一株产人胃乙醇脱氢酶的工程菌及其酶的制备方法

    公开(公告)号:CN106544312B

    公开(公告)日:2020-02-14

    申请号:CN201610980083.4

    申请日:2016-11-08

    Abstract: 本发明公开了一株产人胃乙醇脱氢酶的工程菌及其酶的制备方法,属于生物技术领域。本发明根据GeneBank中人胃乙醇脱氢酶δδ‑ADH的基因序列合成目的基因,将其与表达载体pET‑32a(+)连接并转化E.coli BL21(DE3)。E.coli BL21(DE3)经异丙基硫化‑β‑D‑半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,目的蛋白以包涵体形式存在。收集并破碎菌体后离心,取沉淀获得包涵体,用低浓度尿素溶液或其缓冲液溶解包涵体获得有活性的δδ‑ADH粗酶液。经HisTrapTM excel亲和层析柱纯化获得目的蛋白,活性在2.085U/mg以上。本发明提供的工程菌所产生的δδ‑ADH可氧化高浓度的乙醇,其在大肠杆菌中以包涵体形式存在;有活性的δδ‑ADH粗酶液只需经包涵体溶解液溶解即可获得,不需要复性操作,可节约成本、简化操作步骤,提高效率。

    一株能高效利用瓜氨酸的短乳杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN106978371B

    公开(公告)日:2019-07-02

    申请号:CN201710254031.3

    申请日:2017-04-18

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一株能高效利用瓜氨酸的短乳杆菌及其应用,属于生物发酵技术领域。本发明的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)2‑34,已于2017年3月23日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国武汉武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:M 2017140。该菌不仅可以利用精氨酸产生瓜氨酸,而且在生长至对数期后能够吸收并利用胞外的瓜氨酸,另外该菌也能单独利用培养基中的瓜氨酸。

    一种短乳杆菌的转化方法
    14.
    发明公开

    公开(公告)号:CN109897863A

    公开(公告)日:2019-06-18

    申请号:CN201910328711.4

    申请日:2019-04-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种短乳杆菌的转化方法,属于食品微生物技术领域。由于乳酸菌不同种属之间菌株的生化特性、分子构成和免疫特性均不相同,本发明在已有乳酸乳球菌以及不含内源性质粒短乳杆菌电转化方法的基础上进行了改进,将短乳杆菌分别用MRS培养基和含1%甘氨酸的MRS培养基连续活化两次,继续培养至菌体达到较高浓度时收集并制备感受态细胞,以增加感受态细胞浓度和活性。电转化外源DNA片段时电击条件为2.4KV、3.5ms,增加电转化效率。经检验,外源基因成功转化感受态细胞,解决了野生型短乳杆菌电转化感受态制备和转化的难题。

    一种N端融合多聚六肽提高猪溶菌酶抗菌性能的方法

    公开(公告)号:CN106046173B

    公开(公告)日:2019-05-10

    申请号:CN201610394616.0

    申请日:2016-06-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种N端融合多聚六肽提高猪溶菌酶抗菌性能的方法,属于生物工程领域。本发明的方法包括融合猪溶菌酶基因的设计和大肠杆菌表达系统的表达及复性。经抗菌活性检测,本发明中的融合猪溶菌酶不仅对革兰氏阳性菌具有明显抗性,同时也可以杀灭多种革兰氏阴性菌,为提高溶菌酶的抗菌活性提供了很好的案例。本发明中的融合猪溶菌酶制备工艺具有简单、高效的特点,产物可达电泳纯,纯度在90%以上。

    一种提高结晶麦芽结晶率的方法

    公开(公告)号:CN109082347A

    公开(公告)日:2018-12-25

    申请号:CN201810890756.6

    申请日:2018-08-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高结晶麦芽结晶率的方法,属于啤酒酿造技术领域。这种方法从原料大麦开始,经过制麦、糖化、焙焦,得到颗粒饱满,内部有玻璃质体的结晶麦芽。在制麦过程中,略微调高浸麦温度(14-15℃),并且在发芽过程中多次补水,提高绿麦芽的水分含量,大约为42%-44%。在蛋白质分解与糖化过程中,为保证麦芽的含水量与品质的均匀,将200g左右的绿麦芽直接浸泡在1L水中进行糖化。目前,结晶麦芽的结晶率只能在20%左右,但通过此方法所制得的结晶麦芽,其结晶率能够达到80%以上。

    一种猪溶菌酶来源的饲用抗菌六肽及其制备方法

    公开(公告)号:CN105838695A

    公开(公告)日:2016-08-10

    申请号:CN201610367732.3

    申请日:2016-05-30

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12N9/2462 C12Y302/01017

    Abstract: 本发明公开了一种猪溶菌酶来源的饲用抗菌六肽及其制备方法,属于生物工程领域。本发明的制备方法包括了粗提液的制备,凝胶过滤色谱柱Superdux Peptide 10/300GL的分离,和反相柱Phenomenex luna C18分离纯化。经LC?MS鉴定,该抗菌六肽的氨基酸序列为:A?W?V?A?W?K,此抗菌肽属于碱性肽,对革兰氏阴性菌具有明显抗性,是对猪溶菌酶的抗菌谱的良好补充和拓展。经与抗菌肽数据库(TheAntimicrobial Peptide Database)等数据库比对,此种抗菌肽并未见报道。本发明制备工艺具有简单、高效的特点,产物纯度经质谱鉴定可达95%以上。

    一株降解花生粕中黄曲霉毒素B1的解淀粉芽孢杆菌

    公开(公告)号:CN103966147B

    公开(公告)日:2016-02-17

    申请号:CN201410235025.X

    申请日:2014-05-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一株降解花生粕中黄曲霉毒素B1的解淀粉芽孢杆菌,属于应用微生物技术领域。本发明通过筛选获得了一株能够显著抑制黄曲霉生长、高效降解黄曲霉毒素B1的解淀粉芽孢杆菌,将其应用于发霉花生粕中,脱毒的花生粕中黄曲霉毒素B1含量低于国家限量标准,达到安全的饲用级别。而且该菌株的脱毒机理为胞外代谢产物的降解作用,同时该作用物质的产生为非诱导型,为菌株的固有属性。该菌株这些特性都为其在饲料、食品等工业生防黄曲霉以及黄曲霉毒素B1提供了可能,具有很高的应用价值。

    一种定量鉴定麦芽汁中混浊物质的方法

    公开(公告)号:CN103575846A

    公开(公告)日:2014-02-12

    申请号:CN201310542025.X

    申请日:2013-11-05

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种定量鉴定麦芽汁中混浊物质的方法,是以麦芽汁作为样品,先对麦汁离心,沉淀冷冻干燥;然后测定冻干粉中的蛋白质、总糖及总多酚含量;并采用质谱手段鉴定蛋白质;采用色谱手段进行氨基酸分析、单糖组成分析及多糖分子量的测定;采用红外光谱对多糖的结构进行鉴定。本发明采用定量的方法明确了麦芽汁混浊物质的组成情况,确定引起江苏啤酒大麦麦芽的混浊成分主要为低分子量(1000Da左右)的葡聚糖,这些葡聚糖的产生是由于內源外切葡聚糖酶的不足导致的,本结果可以指导大麦育种人员和麦芽制造人员控制大麦及其制麦过程中的內源外切葡聚糖酶,促进葡聚糖的降解,提高麦芽的酿造质量,具有积极的意义。

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