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公开(公告)号:CN114350620B
公开(公告)日:2024-05-10
申请号:CN202210040368.5
申请日:2022-01-14
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N7/04 , C12N15/38 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/65 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于基因工程技术和病毒学技术领域,具体涉及一种独特基因缺失组合的PRVΔgE/TK/UL56/US3四基因缺失株及其应用。该四基因缺失株是通过缺失伪狂犬病病毒的gE基因、TK基因、UL56基因和US3基因后得到的,具体是先制备PRVΔgE/TK/UL56三基因缺失株,然后通过同源重组技术、Cre‑LoxP系统,在PRVΔgE/TK/UL56三基因缺失株的基础上缺失毒力基因US3,获得PRVΔgE/TK/UL56/US3四基因缺失株。本发明的四基因缺失毒株可作为弱毒活疫苗,免疫仔猪后未出现PRV临床症状,具有良好的安全性,且能够对PRV强毒的攻击提供完全保护。
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公开(公告)号:CN117467621A
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202211148578.2
申请日:2022-09-21
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N7/00 , C12N7/08 , C12N15/50 , C07K14/165 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及致弱的猪流行性腹泻病毒变异毒株、快速致弱猪流行性腹泻病毒变异毒株的方法及该毒株的应用。该致弱的猪流行性腹泻病毒变异毒株E蛋白编码基因缺失了ATTATAAGCATT,S蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO:1所示的序列相比有99.6%的同源性,SA蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO:2所示的序列相比有99.5%的同源性。该方法采用CaCO2细胞,对猪流行性腹泻病毒变异毒株HeNAY16传代不超过50代,最快30代便实现了致弱,在传代过程中不添加胰酶。该致弱的猪流行性腹泻病毒变异毒株HeNAY16‑R具有很好的安全性,可有效预防由猪流行性腹泻病毒感染所造成的新生仔猪的腹泻以及死亡。
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公开(公告)号:CN110484511B
公开(公告)日:2022-11-29
申请号:CN201910649881.2
申请日:2019-07-18
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了杂交瘤细胞株、其分泌的识别盖他病毒单克隆抗体及应用。其中的杂交瘤细胞株包括分泌识别盖他病毒C蛋白的单克隆抗体的K1G4F4杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体能与目的抗原发生高效价的特异性结合,单克隆抗体制备成检测试剂盒检测临床样品,特异性强、灵敏度高、稳定性好。
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公开(公告)号:CN110484510B
公开(公告)日:2022-11-29
申请号:CN201910649619.8
申请日:2019-07-18
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了杂交瘤细胞株、其分泌的识别盖他病毒单克隆抗体及应用。其中的杂交瘤细胞株为分泌识别盖他病毒E2蛋白的单克隆抗体的K3A6B6杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体能与目的抗原发生高效价的特异性结合,单克隆抗体制备成检测试剂盒检测临床样品,特异性强、灵敏度高、稳定性好。
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公开(公告)号:CN105567736B
公开(公告)日:2020-03-20
申请号:CN201610077764.X
申请日:2016-02-03
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/861 , C12N7/01
Abstract: 本发明涉及一种缺失E3区复制完全型重组腺病毒4型载体系统的构建及其应用。本发明提供的系统包括一个骨架质粒、一个穿梭质粒和一个包装细胞系,所述的骨架质粒含有腺病毒AdV4基因组左侧1‑26569bp的片段,所述的腺病毒AdV4基因组具有缺失基因,缺失基因为E3区基因;所述的穿梭质粒含有用于插入目的基因的克隆位点以及腺病毒AdV4基因组右侧反向重复序列;所述的包装细胞系为HEK‑293细胞系。由于人源腺病毒AdV4基因组安全可靠,因此在其可以感染的宿主中有望被用作基因治疗及重组疫苗使用。即本发明产生的重组AdV4腺病毒具有安全广泛的应用。
