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公开(公告)号:CN118956877A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202411364640.0
申请日:2022-05-06
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/87 , A01H5/00 , A01H7/00
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统编辑落叶松PDS基因的g RNA及其应用,涉及植物基因工程技术领域,本发明通过确定落叶松目的基因编辑位点,设计目的靶点的g RNA,然后将Cas9蛋白与落叶松目的基因g RNA混合,得到落叶松RNP复合物,最后采用基因介导的转化方式,将所述落叶松RNP复合物转化到落叶松胚性愈伤组织中,完成对落叶松愈伤组织的基因编辑,最终细胞转化成无转基因成分的落叶松基因编辑突变体,整个过程中不用构建Ti质粒,不涉及任何外源DNA,编辑方式更精准、且简单易行。
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公开(公告)号:CN117025666A
公开(公告)日:2023-11-10
申请号:CN202311250647.5
申请日:2023-09-26
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/06 , A01H6/00
Abstract: 本发明提供了杨树PuRR9基因在调控大青杨生长发育中的应用,涉及生物技术领域。本发明通过将PuRR9基因转入大青杨树,过量表达PuRR9的转基因株系(PuRR9‑OE#1,PuRR9‑OE#5)根系发达,不定根较长,鲜重比较大。在胁迫条件下,野生型大青杨根系生长被严重抑制,而对过量表达PuRR9转基因植株(RR9‑OE#1和RR9‑OE#5)根的影响无显著差异,与胁迫前根长相比无显著差异,表明PuRR9转基因植株的内源细胞分裂素含量显著下调,同时对细胞分裂素的敏感性降低。说明大青杨细胞分裂素响应因子PuRR9的是控制大青杨生长发育的关键调节因子,在林木基因工程领域有重要应用价值。
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公开(公告)号:CN110184285B
公开(公告)日:2020-12-11
申请号:CN201910480926.8
申请日:2019-06-04
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明提供了一种核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的抗锌胁迫的PuGSTU17基因、PuGSTU17蛋白、重组表达载体及其应用,涉及生物技术领域。所述PuGSTU17基因从大青杨中分离得到。如本发明实施例中的实验所示,利用本发明提供的PuGSTU17基因构建过表达载体,使PuGSTU17基因在大青杨中过表达,在锌胁迫条件下的转基因植株根系发达、根系长、干重高。本发明首次在植物中发现了能够提高抗锌胁迫的PuGSTU17基因,有效地提高了转基因植株在高锌胁迫下的抗逆能力,可促进根系在锌胁迫条件下生长。
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公开(公告)号:CN110313403A
公开(公告)日:2019-10-11
申请号:CN201910720648.9
申请日:2019-08-06
Applicant: 东北林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明提供了一种白桦胚性愈伤组织诱导培养基、诱导胚性愈伤组织的方法及组培苗的培育方法,属于植物组织培养技术领域。本发明提供的白桦胚性愈伤组织诱导培养基,以MS培养基为基本培养基,还包括以下含量组分:2,4-D 2mg/L、NAA 0.2mg/L、琼脂5.5g/L和蔗糖40g/L;所述胚性愈伤组织诱导培养基的pH值为5.8。利用本发明的培养基愈伤诱导率高达90%以上,胚性愈伤诱导率达19%以上。
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公开(公告)号:CN110184285A
公开(公告)日:2019-08-30
申请号:CN201910480926.8
申请日:2019-06-04
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明提供了一种核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的抗锌胁迫的PuGSTU17基因、PuGSTU17蛋白、重组表达载体及其应用,涉及生物技术领域。所述PuGSTU17基因从大青杨中分离得到。如本发明实施例中的实验所示,利用本发明提供的PuGSTU17基因构建过表达载体,使PuGSTU17基因在大青杨中过表达,在锌胁迫条件下的转基因植株根系发达、根系长、干重高。本发明首次在植物中发现了能够提高抗锌胁迫的PuGSTU17基因,有效地提高了转基因植株在高锌胁迫下的抗逆能力,可促进根系在锌胁迫条件下生长。
