离纯化天然除虫菊酯六种有效成分，得到的产品纯度达到99％。这种分离方法具有如下优点：色谱分离柱比较普及，流动相易得，消耗低，操作简单、快速，分离效果好。其分离纯化的有效成分可以作为标准品并广泛应用于农业、林业、生物农药、食品卫生安全等多个领域。
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公开(公告)号：CN101974512A
公开(公告)日：2011-02-16
申请号：CN201010521015.4
申请日：2010-10-27
Applicant: 重庆大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明提供了一种适用于microRNAs分析的番茄总RNA提取方法。本方法特征在于通过80℃预热的酚和TLES缓冲液(100mM三羟甲基氨基甲烷(Tris，pH 8.0)、10mM氯化锂、10mM乙二胺四乙酸(EDTA，pH8.0)、1％十二烷基硫酸钠(SDS，w/v))，并结合异丙醇和乙酸钠/乙醇提取总RNA，不仅能分离大片段RNA，而且能够有效沉淀小分子RNA。提取的RNA质量高，完整性好，可以用于RT-PCR、northern杂交等基因分离和表达分析，以及microRNAs等小分子RNA的研究。该方法具有简单、廉价、高效、易于操作等优点，适合在分子生物学实验中使用。
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公开(公告)号：CN101560489A
公开(公告)日：2009-10-21
申请号：CN200910103925.8
申请日：2009-05-25
Applicant: 重庆大学
CPC classification number: Y02A40/946
Abstract: 本发明公开了一种榨菜直投式发酵剂及其制备方法，该直投式发酵剂利用来源于榨菜盐水中的肠膜明串珠菌、植物乳杆菌和乳酸乳杆菌，接种至MRS培养，扩大培养，离心冷冻干燥后，分别制备成肠膜明串珠菌、植物乳杆菌粉和乳酸乳杆菌粉，然后将三种菌粉按重量比60－70∶15－20∶15－20配制成复合乳酸菌粉，即榨菜直投式发酵剂。本榨菜直投式发酵剂易于储藏、保存，且携带和使用方便，制作快捷、简单。使用本发明产品用于发酵榨菜时，不但可以保留传统方法发酵榨菜具有的风味与质量，并且可以有效降低产品中亚硝酸盐的含量，明显缩短榨菜的发酵周期，从而提高产品的食用安全性和降低生产榨菜的成本。
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公开(公告)号：CN101260405A
公开(公告)日：2008-09-10
申请号：CN200810069226.1
申请日：2008-01-10
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种植物生长素调控的启动子及其应用。该启动子分离自番茄基因组DNA，与果实生长发育相关并且受生长素的正调控，其核苷酸是SEQ ID NO：1所示的核苷酸，长度为1031bp。本发明提供了一种分析鉴定该启动子受生长素调控的有效方法。启动子5’端截短构建实验表明该启动子在－250bp至－1000bp区域内不存在生长素响应位点，但在－250bp序列内可能存在着生长素响应位点。利用该启动子可以构建各种重组表达载体，并能驱动报告基因表达，如GUS基因。利用该启动子所构建的载体可以转化宿主细胞并获得相关转基因植物，为进一步揭示生长素调控启动子的分子机理奠定基础。
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公开(公告)号：CN119506321A
公开(公告)日：2025-02-25
申请号：CN202411671491.2
申请日：2024-11-21
Applicant: 重庆大学
IPC: C12N15/75 , C12N15/66 , C12N15/60 , C12N15/55 , C12N1/21 , C12N15/34 , C12P17/12 , C12R1/125 , C12R1/07
Abstract: 本发明涉及一种质粒pHT01‑P43‑CI857‑PR‑PdxT‑PdxS及其制备方法，以及含有该质粒的枯草芽孢杆菌及其在表达磷酸吡哆醛PLP中的应用，属于基因工程领域。针对现有技术中磷酸吡哆醛生产效率低的问题，本发明通过构建包含温敏转录因子CI857、特定启动子和枯草芽孢杆菌SCK6的PdxS、PdxT基因的质粒，实现了高效表达磷酸吡哆醛所需的关键因子。首先获得基础质粒pHT01‑P43，然后依次插入CI857、PR‑PdxT和PdxS基因片段，最终得到目标质粒。将该质粒转入枯草芽孢杆菌中，可显著提高磷酸吡哆醛的产量。本发明提供了一种高效、稳定的磷酸吡哆醛生产方法，对于工业生产和科学研究具有重要意义。
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