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公开(公告)号：CN119932221A
公开(公告)日：2025-05-06
申请号：CN202510165694.2
申请日：2025-02-14
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及紫薇种质鉴定技术领域，尤其涉及一种与紫薇紫色叶性状相关的分子标记及其应用。所述分子标记是基于紫薇参考基因组12号染色体上第789140‑789171 bp处32 bp的插入/缺失设计的，利用该位点碱基的多态性可以用于早期鉴定紫薇的紫色叶性状，尤其是早期鉴定常年紫色叶、幼叶紫色而成熟叶绿色的种质。本发明提供的InDel分子标记及其引物准确性高、特异性强、稳定性好、检测简单便捷、经济高效，可广泛应用于紫薇自然群体和杂交群体中叶色的早期精准鉴定，为紫薇紫色叶性状分子标记辅助遗传育种提供技术支持。
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公开(公告)号：CN118077574A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410086146.6
申请日：2024-01-22
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供一种高温诱导2n配子培育多倍体紫薇的方法，具体步骤如下：1)通过紫薇雌、雄配子减数分裂进程，确定高温处理时期；2)根据确定的时期对紫薇花序进行高温处理，诱导形成2n配子；3)利用2n雌、雄配子与紫薇品种杂交，获得杂交后代；4)对获得的杂交后代进行倍性鉴定。利用本方法成功获得紫薇2n配子，培育出38株三倍体和2株四倍体紫薇新种质，2n雌、雄配子的多倍体得率分别为2.94％和2.91％。本方法也可用于植物多倍体诱导技术研究。
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公开(公告)号：CN115777361A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211505882.8
申请日：2022-11-28
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供一种莓叶委陵菜的叶插繁殖方法，包括如下步骤：以莓叶委陵菜成熟基生叶作为插穗，消毒处理后浸泡于激素溶液中，激素处理后扦插于基质中，所述的激素溶液为100‑1000mg/L的IBA溶液或者100‑1000mg/L的NAA和IBA的混合溶液，所述基质为草炭、珍珠岩、蛭石混合基质、草炭、珍珠岩混合基质或者草炭、蛭石混合基质。本发明中莓叶委陵菜叶插30d后插穗可生根，45d之后能够形成完整根系，生根率可达63.33％，平均单株生根数为6.90条/穗，平均根长为27.98cm，最长根长13.83cm，根系效果指数达20.50。本发明有效提高了莓叶委陵菜的生根率及生根效果，同时弥补了其自然繁殖周期长的缺点，适用于莓叶委陵菜扦插育苗，能够为莓叶委陵菜的生产繁殖提供新途径。
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公开(公告)号：CN111718886B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202010378846.4
申请日：2020-05-07
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种绿萼梅原生质体分离的方法及其应用，所述方法包括：选取绿萼梅枝条，剥皮后完全浸入酶解液中，在27～28℃温度酶解40～50min；酶解液包括：1.5～2.0％纤维素酶R‑10、0.75～1.0％离析酶R‑10、0.5M甘露醇、10mM KCl、20mM CaCl2、10mM MES、0.1％BSA和0.3％PVP，pH值为5.7～5.8。本发明将绿萼梅茎段木质部通过酶解进行原生质体分离，制备的原生质体产量大，活性高，产量最高为2.3×107个/g，活性达到93％以上。本发明制备得到的绿萼梅原生质体转化效率较高，在绿萼梅遗传转化和基因功能验证方面具备较大的应用价值。
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公开(公告)号：CN114181950A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202111673715.X
申请日：2021-12-31
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/02 , A01H6/74 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种控制梅花单、重瓣性状的基因及其分子标记与应用。通过BSA分析，单瓣和重瓣梅花中PmAP2‑like基因序列存在差异，导致miR172结合能力产生变化，最终引起PmAP2‑like基因在单瓣花芽和重瓣花芽中差异表达，可利用其在单瓣和重瓣梅花花芽中的差异表达模式和梅花花瓣数量相关的InDel分子标记进行梅花杂交子代的单瓣/重瓣性状快速鉴定，实现在梅花的幼苗期快速、准确地鉴定梅花花型，缩短了育种周期，减少育种工作量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108949809B
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN201810729116.7
申请日：2018-07-05
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种连翘叶片TRV载体介导病毒诱导基因沉默的方法。所述方法为：将含有特定目标基因片段的TRV2载体和TRV1载体分别转化到农杆菌感受态中；筛选得到阳性菌株后，进行增殖培养得到含有不同载体的两种单克隆菌体；将两种单克隆菌体离心并利用侵染液分别重悬菌体至OD600＝0.9～1.1后，将二者等体积混合，得到混合侵染液；将所述混合侵染液注入连翘中，实现对特定目标基因的沉默。本发明深入探究了可提高侵染成功效率的关键因素，筛选出了最优的侵染液组成配方和侵染时含有菌体的侵染液的OD值。利用本发明所述方法对连翘进行侵染，可使连翘叶片VIGS侵染的成功率达90％以上。
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公开(公告)号：CN110499325B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201910630368.9
申请日：2019-07-12
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供一种TRV‑based病毒诱导的报春花属植物基因沉默的方法。包括：A、根据报春花属植物目标基因，设计引物并扩增出该目标基因的DNA片段；B、将DNA片段连接到pTRV2载体上，得到重组载体；C、将pTRV1、重组载体分别转化农杆菌，所得转化子共同侵染植株。本发明首次证明TRV可成功应用于小报春基因沉默和功能验证，为报春花属植物的基因功能验证奠定了基础。本发明方法简单、研究周期短、无需基因全长和转化体系，获得目的表型效率高，可实现大量基因的快速功能验证。与现有的VIGS体系相比，本发明表型持续时间长，且在植株的不同部位均出现表型变化，对报春花属异型自交不亲和的遗传学研究具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111718886A
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN202010378846.4
申请日：2020-05-07
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种绿萼梅原生质体分离的方法及其应用，所述方法包括：选取绿萼梅枝条，剥皮后完全浸入酶解液中，在27～28℃温度酶解40～50min；酶解液包括：1.5～2.0％纤维素酶R-10、0.75～1.0％离析酶R-10、0.5M甘露醇、10mM KCl、20mM CaCl2、10mM MES、0.1％BSA和0.3％PVP，pH值为5.7～5.8。本发明将绿萼梅茎段木质部通过酶解进行原生质体分离，制备的原生质体产量大，活性高，产量最高为2.3×107个/g，活性达到93％以上。本发明制备得到的绿萼梅原生质体转化效率较高，在绿萼梅遗传转化和基因功能验证方面具备较大的应用价值。
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公开(公告)号：CN107345247B
公开(公告)日：2020-09-22
申请号：CN201710487120.2
申请日：2017-06-23
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明涉及分子生物学领域，具体公开了Pm011905基因(SEQ ID NO.1)在监测梅花休眠状态方面的应用以及一种梅花花芽休眠状态的分子检测方法。所述方法包括如下步骤：(1)分两次采集待测梅花的花芽，分别提取所述花芽的RNA并反转录成cDNA，以所述cDNA为模板，利用SEQ ID NO.2～3所示的引物对Pm011905基因进行荧光定量PCR；(2)比较两次采集的花芽的Pm011905基因的表达量，判断梅花花芽处于何种休眠阶段。本发明首次发现了可通过梅花花芽中Pm011905基因的表达量的变化，监测或判断梅花花芽的休眠状态。提供了一种简单方便、快速准确，能够在分子层面检测梅花花芽休眠状态的方法。
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