大鼠大网膜脂肪来源间充质干细胞的提取方法和专用培养基

    公开(公告)号:CN103184191A

    公开(公告)日:2013-07-03

    申请号:CN201210512416.2

    申请日:2012-12-04

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种分离提取大鼠大网膜脂肪间充质干细胞的方法和专用培养基。无菌条件下取健康斯泼累格·多雷(Sprague Dawley,SD)大鼠的大网膜脂肪,剪碎后用冰磷酸盐缓冲液混合后离心,去除部分脂肪组织。用I型和II混合胶原酶消化离心,去除上部脂肪细胞组织。再次离心后用加入含有特定化学物质和生长因子的专用培养基重悬后移入培养瓶中放入培养箱中持续传代培养。本发明在大鼠体内提出一种大网膜脂肪来源的间充质干细胞,同时在培养过程中通过添加特定的化学物质和生长因子的专用培养既可以解决干细胞在体外培养中容易衰老以及分化问题,获得了一种能长期保持干细胞特性的大网膜脂肪来源的间充质干细胞。

    人脐带间充质干细胞的提取和培养方法

    公开(公告)号:CN102965338A

    公开(公告)日:2013-03-13

    申请号:CN201210510379.1

    申请日:2012-12-04

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种人脐带间充质干细胞的提取和培养方法。脐带组织切碎后经I型胶原酶消化后移入含培养基的培养瓶中持续培养。所用培养基为低糖DMEM基础培养基并且添加了胎牛血清、成纤维生长因子、上皮细胞生长因子、细胞转录因子、胆固醇。使用本发明的提取和培养方法可以长期培养人的脐带间充质干细胞,并且维持干细胞活性。本发明解决了目前人脐带间充质干细胞培养中细胞衰老过快以及分化问题,能够长期获得具有干细胞特性的人脐带间充质干细胞。

    一种自造血干细胞中高效分化扩增CD4阳性T细胞的方法

    公开(公告)号:CN102943064A

    公开(公告)日:2013-02-27

    申请号:CN201210512263.1

    申请日:2012-12-04

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 孙博 肖忠党

    Abstract: 本发明涉及一种自造血干细胞中高效分化扩增CD4阳性T细胞的方法,该方法包括如下步骤:步骤a:收集血液血样品,步骤b:分离血液样品中单核细胞成分,步骤c:利用抗体富集单核细胞成分中的造血干细胞,步骤d:使用包含Notch-1的化学成分确定的CD4阳性细胞分化扩增培养基培养和扩增CD4阳性T细胞。本发明使用包含Notch-1的化学成分确定的培养系统在促进造血干细胞定向分化为CD4阳性T细胞的同时进行高效扩增,实现了该细胞的大量生产。

    一种保持胰腺星状细胞相对静息态的方法

    公开(公告)号:CN116590217A

    公开(公告)日:2023-08-15

    申请号:CN202310425416.7

    申请日:2023-04-20

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明属于属于细胞培养技术领域,具体为一种保持胰腺星状细胞相对静息态的方法;所述培养方法具体包括:对胰腺组织进行预处理,获得得到胰腺外分泌细胞团块;使用无菌DPBS溶液(杜氏磷酸盐缓冲液)对胰腺外分泌细胞团块进行多次冲洗,使胰腺外分泌细胞团块沉降;然后使用MSC完全培养液对沉降后的胰腺外分泌细胞团块进行培养即可获得相对静息态胰腺星状细胞。本发明培养出的胰腺星状细胞能够保持相对静息状态,避免其活化,有助于研究静息状态下的胰腺星状细胞生理结构及功能,进而可为研究胰腺星状细胞在糖尿病、胰腺纤维化发生发展过程中的作用提供细胞实验模型。

