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公开(公告)号:CN114164114A
公开(公告)日:2022-03-11
申请号:CN202111495124.8
申请日:2021-12-08
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N1/11 , C12N15/79 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 弓形虫核酮糖‑5‑磷酸异构酶TgRPI基因编辑虫株及其应用。本发明公开了一个有潜力的疫苗和药物设计靶点和一种预防弓形虫感染的基因敲除虫株。所述疫苗和药物设计靶点为弓形虫核酮糖‑5‑磷酸异构酶TgRPI基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述基因敲除虫株敲除了TgRPI基因,该基因敲除虫株在体外生长速度减缓,但是可以传代培养,在动物体内具有毒力小、繁殖少等特性,能提高动物对弓形虫的免疫能力。由于TgRPI对弓形虫体内外生长有重要作用,故有成为疫苗和药物靶点的潜力,且该基因敲除虫株有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
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公开(公告)号:CN118308431B
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202410170869.4
申请日:2024-02-06
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/90 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/54 , C12N15/61 , C12N1/11 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开了一株弓形虫三基因敲除疫苗虫株及其应用。本发明通过基因编辑技术敲除弓形虫的景天庚酮糖‑1,7‑二磷酸酯酶TgSBPase、转醛醇酶TgTAL和核酮糖‑5‑磷酸差向异构酶TgRuPE三个基因,成功构建TgSBPase、TgTAL和TgRuPE三基因敲除虫株;在敲除这三个基因后,弓形虫可以在体外传代培养,且在体内具有几乎无毒的特性,小鼠免疫接种该三基因敲除虫株后可以有效抵抗野毒虫株的感染,具有良好的免疫保护作用,为开发高效、无毒、安全的抗弓形虫病疫苗提供了方法和手段。
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公开(公告)号:CN118750592B
公开(公告)日:2025-02-11
申请号:CN202411247790.3
申请日:2024-09-06
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种缺失TgAROM基因的弓形虫减毒疫苗,含有缺失了TgAROM基因的弓形虫疫苗虫株Δarom,所述TgAROM基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明发现直接敲除弓形虫TgAROM基因对弓形虫的胞内生长无明显影响;Δarom虫株可以在体外正常传代培养,但Δarom虫体在动物体内不繁殖,几乎没有毒力;免疫接种Δarom虫株可以产生良好的免疫保护力;综上表明Δarom虫株具有成为弓形虫疫苗的潜力。
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公开(公告)号:CN118436628A
公开(公告)日:2024-08-06
申请号:CN202410470536.3
申请日:2024-04-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/167 , A61K31/277 , A61P33/02
Abstract: 本发明公开了二苯基脲类化合物在制备抗弓形虫药物中的应用。本发明通过对咪唑苯脲及二苯基脲类化合物的体外抗弓形虫的研究,得到7种能有效抑制弓形虫生长的化合物,对弓形虫的体外抑虫率高,能够显著抑制虫体噬斑的形成,很好地抑制弓形虫的增殖;其中二苯基脲类化合物:1,3‑双(3‑氟苯基)脲、1‑(3‑溴苯基)‑3‑(4‑氯苯基)脲、1‑(3‑氯苯基)‑3‑(4‑氯苯基)脲,细胞毒性较小,还能用于治疗小鼠感染的弓形虫病,显著抑制弓形虫在体内繁殖,且不会影响小鼠生长,具有显著的抑虫效果,可以用于制备和开发更多的抗弓形虫药物。
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公开(公告)号:CN118308431A
公开(公告)日:2024-07-09
申请号:CN202410170869.4
申请日:2024-02-06
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/90 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/54 , C12N15/61 , C12N1/11 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开了一株弓形虫三基因敲除疫苗虫株及其应用。本发明通过基因编辑技术敲除弓形虫的景天庚酮糖‑1,7‑二磷酸酯酶TgSBPase、转醛醇酶TgTAL和核酮糖‑5‑磷酸差向异构酶TgRuPE三个基因,成功构建TgSBPase、TgTAL和TgRuPE三基因敲除虫株;在敲除这三个基因后,弓形虫可以在体外传代培养,且在体内具有几乎无毒的特性,小鼠免疫接种该三基因敲除虫株后可以有效抵抗野毒虫株的感染,具有良好的免疫保护作用,为开发高效、无毒、安全的抗弓形虫病疫苗提供了方法和手段。
