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公开(公告)号：CN102373298A
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN201110221749.5
申请日：2011-08-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种CSFV、PRRSV、PCV2及SIV H9亚型多重SYBR Green I实时荧光PCR引物及其检测方法，CSFV引物的序列如下：上游引物P1：5′-AAACGGAGGGACTAGCCGT-3′；下游引物P2：5′-TGCCATGTACAGCAGAGA-3′；PRRSV引物的序列如下：上游引物P3：5′-AAACCAGTCCAGAGGCAAG-3′；下游引物P4：5′-CCACAGTGTAACTTATCCTC-3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′；下游引物P6：5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′；SIV H9亚型引物的序列如下：上游引物P7：5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′；下游引物P8：5′-GAGACCATTGACAAGAGGC-3′。本发明分别设计扩增CSFV、PRRSV、PCV2、SIV H9亚型的特异性引物，通过四重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法，能够同时检测CSFV、PRRSV、PCV2、SIV H9亚型。有较好的特异性、重复性和敏感性，为CSFV、PRRSV、PCV2和SIV H9亚型的检测提供了一种新的方法，可作为规模化猪场CSFV、PRRSV、PCV2和SIVH9亚型的净化检测方法，建立无CSFV、PRRSV、PCV2和SIV H9亚型的猪群。
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公开(公告)号：CN101880727A
公开(公告)日：2010-11-10
申请号：CN201010239995.9
申请日：2010-07-29
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明的技术方案公开了一种肠球菌属及毒力基因多重PCR检测引物，它包括肠球菌属引物的序列、聚集物质引物的序列和溶血素引物的序。本发明建立了一种快速准确鉴定肠球菌属及其主要毒力基因的多重PCR方法。本方法特异性高；敏感性实验表明该方法最低能检测到100pg DNA。为肠球菌感染的分子流行病学调查，研究肠球菌致病机制机制、早期预防提供了一种新的快速检测方法，同时构建的标准质粒也为未来建立实时荧光定量PCR方法提供了基础。
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公开(公告)号：CN101880727B
公开(公告)日：2012-03-21
申请号：CN201010239995.9
申请日：2010-07-29
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明的技术方案公开了一种肠球菌属及毒力基因多重PCR检测引物，它包括肠球菌属引物的序列、聚集物质引物的序列和溶血素引物的序。本发明建立了一种快速准确鉴定肠球菌属及其主要毒力基因的多重PCR方法。本方法特异性高；敏感性实验表明该方法最低能检测到100pg DNA。为肠球菌感染的分子流行病学调查，研究肠球菌致病机制机制、早期预防提供了一种新的快速检测方法，同时构建的标准质粒也为未来建立实时荧光定量PCR方法提供了基础。
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公开(公告)号：CN101209258B
公开(公告)日：2011-06-08
申请号：CN200610160048.4
申请日：2006-12-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61K31/715 , A61K36/481 , A61P37/04 , A61P31/12
CPC classification number: Y02A40/78
Abstract: 为了更好发挥中药多糖抑制体内、外病毒繁殖，保护细胞免于感染，提高感染动物的存活率的效果，本发明提供一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物。一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物，按重量份包含有效成分黄芪多糖1-9和板蓝根多糖1-9。按重量份由4-30的有效成分和70～96的载体组成。载体是无水葡萄糖、碳酸氢钠、氯化钠中的至少一种。载体是注射用水。所述的任何一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物的应用，应用于畜禽、宠物的病毒性传染病的防治及免疫力低下。本发明主要从中药黄芪、板蓝根中提取多糖成分，将两种多糖混合使用使得效果好于单独任何一种，既能作为免疫增强剂又能作为抗病毒药物的尚属首次。
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公开(公告)号：CN101880728A
公开(公告)日：2010-11-10
申请号：CN201010240001.5
申请日：2010-07-29
