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公开(公告)号：CN118240896A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410469292.7
申请日：2024-04-18
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种增强细胞壁合成蛋白基因表达以提高阿卡波糖发酵水平的方法。通过在游动放线菌SE50/110中分析在不同麦芽糖添加量的培养情况下的比较蛋白组数据，获得随着麦芽糖浓度提升而表达水平提升的细胞壁合成蛋白ACPL_5865，并利用强启动子kasOp*强化表达细胞壁合成蛋白基因ACPL_5865，得到阿卡波糖高产突变菌株。增强细胞壁合成蛋白基因的表达，可以提高游动放线菌SE50/110在高浓度麦芽糖添加的培养基中的耐受能力，最终明显提高阿卡波糖产量。与出发菌株相比，本发明所得到的高产菌株发酵产量提高了13.5％，实验室摇瓶发酵水平分别达到3.11g/L。
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公开(公告)号：CN114457103B
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN202210224071.4
申请日：2022-03-07
Applicant: 上海交通大学 , 泰兴市东圣生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/dCas9敲低调控蛋白表达以提高TG酶产量的方法；是通过CRISPR/dCas9技术同时敲低茂源链霉菌C2基因组中调控蛋白编码基因SMDS_4150、SMDS_1792、SMDS_3072和SMDS_720，得到TG酶产量提高的突变株。同时敲低4个调控蛋白编码基因降低了它们对TG酶的负调控，由此来提高TG酶产量。本发明所得的工程菌株的TG酶发酵终产量较转入空载体的对照菌株提高了74.3％。通过本发明可显著提高TG酶的发酵产量，同时使发酵成本大幅降低。
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公开(公告)号：CN113846041B
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202111293718.0
申请日：2021-11-03
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种增强转运蛋白基因的表达以提高盐霉素发酵水平的方法；包括在白色链霉菌BK 3‑25中，分别过量表达内源转运蛋白基因SLNHY_0929、SLNHY_1893、SLNHY_3363、SLNHY_4037、SLNHY_0199、SLNHY_0818、SLNHY_6316和SLNHY_6652，得到高产盐霉素的突变株。本发明通过增强转运蛋白基因的转录水平，提高盐霉素的外排效率、降低其胞内毒性、解除相关合成酶的反馈抑制，最终可明显提高盐霉素产量。
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公开(公告)号：CN112410278B
公开(公告)日：2023-01-10
申请号：CN202011374492.2
申请日：2020-11-30
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种在白色链霉菌中高效合成默诺霉素A的方法；是基于默诺霉素A生物合成基因簇异源表达宿主Streptomyces.albus导入定点突变型A类青霉素结合蛋白基因优化其异源宿主的方法，默诺霉素A通过作用于细菌细胞壁aPBP的肽聚糖糖基转移酶结构域活性位点，来高效抑制革兰氏阳性细菌细胞壁的合成。通过基因工程的手段对默诺霉素生物合成基因簇进行大片段组装和启动子优化，在优化菌株II中导入默诺霉素A抗性基因MaPBP进一步提高菌株II默诺霉素耐受性。最终在菌株LX03中默诺霉素A异源表达产量相比出发菌株I提高了110％。本发明不仅阐述了大片段基因簇的基因工程改造方法，同时也开启了抗性基因优化Streptomyces.albus宿主来提高目标化合物产量的先河。
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公开(公告)号：CN115029290A
公开(公告)日：2022-09-09
申请号：CN202210265587.3
申请日：2022-03-17
Applicant: 上海交通大学 , 泰兴市东圣生物科技有限公司
IPC: C12N1/21 , C12N15/76 , C12N15/113 , C12N9/10 , C12R1/465
Abstract: 本发明公开了一种抑制非必需高丰度蛋白表达以提高TG酶发酵水平的方法，是通过在茂源链霉菌IPIO中，利用CRISPRi技术弱化茂源链霉菌IPIO中非必需高丰度蛋白编码基因的转录水平，得到高产谷氨酰胺转氨酶的突变株。本发明通过降低高丰度蛋白编码基因SMDS_5177、SMDS_758、SMDS_5989和SMDS_6427的转录水平，抑制了这些蛋白的合成，减轻TG酶合成过程中的氨基酸前体竞争压力，以此来提高谷氨酰胺转氨酶的发酵水平。本发明所得的工程菌株的谷氨酰胺转氨酶发酵产量在实验室摇瓶水平下较对照菌株分别提高37％、35％、46％和32％。通过本发明可显著提高谷氨酰胺转氨酶的发酵产量，同时大幅度降低发酵成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113005071B
