公开(公告)号：CN102590527B

公开(公告)日：2014-04-23

申请号：CN201210012498.4

申请日：2012-01-16

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 王保民 ,  南铁贵 ,  何丽珊 ,  谭桂玉 ,  孙硕 ,  曹振 ,  张亮 ,  李召虎

IPC: G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种检测杀虫晶体蛋白Bt？Cry1Ab/Ac的方法及其专用酶联免疫试剂盒。该方法及试剂盒所使用的抗Bt？Cry1Ab/Ac的单克隆抗体是由杂交瘤细胞株Bt2F9分泌产生的，该杂交瘤细胞株在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC？No.5162。本发明所提供单克隆抗体是同时以Bt？Cry1Ac蛋白溶液和转Bt？Cry1Ac基因棉花植株叶片的提取液为包被抗原，通过间接非竞争ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选得到的、对在植物中表达的Bt？Cry1Ab/Ac蛋白具有高亲和力的抗体，亲和常数为1.03×109M-1；利用该单克隆抗体制备得到的双抗夹心酶联免疫试剂盒，用于定性或定量检测棉花、玉米等转基因植物中的Bt？Cry1Ab/Ac蛋白，线性检测范围在0.78～50ng/mL，具有快速、灵敏的优点。

公开(公告)号：CN102590527A

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201210012498.4

申请日：2012-01-16

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 王保民 ,  南铁贵 ,  何丽珊 ,  谭桂玉 ,  孙硕 ,  曹振 ,  张亮 ,  李召虎

IPC: G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种检测杀虫晶体蛋白Bt Cry1Ab/Ac的方法及其专用酶联免疫试剂盒。该方法及试剂盒所使用的抗Bt Cry1Ab/Ac的单克隆抗体是由杂交瘤细胞株Bt2F9分泌产生的，该杂交瘤细胞株在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.5162。本发明所提供单克隆抗体是同时以Bt Cry1Ac蛋白溶液和转Bt Cry1Ac基因棉花植株叶片的提取液为包被抗原，通过间接非竞争ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选得到的、对在植物中表达的Bt Cry1Ab/Ac蛋白具有高亲和力的抗体，亲和常数为1.03×109M-1；利用该单克隆抗体制备得到的双抗夹心酶联免疫试剂盒，用于定性或定量检测棉花、玉米等转基因植物中的Bt Cry1Ab/Ac蛋白，线性检测范围在0.78～50ng/mL，具有快速、灵敏的优点。

公开(公告)号：CN102190723A

公开(公告)日：2011-09-21

申请号：CN201110090978.8

申请日：2011-04-12

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 王保民 ,  孙硕 ,  赵洪伟 ,  南铁贵 ,  高巍 ,  谭桂玉 ,  王敏 ,  曹振 ,  何丽珊 ,  张炜 ,  李召虎

IPC: C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了铬离子抗原及其制备方法与应用。本发明所提供的制备铬离子抗原的方法，包括如下步骤：(1)将螯合剂进行重氮化反应，得到重氮化螯合剂；(2)将所述步骤(1)得到的重氮化的螯合剂与载体蛋白进行偶联反应，得到偶联产物；(3)将所述步骤(2)得到的偶联产物与铬离子进行络合反应，得到络合物，即得到铬离子抗原。本发明所提供的制备铬离子抗原的方法能够方便、快捷地获得铬离子抗原，且合成步骤简洁明了、合成成本低，效果好。用本发明方法制备的铬离子抗原进行免疫得到的抗体特异性好、最低检测限值低。因此，本发明所提供的制备铬离子抗原的方法以及由该方法获得的铬离子抗原，将在铬离子的酶联免疫检测中有广阔的应用前景。