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种肠球菌属多重PCR检测引物，包括肠球菌属引物的序列、粪肠球菌种引物的序列和屎肠球菌种引物的序列。本发明建立了一种快速准确鉴定肠球菌的多重PCR方法，大大简化了查验程序，可以在很多基层实验室使用。能一次PCR鉴定到肠球菌属及粪肠球菌或屎肠球菌种，能最少检测出1ng的基因组DNA，敏感性高，特异性比较强，有利于肠球菌的鉴别与诊断，并且具有的较好敏感性、重复性和稳定性，为临床中肠球菌的检测提供了一种新的快速检测方法，也为肠球菌感染的分子流行病学调查，研究肠球菌分子发病机制，早期诊断，诊断试剂盒的研制与开发，药物或疫苗的免疫机制提供了试验依据和技术手段。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN105400910A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201511025198.X
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: Y02A50/451 , C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒多重RT-PCR检测引物：猪德尔塔冠状病毒的引物序列如下：上游引物P1：5＇- ATGGCTACTGGCTGCGTTAC-3＇下游引物P2：5＇- GCGTTTCCTGGGCTGATT-3＇扩增猪德尔塔冠状病毒基因部分片段383 bp；猪传染性胃肠炎病毒的引物序列如下：上游引物P3：5＇- CCCTCCAGCAAGGTTCAA-3＇下游引物P4：5＇- GCAACCCAGACAACTCCA-3＇扩增猪传染性胃肠炎病毒基因部分片段229 bp。本发明多重RT-PCR对PDCoV和TGEV的最低检测量分别是4.05×101拷贝/μL和5.47×102拷贝/μL，而对猪流行性腹泻病毒，博卡病毒，猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪轮状病毒的扩增结果均为阴性。57份临床样品的多重RT-PCR检测结果显示，同时感染这2种病毒的阳性率为1.75%，感染PDCoV阳性率为19.30%，感染TGEV阳性率为1.75%。
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公开(公告)号：CN102580079A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210088026.7
申请日：2012-03-30
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪细小病毒纳米铝胶佐剂灭活疫苗，该疫苗由灭活的猪细小病毒病毒液与纳米铝佐剂以1:2的比例混合制成。本发明在乳鼠和猪体上对疫苗进行了安全性评价，结果发现，免疫之后无一只乳鼠死亡，无一头仔猪发生致敏反应，同样也未观察到明显的全身和局部反应，充分证明本发明灭活疫苗是安全、可靠的。本发明猪细小病毒纳米铝胶佐剂疫苗组在免疫第4周时CD4+/CD8+的比值显著高于其他疫苗组，其比值由2.11提高到2.97，说明该疫苗加强了小鼠的细胞免疫状态。本发明猪细小病毒纳米铝胶佐剂疫苗能诱导IFN-γ的分泌表达，该疫苗能显著增强Th1型细胞产生免疫应答反应，诱导其分泌IFN-γ，从而增强细胞免疫水平，能产生较强的细胞免疫应答。
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公开(公告)号：CN101724651A
公开(公告)日：2010-06-09
申请号：CN200810230451.9
申请日：2008-10-16
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/866 , A61K48/00
Abstract: 一种双宿主重组杆状病毒表达载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。该双宿主重组杆状病毒表达载体具有昆虫细胞可识别的Polyhedrin启动子和动物细胞可识别的CMV-IE启动子。该双宿主重组杆状病毒可在昆虫细胞上用于制备功能蛋白，又可在动物细胞上表达目的外源蛋白，可作为基因治疗和非复制型载体疫苗应用。该双宿主重组杆状病毒表达载体的构建方法是以Bac-to-Bac表达系统中转移载体pFastBac系列为基础，在Polyhedrin启动子上游引入CMV-IE启动子表达盒，构建转移载体，转化DH10Bac感受态细胞，重组双宿主Bacmid穿梭载体，然后转染对数生长期的昆虫细胞即可获得双宿主重组杆状病毒表达载体。
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公开(公告)号：CN101209345A
公开(公告)日：2008-07-02
申请号：CN200610128462.7
申请日：2006-12-26
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: Y02A50/473
Abstract: 一种动物基因工程干扰素复合制剂及其生产方法和临床应用。该动物基因工程干扰素复合制剂通过提取动物外周血或脾淋巴细胞，经培养和体外诱导剂诱导，Trizol提取细胞总RNA，设计特异性引物，通过RT－PCR技术克隆干扰素基因，通过T－A策略将其连接到pGEM－T载体；重新设计引物，两端加入不同的酶切序列和起始密码子ATG、终止密码子TAA，并去除前导肽序列，以重组T载体为模板进行PCR扩增，获取动物干扰素基因表达片段；将表达片段进行稀有密码子突变，经双酶切后，胶回收目的片段，连接到经同样双酶切的载体pFastBacTMDual上；将动物interferon－α克隆到Polyhedrin promoter控制下的多克隆位点，将同一种属动物interferon－γ克隆到p10 promoter控制下的多克隆位点；将构建好的载体pFastBacTMDual+interferon α+interferon γ转染到DH10BacTME.coli进行重组；经蓝白斑筛选，PCR鉴定后，将构建好的recombinant bacmid提取纯化，通过脂质体法转染SF9昆虫细胞；表达产物鉴定、纯化；动物基因工程干扰素复合制剂抗病毒活性检测和临床应用效果评价。该动物基因工程干扰素在昆虫细胞共表达的生产方法和临床应用。
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