    一种利用iPSC细胞和小分子IOX1构建孤独症脑类器官的方法

    公开(公告)号:CN116334003A

    公开(公告)日:2023-06-27

    申请号:CN202211512503.8

    申请日:2022-11-28

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 林昊 孙博 叶正

    Abstract: 本发明公开了一种利用iPSC细胞和小分子IOX1构建孤独症脑类器官的方法,属于生物医学领域。该方法利用人诱导多能干细胞进行大脑类器官的诱导,并在诱导的特定时间段添加IOX1,来抑制组蛋白赖氨酸去甲基化酶的活性,从而得到一种全新的孤独症大脑类器官模型。本发明全新发现IOX1可显著改变大脑类器官的神经元分化,从而模拟人类孤独症大脑发育过程。该方法是发明人所创造,操作简单、流程可重复、均一性好。

    一种胰岛星状细胞向胰岛β样细胞分化的诱导方法

    公开(公告)号:CN116179469A

    公开(公告)日:2023-05-30

    申请号:CN202211433739.2

    申请日:2022-11-16

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开一种胰岛星状细胞向胰岛β样细胞分化的诱导方法,所述诱导方法包括以下步骤:准备贴壁细胞;对贴壁细胞进行重组激活素‑A、碱性成纤维细胞生长因子处理,诱导细胞内胚层化;对内胚层化细胞进行视黄酸、表皮生长因子和ITS细胞培养添加物处理,诱导细胞胰腺特异化;对胰腺特异化细胞进行胰高血糖素样肽1受体的激动剂、骨形态发生蛋白4和烟酰胺处理,诱导胰岛星状细胞分化细胞形成并成熟化;对胰岛类β样细胞表型鉴定。本发明诱导方法通过分步诱导,不同诱导阶段添加不同诱导分化激活剂,可有效促进胰岛星状细胞向圆形类胰岛细胞簇分化,达到高效诱导胰岛星状细胞向胰岛β样细胞分化技术。

    一种伊维菌素制剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN113995845B

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202111104375.9

    申请日:2021-09-18

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 孙博

    Abstract: 本发明公开了一种伊维菌素制剂及其制备方法和应用,所述伊维菌素制剂是将外泌体作为药物载体负载伊维菌素制得。本发明应用ACE2阳性的人源细胞产生的外泌体作为载体,导致以ACE2作为结合靶点的病毒可以结合本载体,一方面可以部份封闭病毒与人体细胞的结合程度,减低病毒毒力,另一方面,病毒与ACE2阳性的外泌体制剂结合后,发生感染时,伊维菌素可以与病毒遗传物质一起进入细胞,阻止病毒在靶细胞内的复制。本发明能够有效抑制SARS‑CoV‑2等病毒对ACE2阳性细胞的感染。

    一种增强肿瘤抗原作用的CAR及其应用

    公开(公告)号:CN115991790A

    公开(公告)日:2023-04-21

    申请号:CN202211177999.8

    申请日:2022-09-26

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种增强肿瘤抗原作用的CAR及其应用,所述CAR包括信号肽、靶点的scFv、铰链结构域、跨膜结构域、胞内共刺激结构域,所述嵌合抗原受体还包括JAK酶激活信号转导结构域。本发明提供的嵌合抗原受体能增强肿瘤抗原活化的杀伤性T细胞对表达靶点抗原的肿瘤细胞持久的杀伤能力,对表达靶点抗原的非肿瘤细胞也没有杀伤作用。本发明可用于实体瘤的抗肿瘤治疗。

    一种基于iPSC的三维胰岛类器官及其构建方法

    公开(公告)号:CN114561341A

    公开(公告)日:2022-05-31

    申请号:CN202210351863.8

    申请日:2022-04-02

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 林昊 孙博 叶正

    Abstract: 本发明公开涉及一种基于多能干细胞(iPSC)构建三维胰岛类器官的方法,属于生物医学技术领域,该方法不使用基质胶,而采用琼脂糖联合结冷胶实现细胞的三维成团成球,再通过在不同诱导时期添加成分明确的化合物,最终诱导出包含全部4种胰岛细胞的三维胰岛类器官,该方法与基质胶方案相比,大幅度降低技术成本、操作简单、流程可重复、均一性好。

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