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公开(公告)号：CN112553200A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011414852.7
申请日：2020-12-07
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/54 , C12N5/10 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种用于敲除猪UGT2C1基因的打靶载体制备方法及其应用，该方法包括以下步骤：(1)根据猪UGT2C1基因设计sgRNA向导序列；(2)将正链sgRNA序列和负链sgRNA序列退火形成双链DNA；将双链DNA与线性化的pGK1.1载体连接获得阳性打靶载体；(3)将阳性打靶载体混合电转染靶细胞IPEC‑J2获得UGT2C1基因敲除的IPEC‑J2细胞。本发明采用CRISPR/Cas9技术敲除IPEC‑J2细胞系基因组中UGT2C1基因序列，建立的UGT2C1基因敲除的IPEC‑J2细胞可为深入揭示UGT2C1基因在疾病抗性中的作用机制及其在猪抗病育种中的应用提供更直接有效的研究模型。
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公开(公告)号：CN112011482A
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN202010807418.9
申请日：2020-08-12
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种猪源罗伊氏乳杆菌的改良培养方法，该方法为将猪源罗伊氏乳杆菌接种于MRS培养基进行培养，培养条件为：培养温度37～43℃,转速0～120r/min，无氧且供二氧化碳，培养36～48h。本发明对猪源罗伊氏杆菌的培养条件进行了优化改良；本发明对培养时间、温度、氧气含量、转速、接种量多个环境条件进行优化改良，制定的培养方法可在体外对猪源罗伊氏杆菌进行高效培养。
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公开(公告)号：CN111607594A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010338637.7
申请日：2020-04-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR-Cas9编辑技术的敲除猪IRF8基因的细胞系及其构建方法，该细胞系采用以下步骤制备：(1)靶位点设计及sgRNA序列的合成：根据猪IRF8基因CDS区5’端设计sgRNA向导序列；(2)载体构建：将正链sgRNA序列和负链sgRNA序列退火形成双链DNA；将双链DNA与线性化的pGK1.1载体连接获得阳性打靶载体；(3)细胞转染：将阳性打靶载体混合电转染靶细胞IPEC-J2获得IRF8基因敲除的IPEC-J2细胞。建立IRF8基因敲除的小肠上皮细胞系，可为深入揭示腹泻病原体致病机制、抗性基因挖掘与鉴定以及抗腹泻病转基因猪的培育和应用提供更直接有效的研究模型。
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公开(公告)号：CN118910282A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202411197631.7
申请日：2024-08-29
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与猪呕吐毒素抗性的SNP标记及其应用，所述SNP标记在猪基因组上的位置为Chromosome 11：75541817，其碱基为C或A。该SNP可通过促进LIG4基因的表达而增强对DON的抗性；C/A突变可作为分子标记应用于猪霉菌毒素的抗病育种，可通过该SNP遗传标记辅助选择抗DON性能好的AA型个体，有利于提高群体的抗病性能，实现养猪企业经济效益最大化。
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公开(公告)号：CN118600107A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410758361.6
申请日：2024-06-13
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种与猪腹泻病毒抗性相关的SNP标记及应用，所述SNP标记在猪基因组上的位置为Chr7:55365989，其碱基为C或T。本发明所提供的sgRNA序列可通过单碱基编辑器对猪基因组位置为Chr7:55365989的序列实现精准C/T突变；创制的CC和TT基因型细胞可为研究APN基因的表达调控机制提供理想的研究模型；C/T突变可作为分子标记应用于猪病毒性腹泻抗病育种。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111607594B
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202010338637.7
申请日：2020-04-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9编辑技术的敲除猪IRF8基因的细胞系及其构建方法，该细胞系采用以下步骤制备：(1)靶位点设计及sgRNA序列的合成：根据猪IRF8基因CDS区5’端设计sgRNA向导序列；(2)载体构建：将正链sgRNA序列和负链sgRNA序列退火形成双链DNA；将双链DNA与线性化的pGK1.1载体连接获得阳性打靶载体；(3)细胞转染：将阳性打靶载体混合电转染靶细胞IPEC‑J2获得IRF8基因敲除的IPEC‑J2细胞。建立IRF8基因敲除的小肠上皮细胞系，可为深入揭示腹泻病原体致病机制、抗性基因挖掘与鉴定以及抗腹泻病转基因猪的培育和应用提供更直接有效的研究模型。
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公开(公告)号：CN112899219A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202011415326.2
申请日：2020-12-07
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明公开了一种小鼠腔前卵泡三维培养体系及其建立方法，提供了一种用于体外培养小鼠腔前卵泡的试剂组合，该试剂组合包含：藻酸盐溶液、CaCl2凝胶液、卵泡分离液(DM)、卵泡平衡液(MM)、卵泡酶解液(EM)、卵泡生长液(GM)、卵泡成熟液(MM1)和透明质酸酶。采用该试剂组合建立了一种小鼠腔前卵泡三维培养体系，该三维培养体系以藻酸盐凝胶为基质，以藻酸盐与Ca2+形成的凝胶滴为卵泡发育提供立体结构，再通过在不同的培养基质中进行培养，得到发育成熟的卵泡，进一步得到成熟的卵母细胞。
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公开(公告)号：CN110004145A
公开(公告)日：2019-07-12
申请号：CN201910263714.4
申请日：2019-04-02
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/12 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种sgRNA、双链DNA、载体和细胞。本发明还公开了一种KLF4基因的敲除方法。本发明首次利用CRISPR/Cas9技术构建KLF4敲除的IPEC-J2细胞系，可作为猪疾病研究的理想细胞模型；利用CRISPR/Cas9技术进行基因敲除，比基因沉默、干扰等技术手段可更有效地敲除KLF4基因，更有助于KLF4蛋白的功能研究；基因测序检测表明KLF4基因序列被敲除，可造成KLF4基因功能的缺失，是较为理想的KLF4基因敲除的IPEC-J2细胞模型。本发明的敲除方法简便，打靶效率高。
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公开(公告)号：CN108220338A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201711170105.1
申请日：2017-11-22
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种APN基因敲除的IPEC_J2细胞的构建方法，属于基因工程技术领域，本发明采用CRISPR/Cas9技术敲除IPEC_J2细胞系基因组中APN基因序列，建立的APN基因敲除的小肠上皮细胞可为深入揭示腹泻病原体致病机制以及抗腹泻病转基因猪的培育和应用提供更直接有效的研究模型。
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公开(公告)号：CN106050911A
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201610384511.7
申请日：2016-06-02
Applicant: 扬州大学
IPC: F16C21/00
CPC classification number: F16C21/00
Abstract: 动压滚珠混合轴承，属于机械制造技术领域，其包括动压轴承部分和滚珠轴承部分，滚珠轴承部分位于动压轴承部分的两侧，其滚珠轴承部分具体为深沟球轴承，动压轴承部分具体为多油沟轴承，油槽形式为周向油槽，可双向转动。在转轴速度未达动压轴承所需速度时，由滚珠轴承承担主要负载，当转轴速度达到一定速度时，动压轴承油膜形成，承载一定的转轴径向力，速度越高，则动压轴承部分承载的部分相对越多。解决了滚珠轴承高速负载寿命低和动压轴承低速状态下产生不了压力油膜无法实现纯液体摩擦的情况，提高了轴承的负载能力及其稳定性。
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