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公开(公告)号:CN118165935A
公开(公告)日:2024-06-11
申请号:CN202410167646.2
申请日:2024-02-06
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种免消化的细胞传代方法,包括如下步骤:步骤1:贴壁细胞消化后得到细胞悬液,将细胞悬液、微载体、培养液混合后在转瓶中进行悬浮培养,获得悬浮培养混合液,所述贴壁细胞在悬浮培养混合液中的微载体的表面形成单层细胞;步骤2:将表面长满单层细胞的微载体、空的微载体、培养液混合,在转瓶中进行流动贴壁培养;该方法采用悬浮培养的方式得到具有单层细胞的微载体,然后利用流动贴壁培养的方式进行细胞的传代,通过这种方法,可以免去消化的步骤,极大的降低了生产成本,使贴壁细胞的传代扩繁变得简单高效。
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公开(公告)号:CN116121197B
公开(公告)日:2023-10-20
申请号:CN202211202844.5
申请日:2022-09-28
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了抗黄鳍鲷虹彩病毒SDDV分离株的单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体是由杂交瘤细胞株SDDV(ZH‑04/2020)‑MCP‑3H4 1E1产生,该杂交瘤细胞株SDDV(ZH‑04/2020)‑MCP‑3H4 1E1的保藏编号为:GDMCC No:62648。本发明中SDDV分离株(ZH‑04/2020)MCP的单抗的成功制备为SDDV分离株(ZH‑04/2020)免疫学检测方法的建立及病毒感染致病机理的研究奠定了基础,也可用于对SDDV分离株(ZH‑04/2020)MCP在体内外的定量和定位分析。
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公开(公告)号:CN116121197A
公开(公告)日:2023-05-16
申请号:CN202211202844.5
申请日:2022-09-28
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了抗黄鳍鲷虹彩病毒SDDV分离株的单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体是由杂交瘤细胞株SDDV(ZH‑04/2020)‑MCP‑3H4 1E1产生,该杂交瘤细胞株SDDV(ZH‑04/2020)‑MCP‑3H4 1E1的保藏编号为:GDMCC No:62648。本发明中SDDV分离株(ZH‑04/2020)MCP的单抗的成功制备为SDDV分离株(ZH‑04/2020)免疫学检测方法的建立及病毒感染致病机理的研究奠定了基础,也可用于对SDDV分离株(ZH‑04/2020)MCP在体内外的定量和定位分析。
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公开(公告)号:CN116042910A
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202211047441.8
申请日:2022-08-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于检测大口黑鲈虹彩病毒的LFD‑RPA引物探针组、试剂盒及检测方法,属于基因检测技术领域。所述LFD‑RPA引物组序列如SEQ ID NO.1‑2所示,所述探针序列如SEQ ID NO.3所示。本发明中提供的探针和引物特异性强、重复性好。基于此构建的LFD‑RPA试剂盒可常温反应,静置5min即可完成反应,在10min内可观察到结果,无需借助任何仪器;反应结果通过试纸条检测线和质控线条带进行判断;且具有很高的灵敏度,最低检测限为1×101copies/μL。相比PCR的方法具有时间和检测灵敏的优势,有望开发成适用于现场检测LMBV的LFD‑RPA可视化试剂盒。
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公开(公告)号:CN114874974A
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN202210442554.1
申请日:2022-04-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种斜带石斑鱼肠道细胞系ECGI‑21及其用途。斜带石斑鱼肠道细胞系EpinepheluscoioidesgrouperintestinalECGI‑21,保藏编号为:GDMCCNo:62408。本发明的斜带石斑鱼肠道细胞系Epinepheluscoioidesgrou perintestinalECGI‑21生长状态良好,细胞增殖稳定、细胞形态以上皮样为主要形态,不仅可以连续传代,并可超低温冻存和复苏,该细胞系的建立为石斑鱼种质资源保存的相关研究奠定基础。
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公开(公告)号:CN108079287B
公开(公告)日:2021-01-05
申请号:CN201711377044.6
