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公开(公告)号：CN111718934B
公开(公告)日：2021-11-16
申请号：CN202010606720.8
申请日：2018-12-18
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种新终止子及其应用，属于基因工程技术领域。本发明首先对单终止子的活性进行表征，通过不同活性的终止子进行组合串联的方式，得到了一系列可提高目的蛋白产量的新型终止子，以绿色荧光蛋白基因作为终止子上游基因，以红色荧光蛋白基因作为终止子下游基因，表征终止子对上下游基因的调控水平。结果表明，这些新型终止子对于提高上游基因表达量和抑制下游基因表达量都有良好的效果。这对在枯草芽孢杆菌中生产目的蛋白具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN111690649B
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202010606504.3
申请日：2018-12-18
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种新终止子及其应用，属于基因工程技术领域。本发明首先对单终止子的活性进行表征，通过不同活性的终止子进行组合串联的方式，得到了一系列可提高目的蛋白产量的新型终止子，以绿色荧光蛋白基因作为终止子上游基因，以红色荧光蛋白基因作为终止子下游基因，表征终止子对上下游基因的调控水平。结果表明，这些新型终止子对于提高上游基因表达量和抑制下游基因表达量都有良好的效果。这对在枯草芽孢杆菌中生产目的蛋白具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN111662906B
公开(公告)日：2021-09-24
申请号：CN202010606719.5
申请日：2018-12-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种新终止子及其应用，属于基因工程技术领域。本发明首先对单终止子的活性进行表征，通过不同活性的终止子进行组合串联的方式，得到了一系列可提高目的蛋白产量的新型终止子，以绿色荧光蛋白基因作为终止子上游基因，以红色荧光蛋白基因作为终止子下游基因，表征终止子对上下游基因的调控水平。结果表明，这些新型终止子对于提高上游基因表达量和抑制下游基因表达量都有良好的效果。这对在枯草芽孢杆菌中生产目的蛋白具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN112501193A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011446330.5
申请日：2020-12-09
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/65 , C12N15/55 , C12N15/60 , C12N1/21 , C12Q1/02 , C12Q1/34 , C12Q1/527 , C12Q1/6897 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种烟酸及烟酰胺生物传感系统，属于基因工程技术领域。本发明将枯草芽孢杆菌转录阻遏蛋白NadR及其靶标启动子异源构建到大肠杆菌。通过对NadR进行基于易错PCR的定向进化筛选，得到响应合适浓度烟酸的NadR突变体L171F，并利用该突变体构建在所需浓度范围内高灵敏响应烟酸的生物传感系统，可使生物传感系统在0‑50mM范围内高灵敏响应烟酸浓度。进一步通过在该系统中过表达能将烟酰胺转化为烟酸的烟酰胺酶PncA，使得该系统可以间接感受烟酰胺浓度。
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公开(公告)号：CN110938616B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201911050011.X
申请日：2019-10-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种温泉热碱芽孢杆菌来源的腈水合酶的突变体，属于酶工程技术领域。本发明提供的腈水合酶突变体Cal.t Nhase‑A20V在70℃的半衰期大约是10min，相比野生酶热稳定性并未有太大变化，突变体Cal.t Nhase‑A20V的比酶活是野生酶的128％。同时该突变体也具备了更好的底物耐受性和产物耐受性，全细胞催化生成烟酰胺最终产量达到598g/L；因此，本发明提供的腈水合酶突变体Cal.t Nhase‑A20V，具有很好的酶学性质，有利于以后的工业生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110184259B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201910612907.6
申请日：2019-07-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种厌氧芽孢杆菌来源普鲁兰酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明构建的普鲁兰酶突变体K419R，在热稳定性与野生型普鲁兰酶相差不大的情况下，其比酶活是野生型普鲁兰酶的1.30倍；普鲁兰酶突变体K419R/T245C/A326C，在比酶活与野生型普鲁兰酶相同的情况下，其热稳定性较野生型大幅提升；而突变体K419R/T245C/A326C/W651C/V707C的比酶活是野生型的1.47倍，且具有良好的热稳定性。因此本发明的普鲁兰酶突变体能够满足淀粉脱支过程高温条件的要求，同时提高淀粉脱支和水解效率，对于普鲁兰酶的工业化应用至关重要。
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公开(公告)号：CN109880783B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201910318050.7
申请日：2019-04-19
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/56 , C12N9/44 , C12N15/70 , C12P19/14 , C12P19/00 , C12P19/04 , C12P7/48 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种嗜热重组II型普鲁兰酶及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌中异源表达II型普鲁兰酶，获得一种嗜热重组II型普鲁兰酶，其最适pH为6.6，在pH 5.8‑8.0条件下有较好的pH耐受性，最适温度为95℃，在95℃保温10h，剩余酶活大于50％，能够在强还原条件下展现出较高的比酶活，如在培养环境中加入DTT，能使Sumo‑PulPy比酶活提升237.2％。本发明还提供了II型普鲁兰酶Sumo‑PulPy的组合截断突变体△28N+△791C，该酶突变体的比酶活为32.18±0.92U/mg，是野生酶的5.99倍，具有重要的工业应用价值和潜力。
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公开(公告)号：CN109337891B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201811493273.9
申请日：2018-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的苯丙氨酸氨基变位酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明的苯丙氨酸氨基变位酶的突变体序列如SEQ ID NO.2所示，该突变酶的比酶活相对于野生型略有提高，在50℃处理1h仍有83％残留酶活性，温度稳定性相比野生酶有了大幅度的提高，更适合应用于工业生产。
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公开(公告)号：CN111172213A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN202010058267.1
申请日：2020-01-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种用双酶串联制备L-2-氨基丁酸的方法，属于生物工程领域。本发明通过分别培养表达L-谷氨酸变位酶和L-天冬氨酸-β-脱羧酶的重组大肠杆菌，获得L-谷氨酸变位酶和L-天冬氨酸-β-脱羧酶。将两种酶以一定质量比添加到反应体系中，以L-谷氨酸为底物，进行酶反应制备L-2-氨基丁酸，当L-天冬氨酸-β-脱羧酶的用量为2mg/mL，反应24h，转化生成8.5mmol/L L-2氨基丁酸，摩尔转化率为85.00％。此法与化学生产法相比，生产工艺安全，无环境污染。与以苏氨酸为底物的多酶合成体系相比，底物价格更便宜，工艺更简单。
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公开(公告)号：CN107828673B
公开(公告)日：2020-03-06
申请号：CN201711375210.9
申请日：2017-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达来源于雅致放射毛霉的羧肽酶Y的方法，属于生物工程领域。本发明通过构建表达重组质粒pPICZα‑procpy，电转化毕赤酵母GS115，通过不断提高抗生素的方法，筛选得到具有不同拷贝数的表达重组菌株，再往得到的重组菌株中转入来源于毕赤酵母的伴侣蛋白BIP，最终得到一株高效表达来源雅致放射毛霉的羧肽酶Y的表达重组菌株，诱导表达6天之后，表达量达到了525±20mg/L。
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