公开(公告)号：CN101548646A

公开(公告)日：2009-10-07

申请号：CN200910072102.3

申请日：2009-05-25

Applicant: 东北林业大学 ,  由香玲

Inventor： 由香玲 ,  詹亚光 ,  代金玲 ,  谭啸 ,  尹静 ,  范桂枝 ,  曾凡锁 ,  齐凤慧

IPC: A01H4/00 ,  A01G31/00

Abstract: 本发明提供了一种通过体细胞胚和次生体细胞胚发生途径快繁龙牙楤木的方法。本发明以龙牙楤木幼苗的叶子、叶柄和根段为外植体，在IBA浓度分别为3.0mg/L、2.0mg/L、0.3mg/L和2％蔗糖的SH培养中暗培养35天，三种外植体的体细胞胚诱导率都可达到100％，且平均每个外植体都产生较多的体细胞胚数(8.6－11.3个)。蔗糖浓度和IBA都可以影响次生体细胞胚的产生，在3.0mg/L IBA+2％蔗糖+SH培养基的培养条件下，中暗培养4周后，100％的体细胞胚上都有次生体细胞胚生成。将获得的成熟初生体细胞胚和次生体细胞胚转入无激素的WPM培养基中，都可迅速萌发生长为小苗。约5cm的健壮小苗移栽土壤中，成活率可达89％。本发明提供的培养简单、再生周期短、可持续获得再生植株的方法，可用于龙牙楤木苗木产业化生产。

公开(公告)号：CN101358179A

公开(公告)日：2009-02-04

申请号：CN200810137185.5

申请日：2008-09-25

Applicant: 东北林业大学 ,  詹亚光

Inventor： 詹亚光 ,  齐凤慧 ,  景天忠 ,  曾凡锁 ,  范桂枝 ,  由香玲

IPC: C12N5/04 ,  C12P7/42 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供了一种利用诱导子提高茶条槭细胞中没食子酸含量的方法。该方法是利用茶条槭(Acer ginnala Maxim)细胞的悬浮培养，通过在细胞生长适宜阶段，加入诱导子(真菌诱导子或茉莉酸甲酯)，在诱导一定时间后收获细胞，可显著提高细胞中没食子酸含量。真菌诱导子诱导2－7天后可使细胞中没食子酸含量最高达12.00mg/gDW，产量为151.20mg/L，是对照组的2.06倍；茉莉酸甲酯可使细胞中没食子酸含量最高达13.97mg/gDW，产量为139.70mg/L，是对照组的2.04倍。本发明通过确定添加诱导子的种类、添加浓度、适宜添加诱导子的茶条槭悬浮细胞生长阶段和诱导持续时间，建立诱导子诱导茶条槭细胞高效合成和积累没食子酸技术，是一种有广阔应用前景的没食子酸生产方法。

公开(公告)号：CN101285084A

公开(公告)日：2008-10-15

申请号：CN200810064648.X

申请日：2008-06-02

Applicant: 东北林业大学 ,  景天忠 ,  王志英

Inventor： 景天忠 ,  王志英 ,  齐凤慧

IPC: C12P19/34 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种可有效克隆含多拷贝T－DNA遗传修饰植物中T－DNA旁侧植物DNA序列的方法。本发明的主要步骤是用限制性内切酶切去除与植物DNA相连的部分T－DNA序列以外的其它T－DNA序列，然后进行2轮TAIL－PCR。酶切位点位于T－DNA上的NOS poly A区或/和35S poly A区，TAIL－PCR所用嵌套引物也是根据T－DNA上的NOS poly A区和35Spoly A区的序列设计，因此本方法具有通用性。

公开(公告)号：CN119443834A

公开(公告)日：2025-02-14

申请号：CN202310961897.3

申请日：2023-08-02

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 景天忠 ,  齐凤慧 ,  李曼毓 ,  韩勍 ,  姜云宵

