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公开(公告)号：CN107955814B
公开(公告)日：2020-02-07
申请号：CN201711376849.9
申请日：2017-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高蛋白表达效率的启动子，属于启动子工程领域。本发明所述方法中涉及的启动子PBH4是在启动子PsrfA的基础上对其核心区进行突变改造而形成的。在新启动子PBH4控制转录下，表达绿色荧光蛋白(GFP)时，使用PBH4的表达量是使用PsrfA的3.5倍，表达葡糖醛酸酶A(GusA)时，使用PBH4使酶活从0.6U/ml提高至8.9±0.1U/ml。
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公开(公告)号：CN109652418A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201811547733.1
申请日：2018-12-18
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12R1/125
CPC classification number: C12N15/113 , C07K14/32 , C12N2830/36
Abstract: 本发明公开了一种新终止子及其应用，属于基因工程技术领域。本发明首先对单终止子的活性进行表征，通过不同活性的终止子进行组合串联的方式，得到了一系列可提高目的蛋白产量的新型终止子，以绿色荧光蛋白基因作为终止子上游基因，以红色荧光蛋白基因作为终止子下游基因，表征终止子对上下游基因的调控水平。结果表明，这些新型终止子对于提高上游基因表达量和抑制下游基因表达量都有良好的效果。这对在枯草芽孢杆菌中生产目的蛋白具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN109652417A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201811542085.0
申请日：2018-12-17
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12P21/00 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种构建高效枯草芽孢杆菌启动子的方法，属于基因工程技术领域。本发明将不同sigma亚基识别的天然启动子串联得到一些双串联、三串联启动子，并在启动子串联的基础之上优化了启动子核心区之间的间隔序列长度进一步提升了启动子的活性，最后将启动子进行不同的RBS设计，不仅验证了该策略可以提升启动子和其他基因表达调控元件之间的兼容性，也对外源基因的表达进行了可控的调节。通过本发明提供的方法，我们可以用简便的启动子设计和改造方法获得活性更高、设计性和兼容性更强的启动子。该方法简单、易于实现，在构建外源蛋白高效表达系统和合成生物学研究中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN109593750A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201910039981.3
申请日：2019-01-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种腈水合酶突变体、含该突变体的基因工程菌及其应用，属于酶工程技术领域。本发明是将腈水合酶突变体αL6T/A19V/F126Y-βM46K/E108R/S212Y(公开于发明专利CN102216455A)的第47位甘氨酸突变为天冬酰胺，获得的新突变酶具有更好的温度耐受性和产物耐受性，有利于以后的工业生产。将含该腈水合酶突变体的重组菌株高密度发酵，以烟腈为底物，进行全细胞催化反应制备烟酰胺。此法与化学生产法相比，生产工艺安全清洁，无环境污染，与酶法相比，底物价格便宜，催化效率高，终产物烟酰胺产率95％以上，浓度达到680g/L，简化了产物的分离纯化步骤。
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公开(公告)号：CN109337891A
公开(公告)日：2019-02-15
申请号：CN201811493273.9
申请日：2018-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的苯丙氨酸氨基变位酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明的苯丙氨酸氨基变位酶的突变体序列如SEQ ID NO.2所示，该突变酶的比酶活相对于野生型略有提高，在50℃处理1h仍有83％残留酶活性，温度稳定性相比野生酶有了大幅度的提高，更适合应用于工业生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105505931B
公开(公告)日：2018-11-09
申请号：CN201610004239.5
申请日：2016-01-05
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12N9/54 , C12N9/48
Abstract: 本发明公开了一种强启动子及其在提高纳豆激酶表达的应用，属于微生物基因工程领域。本发明涉及的一系列启动子基因是在启动子PP43和/或PHpaII的基础上对其进行n次(n≥1)串联形成的。在强启动子PHpaII‑PHpaII‑PP43控制转录下，重组纳豆激酶的纤溶活力高达264.2FU/ml。该方法高效安全，能够有效提高纳豆激酶的表达量，且为进一步研究启动子对异源基因表达的影响提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN104962571B
公开(公告)日：2018-08-21
申请号：CN201510364026.9
申请日：2015-06-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种固定化马来酸顺反异构酶及其制备方法与应用，属于酶学与酶工程技术领域与生物化工领域。本发明将R5肽段连接在马来酸顺反异构酶的N端，再将R5‑MaiA用戊二醛交联，最后用硅反应液将交联后的R5‑MaiA进行包埋，完成马来酸顺反异构酶的固定化。用成本低、易操作的方法获得了稳定性高的固定化马来酸顺反异构酶(R5‑MI‑CLEA‑Si)，固定化酶最适反应温度为55℃，最适反应pH为7.7；在55℃条件下固定化酶的半衰期为4h，游离酶的半衰期为0.5h，固定化酶的稳定性是游离酶的8倍，重复催化反应8次后固定化酶的酶活仍能保留75％。
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公开(公告)号：CN108004225A
公开(公告)日：2018-05-08
申请号：CN201711375805.4
申请日：2017-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种成团泛菌来源的苯丙氨酸氨基变位酶的突变体，属于酶工程技术领域。本发明的苯丙氨酸氨基变位酶的突变体序列如SEQ ID NO.2所示，该突变酶在50℃处理1小时仍有60％残留酶活性，相比野生酶有了较大的温度稳定性提高。同时该突变体也具备了更好的pH稳定性，有利于以后的工业生产。
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公开(公告)号：CN104131017A
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201410362681.6
申请日：2014-07-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种粘红酵母苯丙氨酸脱氨酶基因及其应用，属于生物技术领域。苯丙氨酸脱氨酶基因的克隆对采用酶法生物合成L-苯丙氨酸具有重要的作用。本发明所述的苯丙氨酸脱氨酶基因是通过提取粘红酵母的RNA，反转录获得全长的苯丙氨酸脱氨酶基因，该基因全长2121bp，编码705个氨基酸。本发明进一步扩大了苯丙氨酸脱氨酶基因资源，为分子改造苯丙氨酸脱氨酶，提高酶的稳定性和催化活性提供了科学依据。
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