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公开(公告)号：CN103233020A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310122670.6
申请日：2013-04-10
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry34B的制备方法。该方法包括如下步骤：1）将SEQ ID №.1所示的DNA插入pET28a表达载体中，得到重组表达载体；2）将所述重组表达载体导入大肠杆菌BL21（DE3），得到重组菌；3）培养所述重组菌，并进行诱导表达，收集菌体；裂解菌体，即得。本发明应用基因工程方法在国内首次合成Bt Cry34B基因，并首次制备出了Bt Cry34B融合蛋白，为进一步探讨该蛋白的检测方法、生理功能及其作用机制、降解机制打下了基础。
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公开(公告)号：CN103159778B
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201310102015.4
申请日：2013-03-27
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07D493/20 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , G01N33/53 , G01N33/531 , G01N30/60
Abstract: 本发明公开了一种半抗原、其抗原、其相应的抗体及其在检测蒿甲醚中的应用。本发明提供的半抗原为式（Ⅱ）所示的化合物。本发明提供的化合物，可以作为半抗原，该半抗原与载体蛋白偶联后可以得到抗原，用抗原免疫动物，可以得到特异性针对蒿甲醚抗原的抗体。本发明还提供了所述化合物的制备方法，步骤简洁、成本低廉。用本发明方法制备的抗体的特异性好（与蒿甲醚结构类似物的交叉反应率低）、灵敏度高。本发明可用于蒿甲醚药物的大规模检测与质量控制，在蒿甲醚的快速免疫检测应用中将有广阔的前景。式（Ⅱ）。
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公开(公告)号：CN103233021B
公开(公告)日：2014-12-03
申请号：CN201310133824.1
申请日：2013-04-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/32 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12N15/70 , C07K14/325 , C07K19/00 , A01N57/16 , A01N63/02 , A61P7/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法。该方法涉及一种经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry35Ba2的基因，具体如序列表中序列1所示。本发明所提供的苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：1）将含有序列1的第109-1269位或整个序列1所示DNA片段的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry35Ba2（序列2）。在大肠杆菌中，本发明所提供的经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry35Ba2基因（N-Cry35Ba2基因）表达所得蛋白并未因密码子优化而影响其蛋白活性。
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公开(公告)号：CN103159778A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310102015.4
申请日：2013-03-27
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07D493/20 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , G01N33/53 , G01N33/531 , G01N30/60
Abstract: 本发明公开了一种半抗原、其抗原、其相应的抗体及其在检测蒿甲醚中的应用。本发明提供的半抗原为式（Ⅱ）所示的化合物。本发明提供的化合物，可以作为半抗原，该半抗原与载体蛋白偶联后可以得到抗原，用抗原免疫动物，可以得到特异性针对蒿甲醚抗原的抗体。本发明还提供了所述化合物的制备方法，步骤简洁、成本低廉。用本发明方法制备的抗体的特异性好（与蒿甲醚结构类似物的交叉反应率低）、灵敏度高。本发明可用于蒿甲醚药物的大规模检测与质量控制，在蒿甲醚的快速免疫检测应用中将有广阔的前景。式（Ⅱ）。
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公开(公告)号：CN103233022A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310133842.X
申请日：2013-04-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/32 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12N15/11 , C12N15/70 , C07K14/325 , C07K19/00 , A01N57/16 , A01N63/02 , A61P7/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法。该方法涉及一种经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry9C的基因，具体如序列表中序列1所示。本发明所提供的苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：1）将含有序列1的第109-1548位或整个序列1所示DNA片段的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry9C（序列2）。在大肠杆菌中，本发明所提供的经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry9C基因（N-Cry9C基因）表达所得蛋白并未因密码子优化而影响其蛋白活性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103194460B
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201310133843.4
申请日：2013-04-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/32 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/21 , C07K14/325 , A01N47/44 , A01P7/04 , C12N15/70 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法。该方法涉及一种经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry3Bb的基因，具体如序列表中序列1所示。本发明所提供的苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：1）将含有序列1的第109-2064位或整个序列1所示DNA片段的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry3Bb（序列2）。在大肠杆菌中，本发明所提供的经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry3Bb基因（N-Cry3Bb基因）表达所得蛋白并未因密码子优化而影响其蛋白活性。
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公开(公告)号：CN103233020B
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201310122670.6
申请日：2013-04-10
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry34B的制备方法。该方法包括如下步骤：1）将SEQ ID №.1所示的DNA插入pET28a表达载体中，得到重组表达载体；2）将所述重组表达载体导入大肠杆菌BL21（DE3），得到重组菌；3）培养所述重组菌，并进行诱导表达，收集菌体；裂解菌体，即得。本发明应用基因工程方法在国内首次合成Bt Cry34B基因，并首次制备出了Bt Cry34B融合蛋白，为进一步探讨该蛋白的检测方法、生理功能及其作用机制、降解机制打下了基础。
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公开(公告)号：CN103233021A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310133824.1
申请日：2013-04-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/32 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12N15/70 , C07K14/325 , C07K19/00 , A01N57/16 , A01N63/02 , A61P7/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法。该方法涉及一种经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry35Ba2的基因，具体如序列表中序列1所示。本发明所提供的苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：1）将含有序列1的第109-1269位或整个序列1所示DNA片段的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry35Ba2（序列2）。在大肠杆菌中，本发明所提供的经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry35Ba2基因（N-Cry35Ba2基因）表达所得蛋白并未因密码子优化而影响其蛋白活性。
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公开(公告)号：CN103194460A
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN201310133843.4
申请日：2013-04-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/32 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/21 , C07K14/325 , A01N47/44 , A01P7/04 , C12N15/70 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法。该方法涉及一种经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry3Bb的基因，具体如序列表中序列1所示。本发明所提供的苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：1）将含有序列1的第109-2064位或整个序列1所示DNA片段的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry3Bb（序列2）。在大肠杆菌中，本发明所提供的经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry3Bb基因（N-Cry3Bb基因）表达所得蛋白并未因密码子优化而影响其蛋白活性。
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公开(公告)号：CN103233022B
公开(公告)日：2014-12-03
申请号：CN201310133842.X
申请日：2013-04-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/32 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12N15/11 , C12N15/70 , C07K14/325 , C07K19/00 , A01N57/16 , A01N63/02 , A61P7/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法。该方法涉及一种经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry9C的基因，具体如序列表中序列1所示。本发明所提供的苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：1）将含有序列1的第109-1548位或整个序列1所示DNA片段的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry9C（序列2）。在大肠杆菌中，本发明所提供的经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry9C基因（N-Cry9C基因）表达所得蛋白并未因密码子优化而影响其蛋白活性。
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