IPC: G06Q10/0637 ,  G06Q50/02 ,  G06F18/2415

Abstract: 本发明公开了一种预测单株林木发生病虫害概率或程度的方法，使用SADIE(Spatial AnalysisbyDistanceIndices)的类聚指数(clusteringindex)vi作为解释变量来预测单株林木发生病虫害的概率或程度。预测可在全局尺度(整个调查区域)上进行，也可在局部尺度(以单株林木为圆心的圆)上进行。进行局部尺度预测时，在一系列不同半径的圆上调查，并建立不同半径尺度上的模型，然后使用Meta分析法得到系数的汇总效应来预测。本发明可以为森林病虫害防治工作提供相适应的预测方法。

公开(公告)号：CN116420620B

公开(公告)日：2024-01-26

申请号：CN202310426005.X

申请日：2023-04-20

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 齐凤慧 ,  孔繁秋 ,  张开放 ,  曹源 ,  郭欣悦 ,  詹亚光 ,  曾凡锁 ,  王文明 ,  张永存 ,  呼和木仁 ,  贾树龙 ,  李艳秋 ,  纪玉存 ,  于英杰

IPC: A01H4/00 ,  A01H1/02

Abstract: 本发明公开了一种通过胚挽救获得水曲柳与白蜡种间杂交F1代的方法，选择赤峰地区的白蜡树作为父本，选择哈尔滨地区本土优良水曲柳作为母本，在5月初，对雌花进行套袋、人工授粉、摘袋，授粉后35d开始取样，果实表面消毒后扒掉果皮获得无菌胚珠，将胚珠接种在发育培养基中，置于25±2℃环境下，黑暗培养7‑8周，胚珠逐渐发育成熟，然后转移至弱光条件下培养，光照强度为10μmol·m‑2·s‑1，光周期12h/d，温度25±2℃，子叶长出并转绿，对没有萌发的胚转入胚的二次萌发培养基中，光照强度为80μmol·m‑2·s‑1，子叶长出并转绿，将长出子叶的胚转移至幼苗生长培养基中，光照培养20‑25d，获得幼苗，该方法可以解决水曲柳与白蜡种间杂交中胚的畸形、幼胚败育、未成熟胚无法获得杂种植株等问题，对林木新品种选育具有重要的意义。

公开(公告)号：CN116970586A

公开(公告)日：2023-10-31

申请号：CN202310488676.9

申请日：2023-05-04

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 齐凤慧 ,  詹亚光 ,  景天忠 ,  王雯萱 ,  曾凡锁

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/113 ,  C12N15/87 ,  A01K67/033 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了柳蝙蛾几丁质合成酶1(PeCHS1)基因、其dsRNA及其合成方法和抗虫性应用，通过转录组分析，设计并合成PeCHS1基因开放阅读框的特异性引物对，经过基因克隆获得PeCHS1基因序列，核苷酸序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2，然后选择序列为SEQ ID NO：3的基因片段为RNAi靶序列，设计并合成带有酶切位点的引物对SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7，PCR扩增，构建原核表达载体并诱导dsRNA表达。对柳蝙蛾幼虫进行dsRNA的饲喂，干扰PeCHS1基因的表达，5d后处理组取食相较对照组逐渐减少，活动缓慢，在死亡幼虫中发现蜕皮异常及体表发育异常的表型，8d后幼虫死亡率为50％，此时GFP对照组为30％，效果显著。本发明在林业柳蝙蛾害虫的防治中具有高效性、特异性和安全性的广泛应用前景。

公开(公告)号：CN116732219A

公开(公告)日：2023-09-12

申请号：CN202310437465.2

申请日：2023-04-23

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 齐凤慧 ,  詹亚光 ,  孔繁秋 ,  曹源 ,  郭欣悦 ,  张开放 ,  曾凡锁 ,  景天忠

