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公开(公告)号:CN101880727B
公开(公告)日:2012-03-21
申请号:CN201010239995.9
申请日:2010-07-29
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明的技术方案公开了一种肠球菌属及毒力基因多重PCR检测引物,它包括肠球菌属引物的序列、聚集物质引物的序列和溶血素引物的序。本发明建立了一种快速准确鉴定肠球菌属及其主要毒力基因的多重PCR方法。本方法特异性高;敏感性实验表明该方法最低能检测到100pg DNA。为肠球菌感染的分子流行病学调查,研究肠球菌致病机制机制、早期预防提供了一种新的快速检测方法,同时构建的标准质粒也为未来建立实时荧光定量PCR方法提供了基础。
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公开(公告)号:CN101880728A
公开(公告)日:2010-11-10
申请号:CN201010240001.5
申请日:2010-07-29
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种肠球菌属多重PCR检测引物,包括肠球菌属引物的序列、粪肠球菌种引物的序列和屎肠球菌种引物的序列。本发明建立了一种快速准确鉴定肠球菌的多重PCR方法,大大简化了查验程序,可以在很多基层实验室使用。能一次PCR鉴定到肠球菌属及粪肠球菌或屎肠球菌种,能最少检测出1ng的基因组DNA,敏感性高,特异性比较强,有利于肠球菌的鉴别与诊断,并且具有的较好敏感性、重复性和稳定性,为临床中肠球菌的检测提供了一种新的快速检测方法,也为肠球菌感染的分子流行病学调查,研究肠球菌分子发病机制,早期诊断,诊断试剂盒的研制与开发,药物或疫苗的免疫机制提供了试验依据和技术手段。
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公开(公告)号:CN101880728B
公开(公告)日:2012-03-21
申请号:CN201010240001.5
申请日:2010-07-29
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种肠球菌属多重PCR检测引物,包括肠球菌属引物的序列、粪肠球菌种引物的序列和屎肠球菌种引物的序列。本发明建立了一种快速准确鉴定肠球菌的多重PCR方法,大大简化了查验程序,可以在很多基层实验室使用。能一次PCR鉴定到肠球菌属及粪肠球菌或屎肠球菌种,能最少检测出1ng的基因组DNA,敏感性高,特异性比较强,有利于肠球菌的鉴别与诊断,并且具有的较好敏感性、重复性和稳定性,为临床中肠球菌的检测提供了一种新的快速检测方法,也为肠球菌感染的分子流行病学调查,研究肠球菌分子发病机制,早期诊断,诊断试剂盒的研制与开发,药物或疫苗的免疫机制提供了试验依据和技术手段。
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公开(公告)号:CN111337670A
公开(公告)日:2020-06-26
申请号:CN202010219003.X
申请日:2020-03-25
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/569 , C12N15/31 , C12N15/70 , C07K14/315
Abstract: 本发明属于微生物检测领域,特别是指一种菌毛亚单位蛋白EbpA1猪源粪肠球菌抗体间接ELISA检测方法。利用纯化复性后的EbpA1亚单位蛋白初步建立了间接ELISA方法,采用棋盘法确定了最佳的包被浓度为2µg/mL;封闭液可以排除其他物质的非特异性吸附,我们选用1%的BSA进行封闭,达到了较好的效果;此外,对血清、酶标二抗的稀释比例和作用时间和底物的显色时间进行了摸索,均选择最佳的条件使建立的ELISA方法达到最优水平。ELISA结果的判定:在方法建立时采用P/N﹥2.1可视为阳性;而最终的结果采用阴性样品OD450值的平均数加3倍的标准差等于阳性的临界值。
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公开(公告)号:CN101880727A
公开(公告)日:2010-11-10
申请号:CN201010239995.9
申请日:2010-07-29
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明的技术方案公开了一种肠球菌属及毒力基因多重PCR检测引物,它包括肠球菌属引物的序列、聚集物质引物的序列和溶血素引物的序。本发明建立了一种快速准确鉴定肠球菌属及其主要毒力基因的多重PCR方法。本方法特异性高;敏感性实验表明该方法最低能检测到100pg DNA。为肠球菌感染的分子流行病学调查,研究肠球菌致病机制机制、早期预防提供了一种新的快速检测方法,同时构建的标准质粒也为未来建立实时荧光定量PCR方法提供了基础。
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