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公开(公告)号:CN116948966A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202310832136.8
申请日:2023-07-07
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/0783 , C12N7/00 , C12Q1/06
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种单倍型SPF鸡细胞免疫应答模型的建立方法,包括以下步骤:步骤1:取感染禽白血病病毒的单倍型SPF鸡的外周血淋巴细胞并用禽白血病病毒接种该外周血淋巴细胞,得到抗原递呈细胞;步骤2:取感染禽白血病病毒的单倍型SPF鸡的外周血淋巴细胞和抗原递呈细胞进行混合并培养。该方法的优势在于:1.选择了一种可以稳定表达针对禽白血病病毒引起TCRγδ+CD8+T细胞免疫应答的鸡的种类。2.更为特异性的表达了TCRγδ+CD8+T细胞,为后续的针对以TCRγδ+CD8+T细胞为主的生物实验如免疫应答实验奠定了基础。本发明的次要目的在于提供针一种对于鸡特异性TCR1CD8+T细胞细胞免疫应答测试方法。
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公开(公告)号:CN116375818A
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202310188363.1
申请日:2023-02-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了携带mApple荧光报告基因的重组H5N8亚型禽流感病毒的构建及其应用,涉及分子生物学和基因工程领域。本发明提供了一种核酸分子,可用于构建重组H5N8亚型禽流感病毒,该重组H5N8亚型禽流感病毒相比野生型H5N8病毒毒力减弱,且可在SPF鸡肺脏中复制并表现致病性。
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公开(公告)号:CN115991733A
公开(公告)日:2023-04-21
申请号:CN202210926962.4
申请日:2022-08-03
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种ALV‑J MHC‑B21限制性表位肽及其应用,属于生物工程领域。本发明利用已鉴定出的B21单倍型SPF鸡MHC I类分子结合多肽的限制性基序,系统筛选MHC B21限制性ALV‑J潜在的表位,最终通过功能实验验证确定具有免疫原性的多肽表位,该表位的多肽序列为PRLMGPFYEQL,这为ALV‑J表位疫苗的研发提供物质和理论基础。
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公开(公告)号:CN102586198A
公开(公告)日:2012-07-18
申请号:CN201210016518.5
申请日:2012-01-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一种抗口蹄疫病毒复制与感染的重组腺病毒及其制备与应用。本发明通过将siRNA-3D的转录模板、siRNA-L的转录模板、siRNA-2B的转录模板与siRNA-VP1的转录模板分别与U6启动子连接,克隆入载体pAdeno-X,得到能分别转录、串联结构的质粒,再将该质粒线性化后通过包装细胞包装,得到重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1。该重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1的防治效果优于重组腺病毒rAdeno-2B-VP1应用的效果。可见,本发明提供的重组质粒能有效抑制口蹄疫病毒复制和抗口蹄疫病感染。
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公开(公告)号:CN119391647A
公开(公告)日:2025-02-07
申请号:CN202411418479.0
申请日:2024-10-11
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一株杂交瘤细胞的制备方法,采用真核表达的IFN‑γ‑His蛋白多次免疫小鼠后,取小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行细胞融合并培养,得到单克隆细胞,对单克隆细胞进行筛选得到杂交瘤细胞;所述IFN‑γ‑His蛋白为带有His标签的鸭IFN‑γ基因在真核细胞中经表达得到。该杂交瘤细胞系可以稳定的分泌鼠抗鸭IFN‑γ单克隆抗体24H4,其能够用于流式细胞术检测鸭免疫细胞IFN‑γ表达变化。同时,本发明还公开了一种单克隆抗体及其用途、检测方法。
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公开(公告)号:CN117143206A
公开(公告)日:2023-12-01
申请号:CN202310968688.1
申请日:2023-08-03