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN202110250694.4
申请日：2021-03-08
Applicant: 上海交通大学 , 江苏东汇生物科技有限公司 , 泰兴市东圣生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种SsgA编码基因SMDS_1018的用途、重组菌株及其构建方法。本发明通过增强SsgA编码基因的转录水平，促进菌丝横隔形成、提高谷氨酰胺转氨酶酶原的分泌效率，进而提升谷氨酰胺转氨酶产量。通过在茂源链霉菌中，利用人工强启动子kasOp*过量表达内源SsgA编码基因SMDS_1018，得到高产谷氨酰胺转氨酶的重组菌株WD07。增强SsgA编码基因的转录水平使菌丝横隔增多，提高了谷氨酰胺转氨酶酶原的分泌，最终可明显提高谷氨酰胺转氨酶产量。所得的重组菌株WD07的谷氨酰胺转氨酶发酵终产量在实验室摇瓶水平下较对照菌株提高35％。
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公开(公告)号：CN112961845B
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN202110250695.9
申请日：2021-03-08
Applicant: 上海交通大学 , 江苏东汇生物科技有限公司 , 泰兴市东圣生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9技术敲除cslA基因以提高谷氨酰胺转氨酶发酵水平的方法，是通过CRISPR/Cas9技术敲除茂源链霉菌DSM D40587基因组中CslA编码基因SMDS_4125，得到谷氨酰胺转氨酶产量提高的突变株。缺失CslA编码基因使得菌丝球变得小而疏松，提高了谷氨酰胺转氨酶酶原的分泌效率，由此来提高谷氨酰胺转氨酶产量。本发明所得的工程菌株的谷氨酰胺转氨酶发酵终产量较野生菌株提高了2.5倍。通过本发明可显著提高谷氨酰胺转氨酶的发酵产量，同时使发酵成本大幅降低。
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公开(公告)号：CN113005071A
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN202110250694.4
申请日：2021-03-08
Applicant: 上海交通大学 , 江苏东汇生物科技有限公司 , 泰兴市东圣生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种SsgA编码基因SMDS_1018的用途、重组菌株及其构建方法。本发明通过增强SsgA编码基因的转录水平，促进菌丝横隔形成、提高谷氨酰胺转氨酶酶原的分泌效率，进而提升谷氨酰胺转氨酶产量。通过在茂源链霉菌中，利用人工强启动子kasOp*过量表达内源SsgA编码基因SMDS_1018，得到高产谷氨酰胺转氨酶的重组菌株WD07。增强SsgA编码基因的转录水平使菌丝横隔增多，提高了谷氨酰胺转氨酶酶原的分泌，最终可明显提高谷氨酰胺转氨酶产量。所得的重组菌株WD07的谷氨酰胺转氨酶发酵终产量在实验室摇瓶水平下较对照菌株提高35％。
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公开(公告)号：CN112522174A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011564851.0
申请日：2020-12-25
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种敲除负调控基因以提高阿卡波糖发酵水平的方法。采用本发明方法，通过在游动放线菌中，分别敲除负调控蛋白基因ACPL_5445和ACPL_3989，得到阿卡波糖高产突变菌株。通过本发明敲除负调控蛋白基因，可以促进阿卡波糖生物合成基因的表达，最终明显提高阿卡波糖产量。与出发菌株相比，本发明所得的高产菌株发酵产量分别提高了13％和8％，实验室摇瓶发酵水平分别达到3.62g/L和3.47g/L。
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公开(公告)号：CN106566850B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201610976350.0
申请日：2016-11-07
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种井冈霉烯胺的生物制备方法；包括在体外条件下用氨基转移酶WecE完成井冈霉烯酮向井冈霉烯胺的生物转化，或是将WecE基因整合入可以产生井冈霉烯酮前体化合物的菌株，使整合有WecE基因的菌株直接通过发酵生产井冈霉烯胺。本发明解决了制备井冈霉烯胺的化学合成方法所固有的反应步骤多、收率低、反应条件苛刻及有机试剂污染等缺陷；基于具有氨基转移酶催化的氨基转移反应，建立了方便、高效、立体选择性强的井冈酶烯胺直接生物合成策略，为II型糖尿病临床药物伏格列波糖、阿卡波糖的合成及糖苷酶抑制剂药物开发提供了合成中间体。
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