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公开(公告)号：CN106868044A
公开(公告)日：2017-06-20
申请号：CN201710080738.7
申请日：2017-02-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/027
CPC classification number: C07K14/61 , A01K67/027 , A01K2267/01 , C12N15/85 , C12N2800/107 , C12N2830/15
Abstract: 本发明涉及一种转基因动物毛色报告基因表达载体构建及其应用。该表达盒是由依次串联的两个人TYR增强子，人TYR启动子，小鼠TYR基因和bGH polyA组成；其序列如SEQ ID NO.13所示。本发明还公开了含有该表达盒的表达载体，将表达载体转入毛色为白色的宿主动物基因组，转基因表达后，产生黑色素沉积，能够在宿主动物的皮肤、毛发等部位肉眼直接观察到毛色变化，直接反应目的基因表达情况。应用本发明中构建的载体，以小白鼠为宿主动物制备转基因鼠，成功获得转基因后代，并观察到毛色变化，获得黑鼠，表明该载体可以作为报告基因应用。
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公开(公告)号：CN101279097B
公开(公告)日：2010-08-18
申请号：CN200810123602.0
申请日：2008-05-22
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种基因免疫方法。所说的方法是以常规方法克隆目标基因cDNA，然后构建含目标抗原cDNA的真核表达载体重组质粒，以转座酶质粒作为免疫佐剂；将真核表达载体重组质粒和转座酶质粒按4∶1混匀，然后用基因包裹剂PEI按PEI∶质粒＝2∶1包裹，按每克体重注射1微克质粒的剂量为进行动物免疫。该方法能显著促进抗体效价的提高，建立了一种简单、经济、实用、高效的抗体制备方法，可以进行多种商业化抗体的生产。
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公开(公告)号：CN101294166A
公开(公告)日：2008-10-29
申请号：CN200710134099.4
申请日：2007-10-29
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种猪精囊腺生物反应器及利用其生产重组蛋白或多肽的方法，在公猪精囊腺中特异表达的基因表达载体，该表达载体含启动子、信号肽和多聚腺苷酸化信号的DNA序列等调控元件，当该表达载体通过转基因技术整合入猪基因组中后，重组蛋白或多肽能在转基因成年公猪精囊腺组织中特异表达，并分泌至精液中。本发明的特点是所生产的重组蛋白或多肽可以从精液中直接收获，方法先进简单，成本低。与其它动物相比，在维持成本、生产周期等方面具有明显优势。
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公开(公告)号：CN116656834A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202310554249.6
申请日：2023-05-17
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与猪背膘厚关联的PPARγ基因SINE转座子多态分子标记及检测方法和应用，该分子标记存在插入和缺失两种状态；分子标记核苷酸如SEQ ID NO:1所示序列的第121到701位点是一个581bp的正向SINE转座子的插入，PPARγ基因内SINE转座子多态分子标记位点在第49542到49543位点之间，为缺失状态，该分子标记及检测方法，应用于猪的生长性状的选育中，有效加快育种进程。
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公开(公告)号：CN110157811B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN201910409360.X
申请日：2019-05-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与猪背膘厚关联的GHR基因内SINE转座子多态分子标记、检测方法及应用。所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其来自GHR基因，该序列的200到493位点存在一个反向SINE转座子的插入多态性位点，该位点表现为SINE+/+、SINE+/‑或SINE‑/‑三种基因型，纯合插入基因型（SINE+/+）的个体背膘厚显著小于纯合无插入基因型（SINE‑/‑）的个体。本发明的GHR基因内SINE转座子多态分子标记可以用于家系选育的早期选择，也可在选配中提供分子依据。将会对背膘性状的选育提供强有力的辅助作用，加快育种进程，减少育种成本。本发明的GHR基因内SINE转座子多态分子标记为筛选猪的背膘厚提供了新的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112430622A
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN202011155827.1
申请日：2020-10-26