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了ALV‑J MHC‑B21限制性表位肽及其筛选方法和应用,涉及生物技术领域。所述ALV‑J MHC‑B21限制性表位肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。本发明首先根据B21单倍型SPF鸡MHC I类分子结合多肽的基序合成多肽,然后体外培养ALV‑J特异性CD8+T细胞,用多肽刺激CD8+T细胞后通过ELISpot实验筛选出具有免疫原性的多肽表位,并利用ELISA和qPCR实验验证其免疫原性,从而确定有效的T细胞表位。经验证本发明成功筛选出了两条具有免疫原性的表位肽,为后续ALV‑J表位疫苗研发提供了基础。
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公开(公告)号:CN116987719A
公开(公告)日:2023-11-03
申请号:CN202310742281.7
申请日:2023-06-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/44 , C12N15/866 , C12N7/01 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了H9N2AIV多表位重组杆状病毒及其制备方法和用途,属于基因工程技术领域。所述H9N2AIV多表位重组杆状病毒整合了表达H9N2AIV B细胞和T细胞多表位的表达盒AIV B/T,所述表达盒AIV B/T的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;还整合了VSVG基因和CMV基因。本发明成功构建的重组杆状病毒rBV‑AIV B/T,将其与灭活疫苗InV配合使用后,与单独使用灭活疫苗InV相比,能增强机体的体液免疫和细胞免疫应答反应,减少病毒载量,缩短排毒时间。本发明为AIV表位疫苗的开发和验证提供参考以及为AIV防控提供新思路。
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公开(公告)号:CN116731965A
公开(公告)日:2023-09-12
申请号:CN202310626042.5
申请日:2023-05-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/0783 , G01N15/14
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种鸡TCRγδ+CD8α+T细胞免疫应答模型的建立方法,包括以下步骤:步骤1:取感染禽流感病毒的鸡的脾脏的淋巴细胞并用禽流感病毒接种该淋巴细胞,得到抗原递呈细胞;步骤2:取感染禽流感病毒的鸡的脾脏的淋巴细胞和抗原递呈细胞进行混合并培养。基于该方法建立的模型可以较好的实现H9N2亚型的禽流感病毒感染后的TCRγδ+CD8α+T细胞增殖模拟,该模型可以较为准确的反映不同株的H9N2亚型的禽流感病毒的毒力以及TCRγδ+CD8α+T细胞针对不同株的H9N2亚型的禽流感病毒的应答能力。同时,本发明还公开了对于禽流感病毒的鸡TCRγδ+CD8α+T细胞免疫应答测试方法。
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公开(公告)号:CN114349829B
公开(公告)日:2023-04-21
申请号:CN202210041210.X
申请日:2022-01-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了ALV‑J MHC‑B2限制性表位肽的鉴定及其应用,属于基因工程技术领域。本发明公开了一种ALV‑J MHC‑B2限制性表位肽,所述ALV‑J MHC‑B2限制性表位肽的氨基酸序列为TVDTASSAI、FVDFANRLI或SALQAFREV。还公开了上述ALV‑J MHC‑B2限制性表位肽在制备ALV表位疫苗中的应用。本发明旨在通过体外结合洗脱实验确定鸡MHC I类分子B2单倍型结合多肽的限制性基序,并利用基序系统筛选ALV‑J表达的四种蛋白中潜在的表位,最终通过功能验证鉴定出具有免疫原性的B2单倍型鸡的ALV‑J T细胞表位肽,为ALV表位疫苗的研发提供物质和理论基础。
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公开(公告)号:CN113234676B
公开(公告)日:2022-12-13
申请号:CN202110395246.3
申请日:2021-04-13
Applicant: 华南农业大学 , 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N5/0783 , C12Q1/02 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种促进鸭T细胞增殖的方法及其应用,其中促进鸭T细胞增殖的方法包含以下步骤:H5N1HPAIV体内接种鸭后由外周血分离得到鸭记忆性PBMC;将H5N1HPAIV体外感染鸭记忆性PBMC与未感染的记忆性PBMC混合培养。本发明利用H5N1HPAIV刺激CFSE标记的鸭记忆性PBMC,从T细胞形态、数量和CFSE标记变化三个方面检测T细胞的增殖,同时利用qPCR检测T细胞增殖后细胞因子表达变化情况。建立了一种促进鸭T细胞增殖的制备方法,为研究鸭T细胞对H5N1HPAIV免疫应答机制提供材料。
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