申请日:2017-12-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种石斑鱼虹彩病毒的疫苗及其制备方法和应用。本发明的石斑鱼虹彩病毒的疫苗是SEQ ID No.1所示的核苷酸序列编码的蛋白。其是构建质粒pET32a‑VP72并转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达并破碎细胞后自上清中回收重组蛋白,即为石斑鱼虹彩病毒的疫苗。可以将重组蛋白rVP72与佐剂混合,所得疫苗混合液具有对新加坡石斑鱼虹彩病毒SGIV免疫保护的作用。本发明的石斑鱼虹彩病毒的疫苗其免疫效果稳定,保护率较高,具有高效保护性,可应用石斑鱼养殖过程中保护鱼苗及成鱼对抗石斑鱼虹彩病毒感染。
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公开(公告)号:CN111411073A
公开(公告)日:2020-07-14
申请号:CN202010197056.6
申请日:2020-03-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种海鲈仔鱼细胞系的构建方法,包括以下步骤:(1)原代培养:将海鲈仔鱼组织进行胰酶消化获得细胞悬浮液,加入原代细胞培养液培养原代细胞;(2)传代培养:传代1-10代时,传代细胞培养液中的胎牛血清浓度为20%;传代11-20代时,传代细胞培养液中的胎牛血清浓度为15%;传代20代以后,传代细胞培养液中的胎牛血清浓度为10%;(3)收集传代细胞,获得所述海鲈仔鱼细胞系。通过本发明的构建方法获得的海鲈仔鱼细胞系生长状态良好,细胞增殖稳定不仅可以连续传代,并可超低温冻存和复苏,可用于外源基因表达以及病毒感染分离等研究。
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公开(公告)号:CN108273053A
公开(公告)日:2018-07-13
申请号:CN201810008344.5
申请日:2018-01-04
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/552 , A61K2039/55505 , C07K14/005 , C12N15/70 , C12N2710/00022 , C12N2710/00034
Abstract: 本发明公开了一种石斑鱼虹彩病毒的疫苗及其制备方法和应用。本发明的石斑鱼虹彩病毒的疫苗是SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列编码的蛋白。其是构建质粒pET32a-VP88并转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达并破碎细胞后自上清中回收重组蛋白,即为石斑鱼虹彩病毒的疫苗。可以将重组蛋白rVP88与佐剂混合,所得疫苗混合液具有对新加坡石斑鱼虹彩病毒SGIV免疫保护的作用。本发明的石斑鱼虹彩病毒的疫苗其免疫效果稳定,保护率较高,具有高效保护性,可应用石斑鱼养殖过程中保护鱼苗及成鱼对抗石斑鱼虹彩病毒感染。
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公开(公告)号:CN108079287A
公开(公告)日:2018-05-29
申请号:CN201711377044.6
申请日:2017-12-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种石斑鱼虹彩病毒的疫苗及其制备方法和应用。本发明的石斑鱼虹彩病毒的疫苗是SEQ ID No.1所示的核苷酸序列编码的蛋白。其是构建质粒pET32a-VP72并转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达并破碎细胞后自上清中回收重组蛋白,即为石斑鱼虹彩病毒的疫苗。可以将重组蛋白rVP72与佐剂混合,所得疫苗混合液具有对新加坡石斑鱼虹彩病毒SGIV免疫保护的作用。本发明的石斑鱼虹彩病毒的疫苗其免疫效果稳定,保护率较高,具有高效保护性,可应用石斑鱼养殖过程中保护鱼苗及成鱼对抗石斑鱼虹彩病毒感染。
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公开(公告)号:CN116144525B
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202211125017.0
申请日:2022-09-15
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株海水鱼益生菌乳酸乳球菌菌株及其用途。该菌株为乳酸乳球菌(L.lactis)M48,保藏编号为:GDMCC No:62621。体外实验证明:乳酸乳球菌M48与海鲈虹彩病毒(SPIV)感染的海鲈细胞共培养,具有体外抗SPIV在海鲈细胞增殖的特性;乳酸乳球菌M48对海水鱼创伤弧菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、海豚链球菌、柠檬酸杆菌和气单胞菌也具有抑制作用。动物实验证明:乳酸乳球菌M48对海鲈具有免疫调节和增强免疫功能的特性,且M48菌株单独饲喂对海鲈也具有抗SPIV感染的特性。本发明的乳酸乳球菌M48在海水鱼抗病毒、抗病原菌方面以及免疫调节和增强海水鱼免疫功能方面有一定的应用前景。
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