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公开(公告)号:CN103060372B
公开(公告)日:2014-10-08
申请号:CN201310021280.X
申请日:2013-01-21
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 一种农杆菌介导的培育转基因旱柳植株的方法,涉及一种培育转基因旱柳植株的方法。是要解决现有的方法无法从柳树的转基因愈伤组织中诱导抗性芽,因此无法获得柳树的转基因植株的问题。方法:一、旱柳种子消毒,预培养;二、挑取携带pBI121载体的根癌农杆菌,培养得菌液;三、将种子从基部切除萌发出来的顶芽部位作为外植体,置于菌液中浸泡;四、取出用滤纸吸干,接入共培养培养基;五、转入选择培养基,至长出抗性芽,转入光照条件,筛选抗性芽;六、抗性芽转到伸长培养基;七将切下茎段,转到生根培养基培养至长出根系;八、进行PCR及GUS染色检测,移栽到土里,即获得转基因旱柳植株。本发明用于培育转基因旱柳植株。
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公开(公告)号:CN102283111A
公开(公告)日:2011-12-21
申请号:CN201110162303.X
申请日:2011-06-16
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 大青杨转基因体系建立及其转基因植株的扩繁方法,它涉及转基因体系建立及其转基因植株的扩繁方法。体系建立:获得组培苗;含有LbDREB基因的工程菌的活化及外源基因的转化;脱菌后获得抗性芽;抗性芽生根及移栽;再生植株进行PCR和RT-PCR检测,选取阳性植株,即完成。扩繁:大青杨转基因体系建立所获得的大青杨转基因再生植株进行分化培养,获得组培苗;进行PCR和RT-PCR检测,取阳性的根、茎段和叶片;三、重复操作2次,即完成。本发明可实现转基因大青杨的快速培育,为大青杨优良品种的开发奠定基础;产生的后代遗传稳定性好,对于实现大青杨转基因苗木的大规模、短周期、高繁殖率和低成本的工厂化生产有重要意义。
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公开(公告)号:CN101218895A
公开(公告)日:2008-07-16
申请号:CN200810063950.3
申请日:2008-01-30
Applicant: 东北林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 一种长白落叶松离体培养不定芽诱导植株再生的方法,它涉及一种松树离体培养不定芽诱导植株再生的方法。它解决了长白落叶松组织培养器官发生困难、植株再生率低,及目前用长白落叶松的成熟胚、花芽和腋芽、幼嫩茎段作为外植体不定芽诱导率低的问题。方法:1.合子胚培养诱导愈伤组织;2.诱导生长不定芽;3.继续培养并诱导生根,即得到长白落叶松离体再生植株。本发明以长白落叶松成熟种子为外植体进行不定芽诱导,获得了高诱导率的不定芽,比目前已有不定芽诱导技术提高9倍以上,而且愈伤组织诱导率均高于90%,对于长白落叶松的大量扩繁和基因工程育种研究具有广泛的应用价值。
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公开(公告)号:CN118291485A
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202410540836.4
申请日:2024-04-30
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H7/00
Abstract: 本发明提供了一种落叶松LkMYB6基因及其编码的蛋白质、应用、过表达载体和获取方法,属于基因工程技术领域。本发明根据落叶松干旱胁迫响应转录组测序数据,筛选发现LkMYB6基因响应干旱胁迫。利用农杆菌转化法创制日5×兴9杂种落叶松LkMYB6基因过表达胚性愈伤组织,通过诱导体细胞胚获得过表达组培苗,并进行初步的抗逆性分析。本发明证明了LkMYB6转录因子响应干旱信号的机制,而且在杂种落叶松中遗传转化可以增强其耐旱性。这些研究结果对未来林业良种繁育提供一定的理论基础。
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公开(公告)号:CN114790464A
公开(公告)日:2022-07-26
申请号:CN202210484516.2
申请日:2022-05-06
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种基于CRISPR/Cas9系统的落叶松DNA‑free基因编辑方法。本发明通过确定落叶松目的基因编辑位点,设计目的靶点的gRNA,结合CRISPR/Cas9系统实现落叶松目的基因的DNA‑free编辑,获得落叶松基因编辑突变体,为落叶松及其他木本植物的基于CRISPR/Cas9系统的基因编辑技术提供参考。
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