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公开(公告)号:CN118956748B
公开(公告)日:2025-05-06
申请号:CN202411457847.2
申请日:2024-10-18
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明公开了一种NK细胞及其扩增方法,属于生物技术领域。所述扩增方法包括:培养基因修饰的滋养细胞,破碎滋养细胞得到脂质体,使用所述脂质体激活NK细胞进行扩增培养;所述基因修饰的滋养细胞过表达IL‑21。本发明方法使用的基因修饰的滋养细胞能够表达刺激NK细胞生长的细胞因子,使用的脂质体提取方法不需要额外添加促脂质体分泌的营养液,不会给培养体系带入新物质,操作简单,安全性高。
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公开(公告)号:CN117363570A
公开(公告)日:2024-01-09
申请号:CN202311479925.4
申请日:2023-11-08
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明适用于培养基技术领域,提供了一种NK分化培养基及其制备方法,所述NK分化培养基包括NK分化基础培养基、细胞因子、天贝激酶、D‑甘油酸、重组Ⅲ型人源化胶原蛋白和改性纳米备长炭,本发明通过加入天贝激酶,保护细胞健康,通过加入D‑甘油酸,激活细胞中线粒体的活性,通过加入改性纳米备长炭,含有生物成长所需要的多种矿物元素,能够发出远红外线,使细胞处于最高振动能级,细胞产生共振效应,从而提高细胞活性,加速分化过程,改性纳米备长炭与重组Ⅲ型人源化胶原蛋白复合,形成三维网状纤维结构,使细胞可以在三维空间上与邻近细胞相互接触、传导信号,模拟人体内的细胞生长状态。
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公开(公告)号:CN116606809A
公开(公告)日:2023-08-18
申请号:CN202310613980.1
申请日:2023-05-25
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783 , A61K35/17 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种用于肿瘤治疗的NK细胞培养方法,包括如下步骤:(1)分离单个核细胞,将单个核细胞接种于NK细胞培养基中培养1‑3天,培养温度为35‑38℃,得到一次培养物;(2)向一次培养物中补加OK‑432、IL‑21和去乙酰毛花苷,继续培养1‑3天;(3)向二次培养物中IL‑2、IL‑15、IL‑21、亚叶酸、姜黄素,继续培养1‑3天。本发明创造性将去乙酰毛花苷添加至NK细胞培养过程中,发现其在避免培养过程中使用具有复杂成分动物血清的基础上,一方面降低给细胞培养带来的不安全因素,另一方面能促进NK细胞的活化和增殖。
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公开(公告)号:CN117598289A
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202311632305.X
申请日:2023-12-01
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种细胞保存液,其组分每毫升包括:右旋糖酐0.01‑0.08mg,海藻酸钠0.05‑0.25mg,谷胱甘肽0.1‑0.6mg,银杏酸0.1‑0.4mg,二水L‑酪氨酸二钠0.01‑0.05mg,L‑胱氨酸二盐酸0.01‑0.05mg,十二烷基硫酸钠0.1‑0.6μg,葡聚糖0.05‑0.15g,聚乙二醇1‑3mg,非必须氨基酸2‑6mg,人血白蛋白5‑15mg。本发明公开了上述细胞保存液使用方法,包括如下步骤:将外周血单核细胞与上述细胞保存液混合均匀得到细胞悬浮液,移入无菌冻存管然后放入冻存盒中,程序降温至‑50~‑60℃,冻存5‑15h,然后转入液氮中冻存。
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公开(公告)号:CN116574680A
公开(公告)日:2023-08-11
申请号:CN202310526293.6
申请日:2023-05-10
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明公开了一种体外高效扩增NK细胞的培养基,包括:培养基A、培养基B和培养基C;培养基A的组分包括:RPMI‑1640培养基、重组人胰岛素、人血清白蛋白、胆固醇;培养基B的组分包括:GT‑T551培养基、苦瓜多肽、大豆异黄酮、谷氨酰胺、抗CD3抗体、维生素C;培养基C的组分包括:RPMI‑1640培养基、GT‑T551培养基、人血清白蛋白、FK506、IL‑15、OK‑432、IL‑21。本发明还公开了一种体外高效扩增NK细胞的培养方法,(1)将单个核细胞接种于上述培养基A中培养;(2)将步骤(1)培养细胞接种于上述培养基B中培养;(3)将步骤(2)培养细胞接种于上述培养基C中培养。