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公开(公告)号:CN110305832A
公开(公告)日:2019-10-08
申请号:CN201910668558.X
申请日:2019-07-23
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于微生物疫苗技术领域,特别涉及重组干酪乳酸杆菌、重组质粒、疫苗、制备方法及应用。通过T-A克隆将目的基因flfA连入到pMD18-T上转化至DH5α感受态细胞得到克隆载体pMD18-T-flfA;双酶切质粒pMD18-T-flfA和穿梭载体pMG36e得到flfA基因片段和线性化载体,将两者连接转化至大肠杆菌XL1-Bule感受态细胞中得到重组表达质粒pMG36e-flfA;pMG36e-flfA电转入干酪乳酸杆菌感受态细胞中得到重组乳酸杆菌,将该重组乳酸杆菌制作成口服悬液疫苗,可应用于防治鸡输卵管囊肿。
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公开(公告)号:CN107385110B
公开(公告)日:2018-10-23
申请号:CN201710652796.2
申请日:2017-08-02
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于检测禽腺病毒血清4型的RPA引物,所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种用于检测禽腺病毒血清4型的RPA方法,该方法主要包括:引物合成、待测样品DNA提取、RPA扩增反应和RPA扩增产物分析等步骤。本发明的RPA引物特异性强,灵敏度高,检测结果准确。本发明的检测方法操作简单,稳定性好,为有效检测和鉴定鸡肝炎‑心包积液综合征提供一种成本低、快速、特异的现场诊断方法。
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公开(公告)号:CN107287349B
公开(公告)日:2018-10-23
申请号:CN201710484041.6
申请日:2017-06-23
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于同时检测新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和H9N2亚型禽流感病毒的多重RPA引物和探针,所述多重RPA引物和探针是由检测新城疫病毒的引物和探针、检测传染性支气管炎病毒的引物和探针、检测H9N2亚型禽流感病毒的引物和探针组成,本发明多重RPA引物和探针特异性强,灵敏度高,检测结果准确。本发明还公开了一种多重RPA同时检测新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和H9N2亚型禽流感病毒的方法,该方法包括引物合成、模板RNA提取、反转录、多重PCR扩增及扩增产物分析等步骤,该检测方法操作简单,稳定性好,为有效检测和鉴别常见禽呼吸道疾病的混合感染提供一种成本低、快速、特异的现场诊断方法。
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公开(公告)号:CN107287353A
公开(公告)日:2017-10-24
申请号:CN201710672708.5
申请日:2017-08-08
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2565/625 , C12Q2521/507 , C12Q2537/1376 , C12Q2522/101
Abstract: 本发明公开了一种用于检测鸡传染性喉气管炎病毒的RPA引物,所述RPA引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,该RPA引物特异性强,灵敏度高,检测结果准确。本发明还提供了一种用于检测鸡传染性喉气管炎病毒的RPA方法,本发明的检测方法不仅易于操作,对设备要求低,而且特异性强,灵敏度高,结果准确可靠,为有效检测和诊断鸡传染性喉气管炎提供了一种成本低、快速、特异的现场诊断方法。
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公开(公告)号:CN107287349A
公开(公告)日:2017-10-24
申请号:CN201710484041.6
申请日:2017-06-23
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q2600/16
Abstract: 本发明公开了一种用于同时检测新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和H9N2亚型禽流感病毒的多重RPA引物和探针,所述多重RPA引物和探针是由检测新城疫病毒的引物和探针、检测传染性支气管炎病毒的引物和探针、检测H9N2亚型禽流感病毒的引物和探针组成,本发明多重RPA引物和探针特异性强,灵敏度高,检测结果准确。本发明还公开了一种多重RPA同时检测新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和H9N2亚型禽流感病毒的方法,该方法包括引物合成、模板RNA提取、反转录、多重PCR扩增及扩增产物分析等步骤,该检测方法操作简单,稳定性好,为有效检测和鉴别常见禽呼吸道疾病的混合感染提供一种成本低、快速、特异的现场诊断方法。
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