带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途

    公开(公告)号:CN114990078A

    公开(公告)日:2022-09-02

    申请号:CN202210754217.6

    申请日:2022-06-29

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途。基于已建立的基因VIId亚型新城疫病毒I4强毒株反向遗传操作系统,将His标签(6×His)与I4基因组全长转录载体pNDVI4中的HN基因融合,成功构建带有His标签的重组新城疫病毒基因组全长cDNA感染性克隆pNDVI4‑HN‑His。经转染得到重组新城疫病毒rNDVI4‑HN‑His,可通过标签蛋白抗体用于重组病毒HN蛋白的纯化及其与宿主蛋白互作研究。

    稳定表达人源TIGAR基因的MDCK细胞系

    公开(公告)号:CN106479983B

    公开(公告)日:2019-05-07

    申请号:CN201610994452.5

    申请日:2016-11-11

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体地涉及稳定表达人源TIGAR基因的MDCK细胞系。该细胞系是稳定表达人源TIGAR基因的MDCK细胞系TG‑418‑E5,其含有TIGAR编码基因序列,它的保藏号是CGMCC NO:12983。通过在MDCK细胞中稳定表达TIGAR基因,提高了细胞的抗凋亡能力,延长了重组细胞的存活时间。该方法不仅为研究MDCK的无血清全悬浮培养用于大规模生产细胞培养疫苗的应用奠定了基础,同时提高禽流感疫苗株的繁殖滴度节约了生产工艺成本。此外,TG‑418‑E5细胞系在抗禽流感病毒药物筛选、疫苗株筛选以及细胞培养疫苗的生产方面都展示出较好的应用前景。

    新城疫病毒株rLX/H9HA及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN103146751A

    公开(公告)日:2013-06-12

    申请号:CN201310042470.X

    申请日:2013-02-04

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明表达H9亚型禽流感病毒(AvianInfluenzaVirus)血凝素蛋白的重组新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus)rLX/H9HA,保藏号为CGMCCNo:6652。本发明是利用已建立的NDV弱毒LX株的反向遗传操作平台,将H9N2亚型AIV流行株 A/Chicken/Jiangsu/WJ57/2012的HA基因插入LX株基因组全长转录载体pLX中,得到含有H9N2亚型AIVHA基因的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pLX-H9HA。经转染获得的重组病毒rLX/H9HA在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,连续传多代仍能稳定表达HA蛋白,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。

    新城疫病毒重组疫苗A-NDV-LX/I4及构建方法

    公开(公告)号:CN102533676A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201210000697.3

    申请日:2012-01-04

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种表达基因VII型F和HN重组新城疫弱毒疫苗A-NDV-LX/I4,它的保藏号是CGMCCNO:3844。本发明构建的致弱病毒A-NDV-LX/I4免疫试验鸡两周后,鸡血清HI的平均效价为27;LaSota免疫组攻毒4天后,SPF鸡喉气管和泄殖腔的棉拭样品的病毒分离率分别为10%和30%;商品鸡喉气管和泄殖腔的棉拭样品的病毒分离率分别为40%和20%;V4免疫组攻毒4天后,SPF鸡喉气管和泄殖腔的棉拭样品的病毒分离率分别为30%和10%;商品鸡喉气管和泄殖腔的棉拭样品的病毒分离率分别为30%和20%,与常规疫苗相比,本发明重组弱毒疫苗能够提供更加坚实的免疫保护效率。

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