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公开(公告)号:CN118191315A
公开(公告)日:2024-06-14
申请号:CN202410322139.1
申请日:2024-03-20
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , C07K16/20
Abstract: 本发明公开了CP2蛋白多克隆抗体作为隐孢子虫纳虫空泡膜定位标签抗体的应用。本发明通过对微小隐孢子虫的CP2蛋白进行原核表达,纯化蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,进行ELISA和WB检测抗体效价证明多抗有效,随后进行间接免疫荧光和免疫电镜检测抗体确定其定位于隐孢子虫纳虫空泡膜上,能特异性识别微小隐孢子虫CP2蛋白,即纳虫空泡膜,能作为标签定位隐孢子虫纳虫空泡,对于隐孢子虫未知蛋白的定位研究具有重要作用;通过免疫荧光定位还能对入侵细胞的隐孢子虫进行定位,并鉴定出更多与微小隐孢子虫入侵和发育相关的关键蛋白,用于抗隐孢子虫病的药物或疫苗的开发。
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公开(公告)号:CN116445530B
公开(公告)日:2024-03-19
申请号:CN202211608052.8
申请日:2022-12-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供磷酸核糖焦磷酸激酶PRPS基因在制备抗弓形虫病药物中的应用。本发明通过分析磷酸核糖焦磷酸激酶(PRPS)在弓形虫生长中的作用,显示通过CRISPR/Cas9系统敲除野生型弓形虫的TgPRPS基因后,缺失TgPRPS基因减缓虫体体外的复制和虫体体外空斑的形成,可以显著减缓虫体体外生长,并在体外传代培养15d后虫体完全死亡。表明TgPRPS基因对弓形虫生长非常重要,能够作为药物作用靶点,在治疗药物的开发和弓形虫病的防治中具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN116286936A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202211608030.1
申请日:2022-12-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一株弓形虫转酮醇酶TgTKT基因敲除虫株及其应用,本发明研究显示在Ⅰ型野生型虫株DiCre中缺失TgTKT后,仍可体外培养,但虫体生长能力明显减缓,并且发现构建的弓形虫转酮醇酶TgTKT基因敲除虫株具有几乎无毒的特性,在动物体内也不繁殖。同时,发现免疫接种TgTKT敲除虫株对宿主抵抗野生型弓形虫感染有良好的免疫保护效果。表明弓形虫TgTKT能够作为防治弓形虫病药物和疫苗的靶点,为抗弓形虫病提供更多防治途径。
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公开(公告)号:CN116068177A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202310034659.8
申请日:2023-01-10
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/533 , G01N33/577 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光试剂、试剂盒及其应用,属于生物技术领域。本发明通过利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原,采用杂交瘤细胞单克隆抗体技术制备获得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体;用荧光染料标记步骤S1所得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体,即获得检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光检测试剂。应用本发明试剂建立的直接免疫荧光检测方法,可用于临床粪便样本及环境中微小隐孢子虫的检测及鉴定,且敏感性高、特异性强、稳定性好、诊断速度快,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN111820185A
公开(公告)日:2020-10-27
申请号:CN202010712347.4
申请日:2020-07-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: A01K67/02
Abstract: 本发明公开了一种IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁方法及其应用,所述扩繁方法为先将购买的IFN–γ基因缺陷杂合子交配,再将其子代中的纯合子和杂合子进行交配,再将子代中的雄性和雌性纯合子交配即可获得大量IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠,实现IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁,同时获得的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠较直接购买的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠体质正常,可更好用于隐孢子虫体外感染模型建立,极低剂量即可造成快速、慢性感染,且过程中小鼠死亡率低,可以满足隐孢子虫感染需要较长研究周期的要求。而且扩繁后获得的FN–γ基因缺陷纯合子小鼠可再直接纯纯交配产后代,实现大量扩繁,无需再经过复杂的纯杂交配。
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