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公开(公告)号:CN111254160A
公开(公告)日:2020-06-09
申请号:CN202010234221.0
申请日:2020-03-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种高效鉴定水稻增强子的原生质体验证方法,包括如下步骤:(1)构建载体:正对照载体采用p1300LV载体,同时构建相应的负对照载体;(2)增强子的分离克隆及表达载体构建:选取增强子序列,以水稻基因组DNA为模板,PCR扩增得到目的片段,再与BsaI酶线性化的负对照载体连接,得到增强子表达载体;(3)制备水稻原生质体;(4)水稻原生质体的转化:将增强子表达载体与水稻原生质体在PEG介导下共培养,进行转化;(5)显微镜观察荧光信号。本发明方法首次提出了通过水稻瞬时转化验证增强子活性的方法,高效,快捷。
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公开(公告)号:CN119432868A
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202411342522.X
申请日:2024-09-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种水稻OsGIF1或DEP1基因上游的uORF元件及用途,所述调控水稻OsGIF1或DEP1基因表达的uORF元件核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑4任意一种所示,其中OsGIF1‑uORF1、OsGIF1‑uORF2可作为OsGIF1基因的表达调控元件,核苷酸序列如SEQ ID NO.1和2所示;DEP1‑uORF1、DEP1‑uORF2可作为DEP1基因的表达调控元件,核苷酸序列如SEQ ID NO.3和4所示。本发明uORF调控元件可分别用于调节水稻OsGIF1或DEP1基因的蛋白表达水平,改良了植株生长发育,将其应用于水稻品种的遗传改良,具有重要的育种价值。
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公开(公告)号:CN114292845B
公开(公告)日:2024-02-23
申请号:CN202111628276.0
申请日:2021-12-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种强活性的水稻启动子序列及验证方法,基因序列如SEQ ID NO.1。方法包括:(1)OsUBQ启动子序列扩增,构建OsUBQ驱动GFP的表达载体;(2)Ubi1启动子序列扩增,构建由Ubi1驱动的GFP表达载体;(3)使用CaMV35S启动子为正对照;(4)水稻原生质体制备与转化;子CaMV35S、OsUBQ和Ubi1活性。本发明的水稻启动子序列,本质是DNA分子,1405bp,能够启动基因的表达并且活性更强。(5)在瞬时表达系统通过荧光强度评估三个启动
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公开(公告)号:CN112553198B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN202011333005.8
申请日:2020-11-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/82 , C12N15/65 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明公开了一种有活性的落叶松增强子、获取及鉴定方法。增强子DNA序列如SEQ ID NO.1。用特异引物以日本落叶松的基因组DNA为模板,扩增得到560bp的扩增产物,即得。根据增强子可远距离促进转录的特征,mini35s启动子单独不能启动的报告基因GFP表达,当该载体中连入有功能的增强子后,其可以促进荧光蛋白转录,从而观察到荧光,以验证。本发明提供的落叶松增强子序列,本质是DNA分子,560bp,能够促进转录。
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公开(公告)号:CN111394385A
公开(公告)日:2020-07-10
申请号:CN202010234073.2
申请日:2020-03-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定水稻双向启动子的方法,该方法将双向启动子OsBDP1和OsBDP2两端分别连接两个不同的荧光蛋白GFP和RFP,在原生质体转化后观察两侧的荧光信号来检测其活性。该鉴定方法一方面利用瞬时转化缩短了实验时间,另一方面通过同时检测两侧荧光蛋白活性而减少了工作量,为快速鉴定水稻中的双向启动子提供了一个高效途径。
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公开(公告)号:CN107099849A
公开(公告)日:2017-08-29
申请号:CN201710442531.X
申请日:2017-06-13
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C40B40/06 , C12Q1/6841 , C12Q2563/107 , C12Q2543/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种特异识别栽培稻第9号染色体整条短臂的寡核苷酸文库及识别的方法。所述寡核苷酸文库,由SEQ ID NO.1‑2258所示的共2258条寡核苷酸组成。本发明还开了特异识别栽培稻第9号染色体整条短臂的方法,是先用所述的特异寡核苷酸文库制备获得带有荧光标记的特异寡核苷酸探针共2258个,再利用这些探针进行荧光原位杂交,根据荧光信号识别栽培稻第9号染色体整条短臂。利用本发明的整条染色体臂的涂染探针,可以识别水稻第9号染色体整条短臂,可以用其分析和研究染色体的重组、畸变和同源基因,也可以研究不同物种来源的染色体之间的进化关系。
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公开(公告)号:CN114774420A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210454378.3
申请日:2022-04-27
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82
Abstract: 本发明公开了一种水稻增强子及基于CRISPR/Cas9技术评估水稻增强子活性的方法,水稻增强子,序列如SEQ ID NO.1。获取增强子,长度为461 bp;LOC_Os07g34589基因的启动子中,分离得到62 bp mini启动子序列;构建负对照载体,使用LOC_Os07g34589基因的两个mini启动子序列反向连接,分别驱动Cas9蛋白和sgRNA表达;构建增强子检测载体,在上述负对照载体中,两个mini启动子中间插入igENH1增强子序列;水稻原生质体的制备与转化;转化后通过分析增强子活性。所述水稻增强子具有较好的增强转录效果。
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公开(公告)号:CN112553198A
公开(公告)日:2021-03-26
申请号:CN202011333005.8
申请日:2020-11-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/82 , C12N15/65 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明公开了一种有活性的落叶松增强子、获取及鉴定方法。增强子DNA序列如SEQ ID NO.1。用特异引物以日本落叶松的基因组DNA为模板,扩增得到560bp的扩增产物,即得。根据增强子可远距离促进转录的特征,mini35s启动子单独不能启动的报告基因GFP表达,当该载体中连入有功能的增强子后,其可以促进荧光蛋白转录,从而观察到荧光,以验证。本发明提供的落叶松增强子序列,本质是DNA分子,560bp,能够促进转录。
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公开(公告)号:CN112481260A
公开(公告)日:2021-03-12
申请号:CN202011332979.4
申请日:2020-11-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种具有启动子功能的落叶松DNA分子、获取及鉴定方法。启动子DNA序列如SEQ ID NO.1。用特异引物以日本落叶松(Larix kaempferi)的基因组DNA为模板,扩增得到1179bp的扩增产物,即得。将该段DNA分子启动GFP荧光蛋白基因表达,在荧光显微镜下可观察到荧光,证实该序列有功能,反之,则不能。本发明提供的落叶松启动子序列,本质是DNA分子,1179bp,能够启动转录。
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公开(公告)号:CN118592188A
公开(公告)日:2024-09-06
申请号:CN202410837376.1
申请日:2024-06-26
Abstract: 本发明提供了一种适用于宽窄行种植模式的高性能再生稻收获机及方法,包括割台、附加切割器和籽粒输送装置;割台通过输送槽安装在收获机前端,用于收割再生稻穗头并将穗头喂入输送槽;割台的对称轴与两条收获机履带的对称轴重合,实现再生稻联合收获机收割范围和碾压范围对称分布,在直行作业下,碾压范围在宽行范围内,收割范围覆盖窄行范围;附加切割器挂接在割台后侧,用于控制留茬高度,保留再生稻茎休眠芽;籽粒输送装置安装在脱粒清选装置和粮箱之间,用于将经脱粒清选后堆积在脱粒清选装置底部的再生稻籽粒提升并输送到粮箱中。本发明实现对宽窄行种植模式下的再生稻的高性能低损伤收获作业,降低碾压率,提高再生稻产量及其经济效益。
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