一种细胞信号通路抑制剂诱导猪脂肪细胞形成的方法

    公开(公告)号:CN102382800B

    公开(公告)日:2013-01-23

    申请号:CN201110404508.4

    申请日:2011-12-08

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供一种细胞信号通路抑制剂诱导猪脂肪细胞形成的方法,将猪胚胎成纤维细胞以4~6×104个/cm2的比例均匀的接种到Corning细胞培养板中,使用诱导培养基培养;37℃,5%CO2培养箱中培养20天时,对细胞进行观察并油红O染色证明其为脂肪细胞。利用细胞信号通路抑制剂而非转基因来诱导细胞转化,可有效的防止细胞基因组因插入外源基因而导致的基因突变。同时该方法对于研究脂肪细胞的形成机制有一定的促进作用,其简便性和安全性可被广泛的应用,可用于脂肪形成机制的研究,也能在疾病治疗等临床应用上发挥作用。

    表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建

    公开(公告)号:CN101892257A

    公开(公告)日:2010-11-24

    申请号:CN201010185086.1

    申请日:2010-05-28

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建,其特征在于:首先采用基因工程的方法构建pCEP4-Cre质粒,并用载体pCEP4-Cre与载体pEF-stop-eGFP共转染进入细胞,在表达Cre重组酶的情况下,将转入到细胞中的载体pEF-stop-eGFP中的Loxp卯定的终止子删除,使后接的报告基因eGFP得以表达,从而用于剪切条件性表达绿色荧光蛋白载体中的LoxP元件;其应用基因工程技术构建了一个表达Cre重组酶的质粒,并且重组质粒pCEP4-Cre可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在,并在撤去药物压力后以每代10%的速率丢失;可有效的防止细胞基因组因插入外源基因而导致的基因突变;其使用的简便性和安全性可被广泛的应用,为人类Cre重组酶系统的检测发展起到积极的推动作用。

    利用生殖特异性启动子表达cre的重组酶载体

    公开(公告)号:CN105400808A

    公开(公告)日:2016-03-16

    申请号:CN201510603431.1

    申请日:2015-09-22

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 一种利用生殖特异性启动子表达cre的重组酶载体,属于生物技术领域。本发明的目的是利用VASA基因的生殖特异性表达,来建立转基因猪模型的利用生殖特异性启动子表达cre的重组酶载体。本发明载体的构建方法是:①VASA转录起始位点上游序列扩增与纯化;②VASA转录起始位点上游序列测序;③VASA-Cre表达载体构建。本发明利用基因工程技术构建了一个生殖系统特异表达cre重组酶的质粒,并且重组质粒可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在。该质粒可以保证在生殖系统中特异表达cre重组酶,可以与loxp相结合,进行相关生殖系统表达基因的敲除,为cre重组酶系统的发展和相关基因的研究起到积极的推动作用。

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