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种水曲柳与白蜡种间杂交F1代品种鉴定的方法，该方法利用SSR分子标记技术筛选出2对可以鉴定父本、母本和杂交F1子代的引物，PCR扩增后用12％非变性聚丙烯酰胺电泳进行检测，在凝胶成像仪中观察显色的凝胶，并拍照，统计父本、母本和F1子代之间的差异条带，即父母本的差异条带在F1子代中都存在，说明F1子代为杂交品种。目前对水曲柳与白蜡杂交子代的鉴定多采用田间生长、生理及抗逆特征等指标进行鉴定，不易判别是否为真杂种，本发明能够准确和易于鉴定水曲柳和白蜡杂交种质成分，确定杂交种纯度，为培育新品种并推广具有重要的意义。

公开(公告)号：CN116622748A

公开(公告)日：2023-08-22

申请号：CN202310469455.7

申请日：2023-04-27

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 景天忠 ,  齐凤慧 ,  王雯萱

IPC: C12N15/55 ,  C12N15/113 ,  C12N15/70 ,  C12N15/87 ,  C12N15/11 ,  A01N57/16 ,  A01P7/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种缀叶丛螟液泡ATP酶A亚基(LmV‑ATPaseA)基因、其dsRNA及其合成方法和抗虫性应用，通过转录组分析，设计并合成LmV‑ATPaseA基因开放阅读框的特异性引物对SEQ ID NO：4和SEQ ID NO:5，经过基因克隆获得LmV‑ATPaseA基因序列，核苷酸序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2，然后选择序列为SEQ ID NO：3的基因片段为RNAi靶序列，设计并合成带有酶切位点的引物对SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7，PCR扩增，构建原核表达载体并诱导dsRNA表达。通过对缀叶丛螟幼虫进行dsRNA的饲喂，干扰LmV‑ATPaseA基因的表达，缀叶丛螟幼虫出现进食障碍死亡等异常表型，靶标基因表达量显著降低，幼虫死亡率升高。本发明为林业缀叶丛螟的害虫防治提供高效性、特异性和安全性的广泛应用前景。

公开(公告)号：CN116355925A

公开(公告)日：2023-06-30

申请号：CN202310476224.9

申请日：2023-04-27

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 景天忠 ,  齐凤慧 ,  王雯萱

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/113 ,  C12N15/87 ,  A01N57/16 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了缀叶丛螟几丁质合成酶1(LmCHS1)基因、其dsRNA及其合成方法和抗虫性应用，通过转录组分析，设计并合成LmCHS1基因开放阅读框的特异性引物对，经过基因克隆获得LmCHS1基因序列，核苷酸序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2，然后选择序列为SEQ ID NO：3的基因片段为RNAi靶序列，设计并合成带有酶切位点的引物对SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7，PCR扩增，构建原核表达载体并诱导dsRNA表达。对缀叶丛螟幼虫进行dsRNA的饲喂，干扰LmCHS1基因的表达，24h观察到了幼虫出现体表异常，部分幼虫无法正常完成蜕皮过程或蜕皮后不能形成正常体表而死亡等异常现象，96h后幼虫死亡率为72.22％，此时GFP对照组为40％，效果显著。本发明在林业缀叶丛螟害虫的防治中具有高效性、特异性和安全性的广泛应用前景。

公开(公告)号：CN114703187A

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202210336608.6

申请日：2022-03-31

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 曾凡锁 ,  高尚珠 ,  陈晓慧 ,  齐凤慧 ,  王希刚 ,  刘海涛 ,  张振峰 ,  韩士君 ,  马铭浩

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  C12N15/10 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明涉及一种水曲柳U6基因启动子proFmU6.7及其克隆与应用。本发明首次成功克隆了水曲柳RNA聚合酶Ⅲ型启动子——水曲柳内源U6基因启动子proFmU6.7，并成功构建了水曲柳U6基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色验证，证明该启动子具有高效转录活性。实验证明一种水曲柳U6基因截短启动子proFmU6.7.4具有启动活性，并成功在CRISPR/Cas9系统中应用。水曲柳U6基因启动子proFmU6.7克隆及启动子活性的表达分析，为研究与水曲柳及近缘植物的转化研究提供了高效的启动子序列，也可以实现对水曲柳高效精准的种质创新与品种遗传改良。