一种增强产甘油假丝酵母2-苯乙醇耐受性的方法

    公开(公告)号:CN110079468A

    公开(公告)日:2019-08-02

    申请号:CN201910384299.8

    申请日:2019-05-09

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种增强产甘油假丝酵母2-苯乙醇耐受性的方法,属于基因工程技术领域。本发明通过在产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes CCTCC M 93018)中过表达了来源于自身的麦角固醇合成途径中的C-24(28)还原酶基因erg4,获得重组菌株Cgerg4。与空载对照菌株相比,重组菌株在高浓度2-苯乙醇(3.5g/L)的外界环境下具有较明显的生长优势,其菌体干重提高了103%。且在发酵培养基中,重组菌株的菌体干重及2-苯乙醇的产量得到增强,分别提高了12%和16%,2-苯乙醇产量达到3.89g/L。

    产甘油假丝酵母热休克蛋白基因CgHsp10及其应用

    公开(公告)号:CN107858361A

    公开(公告)日:2018-03-30

    申请号:CN201711313908.8

    申请日:2017-12-12

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明属于酵母基因工程领域,公开了一种源于产甘油假丝酵母Candida glycerinogenes CCTCC M93018的热休克蛋白基因CgHsp10,在Saccharomyces cerevisiae中过表达该基因,可显著提高S.cerevisiae的热耐受性。其核苷酸序列为与如序列表SEQ ID NO.1中所示的DNA序列的相似性在75%以上,进一步优选在85%以上,更优选在95%以上且具有与如序列表SEQ ID NO.1中所示的DNA序列相同功能的DNA序列;最优选DNA序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明在利用基因工程技术提高S.cerevisiae热耐受性上有重要作用。

    一种新型蛋白酶及其在酪蛋白磷酸肽制备中的应用

    公开(公告)号:CN104774824B

    公开(公告)日:2017-11-28

    申请号:CN201510176420.X

    申请日:2015-04-14

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种新型微生物源中性蛋白酶及其在酪蛋白磷酸肽制备中的应用。通过对米曲霉固态发酵产物分离纯化得到一种中性蛋白酶,分子量为58kD左右,适宜反应pH为7.0‑8.0,对‑Ser‑His‑、‑Val‑Glu‑、‑Lys‑Tyr‑和‑Arg‑Gly‑等肽键选择性较强。该酶可以水解酪蛋白产生酪蛋白磷酸肽,产率和纯度均高于同等条件下胰蛋白酶制备的酪蛋白磷酸肽,为目前酪蛋白磷酸肽的生产提供有利的参考。

    一种以甘油为原料发酵-生物催化耦合合成体系生产3-羟基丙酸的方法

    公开(公告)号:CN103789388A

    公开(公告)日:2014-05-14

    申请号:CN201410055176.7

    申请日:2014-02-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种以甘油为原料发酵-生物催化耦合合成体系生产3-羟基丙酸的方法,以甘油为底物,利用产1,3-丙二醇菌株(如克雷伯氏菌、重组大肠杆菌等)发酵生产1,3-丙二醇;以可选择性氧化多元醇的菌株(如醋杆菌、氧化葡萄糖酸杆菌等)作为细胞催化剂将1,3-丙二醇催化合成3-羟基丙酸;利用偶联反应装置将克雷伯氏菌(Klebsiella?pneumoniae)发酵和醋杆菌(Acetobacter?sp.)静息细胞催化反应耦合,可提供一种NADH可持续再生的耦合1,3-丙二醇制备3-羟基丙酸的技术,具有十分广阔的应用前景。

    一种耐高温羧肽酶在枯草芽孢杆菌中的构建方法及其在低苦味植物低聚肽中的应用

    公开(公告)号:CN114540263B

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202210320142.0

    申请日:2022-03-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种耐高温羧肽酶在枯草芽孢杆菌中的构建方法及其在低苦味植物低聚肽中的应用,属于蛋白质加工技术领域。本发明提供了一种重组羧肽酶M32联合碱性蛋白酶对植物蛋白进行水解,能够显著的降低植物蛋白低聚肽的苦味,脱苦效果显著。通过感官评价分析,在0.01显著水平上,大豆分离蛋白双酶解水解液苦味最低。在豌豆分离蛋白中,辅助添加羧肽酶M32,在得到的总游离氨基酸中,疏水性氨基酸占比显著,在味觉丰富度几乎不变的情况下,苦味值降低了25.3%,鲜味值提高了22.6%,起到了抑苦增鲜的效果。综上所述,利用羧肽酶辅助碱性蛋白酶酶解植物分离蛋白制备植物低聚肽可以显著降低其苦味值。

    一种表达产甘油假丝酵母RNA解旋酶的重组菌及其应用

    公开(公告)号:CN114231429A

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202111498013.2

    申请日:2021-12-09

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种表达产甘油假丝酵母RNA解旋酶的重组菌及其应用,属于生物技术领域。本发明提供了一种源于产甘油假丝酵母CCTCC M93018的RNA解旋酶基因CgSPB4,在Saccharomyces cerevisiae CEN PK2‑1c中过表达该基因,可显著提高S.cerevisiae的乙酸耐受性和抗氧化能力。方法是,利用引物扩增产甘油假丝酵母基因组DNA片段得到RNA解旋酶基因CgSPB4,在酿酒酵母中表达该基因,提高菌株的耐受性能。本发明在利用基因工程技术提高S.cerevisiae乙酸耐受性和抗氧化能力上有重要作用,为其它微生物及高等真核生物的抗逆性改良提供了新的研究思路。

    一种可在产甘油假丝酵母中游离表达的双ARS载体及其应用

    公开(公告)号:CN114085863A

    公开(公告)日:2022-02-25

    申请号:CN202111420957.8

    申请日:2021-11-26

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种可在产甘油假丝酵母中游离表达的双ARS载体及其应用,属于酵母基因工程领域。本发明的表达载体采用双ARS大幅度提高了质粒自我复制性能;该游离表达载体的开放阅读框可采用产甘油假丝酵母中的内源启动子和可提高质粒性能的内源TRP1终止子;该游离表达载体的筛选标记为产甘油假丝酵母的URA5基因;该游离表达载体属穿梭质粒,还含有来自克隆载体的氨苄青霉素抗性基因以及原核生物复制原点;该表达载体首次实现了在产甘油假丝酵母中进行游离自主复制,并可应用于各种基因的游离表达。

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