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公开(公告)号:CN112695014A
公开(公告)日:2021-04-23
申请号:CN202011538996.3
申请日:2020-12-23
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明涉及细胞培养技术领域,尤其涉及一种扩增NK细胞的培养体系及培养方法。本发明培养体系培养14天获得的细胞中NK细胞纯度达92.19%,NK细胞扩增倍数达6100倍,且肿瘤杀伤活性不降低。为NK细胞过继免疫治疗的广谱应用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN111411074A
公开(公告)日:2020-07-14
申请号:CN201910009761.6
申请日:2019-01-05
Applicant: 杭州可典生物科技有限公司 , 杭州中赢生物医疗科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种骨髓细胞培养基,其在基础培养基中添加了抗生素和固体血清替代物。利用本发明提供的培养基培养后的骨髓细胞可用于染色体制片,并表现出染色体呈现状态良好,更易观察等优势,在医学检测领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN107177548A
公开(公告)日:2017-09-19
申请号:CN201710493447.0
申请日:2017-06-26
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783 , C12N5/10 , A61K35/17 , A61P35/00 , A61P35/02 , A61P31/04 , A61P31/12 , A61P31/10 , A61P33/00 , A61P1/16 , A61P31/20 , A61P31/18 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及细胞免疫治疗领域,具体涉及一种体外扩增淋巴细胞的培养体系及扩增方法和应用。所述培养体系包括:白细胞介素21、白细胞介素12和CD80的混合物。采用本发明培养体系扩增的NK细胞,NK细胞纯度高,对肿瘤细胞杀伤力强,在第14天可以将NK细胞扩增约9100倍,达到各种临床适合治疗病症预期疗效应用要求;解决了临床应用培养体系的安全性问题,有效降低NK细胞的应用成本,为NK细胞过继免疫治疗的广谱应用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN117598289A
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202311632305.X
申请日:2023-12-01
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种细胞保存液,其组分每毫升包括:右旋糖酐0.01‑0.08mg,海藻酸钠0.05‑0.25mg,谷胱甘肽0.1‑0.6mg,银杏酸0.1‑0.4mg,二水L‑酪氨酸二钠0.01‑0.05mg,L‑胱氨酸二盐酸0.01‑0.05mg,十二烷基硫酸钠0.1‑0.6μg,葡聚糖0.05‑0.15g,聚乙二醇1‑3mg,非必须氨基酸2‑6mg,人血白蛋白5‑15mg。本发明公开了上述细胞保存液使用方法,包括如下步骤:将外周血单核细胞与上述细胞保存液混合均匀得到细胞悬浮液,移入无菌冻存管然后放入冻存盒中,程序降温至‑50~‑60℃,冻存5‑15h,然后转入液氮中冻存。
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公开(公告)号:CN116574680A
公开(公告)日:2023-08-11
申请号:CN202310526293.6
申请日:2023-05-10
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明公开了一种体外高效扩增NK细胞的培养基,包括:培养基A、培养基B和培养基C;培养基A的组分包括:RPMI‑1640培养基、重组人胰岛素、人血清白蛋白、胆固醇;培养基B的组分包括:GT‑T551培养基、苦瓜多肽、大豆异黄酮、谷氨酰胺、抗CD3抗体、维生素C;培养基C的组分包括:RPMI‑1640培养基、GT‑T551培养基、人血清白蛋白、FK506、IL‑15、OK‑432、IL‑21。本发明还公开了一种体外高效扩增NK细胞的培养方法,(1)将单个核细胞接种于上述培养基A中培养;(2)将步骤(1)培养细胞接种于上述培养基B中培养;(3)将步骤(2)培养细胞接种于上述培养基C中培养。
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公开(公告)号:CN115974081A
公开(公告)日:2023-04-18
申请号:CN202310061239.9
申请日:2023-01-16
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C01B32/39 , C01B32/21 , H01M4/587 , H01M10/0525
Abstract: 本发明涉及一种NK细胞冻存液及其制备方法和应用,所述NK细胞冻存液包括人血白蛋白、聚乙二醇、二甲基亚砜、右旋糖酐、维生素B12、氯化钠和水。本发明创造性地发现使用人血白蛋白、聚乙二醇、二甲基亚砜、右旋糖酐、维生素B12和氯化钠组成的NK细胞冻存液冻存细胞,可以提高细胞的存活率,减少NK细胞在冻存复苏过程中受到的伤害,且细胞复苏后具有良好增殖和杀伤能力。
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公开(公告)号:CN114891743A
公开(公告)日:2022-08-12
申请号:CN202210716229.X
申请日:2022-06-23
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明公开了一种高纯度NK细胞体外扩增培养方法,包括如下步骤:向GT‑T551基础培养基中加入IL‑2、IL‑12、IL‑15、IL‑17、黄芩素、姜黄素、云芝多糖,得到NK细胞培养基;NK细胞培养基中,IL‑2的浓度为500‑600μg/mL,黄芩素的浓度为10‑20μg/mL,姜黄素的浓度为10‑20μg/mL,云芝多糖的浓度为15‑25μg/mL;采集并分离自体外周血的单个核细胞,加入至NK细胞培养基中重悬细胞,加入细胞培养瓶中,置于37℃、5%二氧化碳的培养箱中孵育,每隔2天,补加含IL‑2的GT‑T551培养基,培养至第7天,扩瓶培养;培养至第14天,获得高纯度NK细胞。
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公开(公告)号:CN114874986A
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN202210682587.3
申请日:2022-06-16
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783 , C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/65 , C12N13/00
Abstract: 本发明公开了一种采用K562细胞扩增NK细胞的方法,包括如下步骤:采用重组慢病毒对K562细胞进行感染,感染时间为10‑20h,通过流式细胞术和有限稀释法进行克隆得到工程细胞株;然后采用钴‑60辐照灭菌得到滋养细胞;采用外周血分离单个核细胞,然后加入至NK细胞完全培养基中重悬,加入滋养细胞混合均匀,置于37℃、二氧化碳浓度为2‑6%的培养箱中培养;培养至第3天时,离心弃掉上清液,加入相同体积的NK细胞完全培养基混合均匀,继续置于37℃、二氧化碳浓度为2‑6%的培养箱中培养;培养至第7天,补加1‑2μg/mLIFN‑γ和自体血浆;继续培养至第14天得到采用K562细胞扩增的NK细胞。
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公开(公告)号:CN110964698A
公开(公告)日:2020-04-07
申请号:CN201911352762.7
申请日:2019-12-25
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/10 , C12N5/0783 , C12N15/85 , C12N5/0786 , A61K35/17 , A61P35/00
Abstract: 本发明提供了一种人工抗原递呈细胞及其制备方法和应用,所述人工抗原递呈细胞表达膜蛋白MICA、IL-12和CD80,用于培养NK细胞或含有NK细胞的外周血单核细胞,可以显著提高NK细胞的数量,延长NK细胞的寿命,提高NK细胞的活性,与现有的表达MICA的人工抗原递呈细胞相比,具有更强的扩增激活NK细胞的效果。
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公开(公告)号:CN118956748A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202411457847.2
申请日:2024-10-18
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明公开了一种NK细胞及其扩增方法,属于生物技术领域。所述扩增方法包括:培养基因修饰的滋养细胞,破碎滋养细胞得到脂质体,使用所述脂质体激活NK细胞进行扩增培养;所述基因修饰的滋养细胞过表达IL‑21。本发明方法使用的基因修饰的滋养细胞能够表达刺激NK细胞生长的细胞因子,使用的脂质体提取方法不需要额外添加促脂质体分泌的营养液,不会给培养体系带入新物质,操作简单,安全性高。
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