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公开(公告)号:CN119120366A
公开(公告)日:2024-12-13
申请号:CN202411548434.5
申请日:2024-11-01
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783 , C12N5/0781 , C12N5/071 , C12N5/09 , C12N5/04 , C12M1/00 , C12M1/12
Abstract: 本发明涉及一种破碎细胞的方法及其应用,所述破碎细胞的方法包括:将细胞悬液在外力作用下来回穿过滤膜,获得所述破碎细胞,所述滤膜的孔径小于细胞直径且大于细胞核直径。本发明通过挤滤法破碎细胞,当压力较大时,或细胞壁、细胞膜比较脆弱时,部分细胞通过滤膜时会被挤碎,重复多次即可达到破碎大部分细胞的目的。该方法噪音小,通过差速离心的顺序组合可去除或收集细胞组分,且该方法可无菌操作,无化学添加物,不污染细胞,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN116636526A
公开(公告)日:2023-08-25
申请号:CN202310610214.X
申请日:2023-05-25
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种细胞保存液,其组分包括:乙二胺四乙酸二钠0.1‑1mg/mL,D‑甘露醇20‑26μg/mL,五羟黄酮10‑16μg/mL,L‑谷氨酰胺1‑3mg/mL,山柰素‑3‑鼠李葡糖苷0.2‑0.6mg/mL,木兰花碱1‑2mg/mL,羟乙基淀粉10‑14mg/mL,二硫苏糖醇0.01‑0.1mg/mL,氯化钠9mg/mL,人血清白蛋白0.5‑1.5mg/mL。本发明还公开了上述细胞保存液的应用。本发明还公开了一种细胞保存方法,将细胞悬浮于上述细胞保存液中得到细胞悬液;将细胞悬液分装在冻存管中,在温度为10‑15℃环境中保存。
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公开(公告)号:CN116649328A
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN202310526289.X
申请日:2023-05-10
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种人类活性免疫细胞冻存液,其组分包括:聚乙二醇1‑2.5mg/ml,1,3‑丙二醇1‑3mg/ml,半乳糖胺0.01‑0.05mg/ml,唾液酸0.01‑0.05mg/ml,葡聚糖0.1‑0.3mg/ml,海藻糖0.1‑0.5mg/ml,苜蓿素0.1‑0.2mg/ml,壬基酚聚氧乙烯醚‑100.1‑0.4μg/ml,草酸钙0.01‑0.02mg/ml,壳聚糖0.1‑0.5mg/ml,非必须氨基酸5‑15mg/ml,人血白蛋白10‑20mg/ml;聚乙二醇相对分子质量为800‑1200。本发明还公开了一种人类活性免疫细胞的冻存方法。本发明还公开了一种人类活性免疫细胞的冻存复苏方法。
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公开(公告)号:CN118956748A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202411457847.2
申请日:2024-10-18
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明公开了一种NK细胞及其扩增方法,属于生物技术领域。所述扩增方法包括:培养基因修饰的滋养细胞,破碎滋养细胞得到脂质体,使用所述脂质体激活NK细胞进行扩增培养;所述基因修饰的滋养细胞过表达IL‑21。本发明方法使用的基因修饰的滋养细胞能够表达刺激NK细胞生长的细胞因子,使用的脂质体提取方法不需要额外添加促脂质体分泌的营养液,不会给培养体系带入新物质,操作简单,安全性高。
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公开(公告)号:CN117568274A
公开(公告)日:2024-02-20
申请号:CN202311520248.6
申请日:2023-11-15
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明适用于NK细胞培养技术领域,提供了一种NK细胞培养体系及培养方法,所述NK细胞培养体系包括无血清培养基、NK细胞激活因子、丝素蛋白、儿茶素、改性聚乙烯醇、三磷酸腺甘二钠,本发明采用无血清培养基,不会带入支原体及病毒,通过加入丝素蛋白,具有良好的机械性能和生物相容性,能够提高细胞粘附能力和增殖能力,加入儿茶素,具有抗肿瘤、抗氧化、抗病菌多种药理作用,通过加入改性聚乙烯醇,具有良好的机械性能和生物相容性,能够改变培养体系剪切力,能够提高NK细胞的细胞活性,有利于提高NK细胞的扩增率及其杀伤活性,并且,儿茶素与改性聚乙二醇具有协同增效作用,能够进一步提高NK细胞的杀伤活性。
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