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公开(公告)号:CN109735627A
公开(公告)日:2019-05-10
申请号:CN201811391687.0
申请日:2019-02-25
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了BTBD9基因作为牛超数排卵性状分子标记的应用,以提取的牛基因组DNA为模板,设计特异性引物一对,克隆牛BTBD9基因基因的部分DNA序列,通过测序及基因型分型并将不同基因型与超数排卵性状进行关联分析,为牛的标记辅助选择提供分子标记;该位点作为牛繁殖和生产性能辅助选择的分子标记并应用于遗传改良提供了重要的理论依据并具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN109182561A
公开(公告)日:2019-01-11
申请号:CN201811390487.3
申请日:2018-12-03
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了ARHGAP26作为牛超数排卵性状分子标记的应用,以提取的牛基因组DNA为模板,设计特异性引物一对,克隆牛ARHGAP26基因的部分DNA序列,通过测序及基因型分型并将不同基因型与超数排卵性状进行关联分析,为牛的标记辅助选择提供分子标记;该位点作为牛繁殖和生产性能辅助选择的分子标记并应用于遗传改良提供了重要的理论依据并具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN102382800B
公开(公告)日:2013-01-23
申请号:CN201110404508.4
申请日:2011-12-08
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种细胞信号通路抑制剂诱导猪脂肪细胞形成的方法,将猪胚胎成纤维细胞以4~6×104个/cm2的比例均匀的接种到Corning细胞培养板中,使用诱导培养基培养;37℃,5%CO2培养箱中培养20天时,对细胞进行观察并油红O染色证明其为脂肪细胞。利用细胞信号通路抑制剂而非转基因来诱导细胞转化,可有效的防止细胞基因组因插入外源基因而导致的基因突变。同时该方法对于研究脂肪细胞的形成机制有一定的促进作用,其简便性和安全性可被广泛的应用,可用于脂肪形成机制的研究,也能在疾病治疗等临床应用上发挥作用。
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公开(公告)号:CN101892257A
公开(公告)日:2010-11-24
申请号:CN201010185086.1
申请日:2010-05-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/63
Abstract: 本发明涉及一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建,其特征在于:首先采用基因工程的方法构建pCEP4-Cre质粒,并用载体pCEP4-Cre与载体pEF-stop-eGFP共转染进入细胞,在表达Cre重组酶的情况下,将转入到细胞中的载体pEF-stop-eGFP中的Loxp卯定的终止子删除,使后接的报告基因eGFP得以表达,从而用于剪切条件性表达绿色荧光蛋白载体中的LoxP元件;其应用基因工程技术构建了一个表达Cre重组酶的质粒,并且重组质粒pCEP4-Cre可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在,并在撤去药物压力后以每代10%的速率丢失;可有效的防止细胞基因组因插入外源基因而导致的基因突变;其使用的简便性和安全性可被广泛的应用,为人类Cre重组酶系统的检测发展起到积极的推动作用。
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公开(公告)号:CN101570763A
公开(公告)日:2009-11-04
申请号:CN200910066584.1
申请日:2009-03-04
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供一种用于制备人类疾病动物模型的转基因猪及其培养方法,采用基因工程的方法构建诱导性表达Cre重组酶表达载体pET28a-Mxl-Cre-BGHpolyA-FRT2neoR,用干扰素诱导剂聚肌胞(polyI:C)进行诱导后能够表达Cre重组酶,从而用于敲除靶基因;通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以诱导性表达Cre重组酶的猪成纤维细胞;利用体细胞核移植技术进行克隆猪。该克隆猪可用于制备人类疾病的基因敲除的动物模型。
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公开(公告)号:CN101550427A
公开(公告)日:2009-10-07
申请号:CN200910066596.4
申请日:2009-02-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/06 , A01K67/027 , C12Q1/25
Abstract: 本发明提供一种检测Cre位点特异重组酶活性的转基因报告猪及培养方法,采用基因工程的方法构建LoxP位点锚定终止子,后接报告基因的打靶载体,当Cre重组酶存在的情况下,将Loxp锚定的终止子删除,使后接的报告基因得以表达,从而用于监测Cre重组酶的活性;通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以特异性检测Cre活性的成纤维细胞;利用体核移植技术进行克隆猪。用于在体内监测Cre重组酶的活性,为建立人类疾病模型提供了监测工具,解决了目前转基因克隆猪的技术不成熟,克隆效率较低问题。
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公开(公告)号:CN109735627B
公开(公告)日:2022-04-19
申请号:CN201811391687.0
申请日:2019-02-25
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了BTBD9基因作为牛超数排卵性状分子标记的应用,以提取的牛基因组DNA为模板,设计特异性引物一对,克隆牛BTBD9基因基因的部分DNA序列,通过测序及基因型分型并将不同基因型与超数排卵性状进行关联分析,为牛的标记辅助选择提供分子标记;该位点作为牛繁殖和生产性能辅助选择的分子标记并应用于遗传改良提供了重要的理论依据并具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN105400808A
公开(公告)日:2016-03-16
申请号:CN201510603431.1
申请日:2015-09-22
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/873 , C12N15/89 , A01K67/027 , C12Q1/68
Abstract: 一种利用生殖特异性启动子表达cre的重组酶载体,属于生物技术领域。本发明的目的是利用VASA基因的生殖特异性表达,来建立转基因猪模型的利用生殖特异性启动子表达cre的重组酶载体。本发明载体的构建方法是:①VASA转录起始位点上游序列扩增与纯化;②VASA转录起始位点上游序列测序;③VASA-Cre表达载体构建。本发明利用基因工程技术构建了一个生殖系统特异表达cre重组酶的质粒,并且重组质粒可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在。该质粒可以保证在生殖系统中特异表达cre重组酶,可以与loxp相结合,进行相关生殖系统表达基因的敲除,为cre重组酶系统的发展和相关基因的研究起到积极的推动作用。
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公开(公告)号:CN103497932A
公开(公告)日:2014-01-08
申请号:CN201310481480.3
申请日:2013-10-16
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12Q1/68 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种对猪圆环病毒2型(PCV2)高敏感的细胞系,同时还公开了该细胞系的制备方法,采用PCV2感染PK-15细胞后3-羟-3-甲戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoAreductase,HMGCR)的表达有显著变化,且沉默HMGCR基因后,PCV2的TCID50达108.5/mL。用RNA干扰技术获得HMGCR基因沉默细胞系,并经过筛选,最终可获得对PCV2高度敏感的细胞系。用本发明制备的HMGCR基因沉默细胞培养猪圆环病毒2型,可获得较高滴度的病毒,有利于猪圆环病毒2型致病机理研究、病毒培养、全病毒灭活苗开发及工业化生产。
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