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于基因编辑领域，特别涉及一种FokI和dCpf1融合蛋白表达载体及其介导的定点基因编辑方法，本发明将CRISPR/Cpf1编辑系统中经突变失活的dCpf1蛋白与FokI核酸酶融合在一起，构建一种高效的gRNA介导的基因定点编辑系统。该方法利用dCpf1的定点作用与核酸酶FokI的剪切作用，通过二聚体的形式进行剪切，可以提高该基因编辑系统的特异性，并达到较低的脱靶率。相对于Cas9蛋白而言，Cpf1蛋白有更大的优势被用来进行基因编辑等操作。本发明提供了一种更便捷，更高效的融合蛋白介导的基因定点编辑方法。
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公开(公告)号：CN111705144A
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN202010690558.2
申请日：2020-07-17
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , C12N15/12
Abstract: 本发明属于动物遗传育种领域和分子标记选育领域，具体涉及一个与猪背膘厚关联的ZNF2基因内的SINE转座子多态分子标记及其检测方法，含有该分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其来自ZNF2基因，SEQ ID NO:1序列的251到564位点存在一个正向SINE转座子的插入多态。本发明的ZNF2基因内的SINE转座子多态分子标记可用于猪个体的选育(背膘厚性状)，也可在配种时提供分子依据。该新的分子标记将有力的辅助背膘厚性状的选育，加快育种进度，减少育种成本，提高经济效益。本发明的ZNF2基因内SINE转座子插入多态为筛选猪的背膘厚提供了一个新的分子标记。
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公开(公告)号：CN107523633B
公开(公告)日：2020-07-03
申请号：CN201710928980.5
申请日：2017-10-09
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6888 , C12N15/10 , G16B30/00
Abstract: 本发明涉及分子生物学和生物信息学领域，具体涉及一种基于猪SINE转座子插入多态性研发新型分子标记的方法。该方法是利用SINE的核苷酸序列作为查询序列，在猪公开的基因组寻找插入位点；根据寻找到的每个插入位点，分别向上、下游延伸300‑500个核苷酸序列，下载每条序列；将获得的序列去除冗余；根据获得的序列信息设计检测引物；利用所得的待验证分子标记引物PCR扩增不同品种，或同一品种不同个体基因组样品，选取能清晰扩出条带且有多态性的引物组合，获得分子标记。本发明方法可以为猪的品系鉴定，育种中的标记辅助选择提供有用的分子标记。
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公开(公告)号：CN107523634B
公开(公告)日：2020-06-02
申请号：CN201710928987.7
申请日：2017-10-09
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6888 , C12N15/10 , G16B30/10
Abstract: 本发明涉及分子生物学和生物信息学领域，具体涉及一种基于猪ERV转座子插入多态性研发新型分子标记的方法。该方法是利用ERV的LTR序列作为查询序列，在猪公开的基因组寻找插入位点；每个插入位点分别向上游和下游延伸300‑500个核苷酸序列，下载每条序列；将获得的序列去除冗余并进行多序列比对，每条插入位点序列保留300‑500个ERV插入位点侧翼区核苷酸序列和LTR序列；再根据获得的序列信息设计检测引物，作为待验证分子标记引物；利用所得的待验证分子标记引物PCR扩增不同品种，或同一品种不同个体基因组样品，选取能清晰扩出条带且有多态性的引物组合，获得分子标记。本发明可以为猪的品系鉴定，育种中的标记辅助选择提供有用的分子标记。
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公开(公告)号：CN110257481A
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201910384029.7
申请日：2019-05-09
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6809
Abstract: 本发明公开了一种基于比较基因组学的转座子插入多态TIP分子标记的挖掘方法，包括以下步骤：（1）选取目标基因或待研究的基因组片段为参考序列。（2）将参考序列在NCBI的WGS数据库中猪的基因组测序数据进行Blast比对，获取不同品种基因组中的同源序列，并对上述序列进行手动校对和拼接。（3）根据猪转座子数据对参考序列和拼接序列进行转座子注释以及多序列比对。（4）挑选序列间存在的超过100个碱基且对应转座子的Indel位点，作为候选TIP位点。（5）以不同品种的池DNA为模板进行PCR扩增检测，选取带型清楚且存在多态性的TIP位点。该方法可以迅速找到目标区域或基因中便于检测、结果清晰易判断的分子标记。
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