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公开(公告)号:CN114213545A
公开(公告)日:2022-03-22
申请号:CN202111281147.9
申请日:2021-11-01
IPC: C07K19/00 , C07K14/08 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种新型水禽星状病毒重组融合蛋白、制备方法及其应用。本发明通过对新型水禽星状病毒CAP蛋白抗原表位密集区进行原核表达,得到免疫原性良好的重组蛋白,并用纯化的重组蛋白作为包被抗原,建立新型水禽星状病毒抗体间接ELISA检测方法,与小鹅瘟病毒、禽流感病毒(H5+H7)、新城疫病毒、坦布苏病毒的阳性血清无交叉反应性,说明该方法具有良好的灵敏性和特异性;在临床样本检测时,该方法与Western Blot方法检测结果具有较好的一致性,能够为新型水禽星状病毒抗体阳性种水禽的监测及临床诊断提供一种有力的工具。
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公开(公告)号:CN110358782A
公开(公告)日:2019-10-22
申请号:CN201910668557.5
申请日:2019-07-23
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种多基因重组干酪乳酸杆菌、制备方法及应用,通过T-A克隆将目的基因分别连入到pMD18-T,转化至DH5α感受态细胞得到pMD18-T-S1、pMD18-T-GtxA-N和pMD18-T-flfA,分别以pMD18-T-S1、pMD18-T-GtxA-N和pMD18-T-flfA为模板进行扩增,得到三条目的片段,将三条目的片段连接为一条片段,PCR扩增pMG36e使其变为线性化载体,通过无缝克隆技术将该片段和线性化载体连接,并将连接产物转化至XL1-Bule感受态细胞中得到重组质粒,将其电转化入干酪乳酸杆菌中得到重组干酪乳酸杆菌。
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公开(公告)号:CN110317900A
公开(公告)日:2019-10-11
申请号:CN201910473625.2
申请日:2019-06-01
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种用于快速检测CSFV、GETV、JEV的多重RT-PCR引物组,所述的多重RT-PCR引物组是由用于检测CSFV的引物、用于检测GETV的引物和用于检测JEV的引物组成,该多重RT-PCR引物组的序列如SEQ ID NO:1~6所示;所述的检测不以疾病诊断和/或治疗为目的。本发明还公开了快速检测CSFV、GETV、JEV的多重RT-PCR方法,该方法实现在同一个反应体系中同时扩增三种病毒,减少了操作次数,极大的避免了交叉污染。该方法对动物源性食品、产品或有关样品中CSFV、GETV和JEV的检测与鉴别、公共卫生及流行病学调查等方面具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN106636012B
公开(公告)日:2018-04-17
申请号:CN201611204635.9
申请日:2016-12-23
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株新分离的猪盖他病毒HNJZ‑S1株,其微生物保藏编号为CGMCC NO12550,是中国首例从自然感染发病猪群中分离得到的猪源盖他病毒,具有良好的免疫原性。本发明还公开了一种由猪盖他病毒HNJZ‑S1株制备的疫苗组合物及其制备方法,所述疫苗组合物含有经灭活的猪盖他病毒HNJZ‑S1株和药学上可接受的佐剂;所述疫苗组合物的制备方法包括病毒培养、病毒液灭活、制备水相、制备油相、乳化等步骤。该疫苗组合物有良好的免疫原性,免疫后可产生较强免疫力,攻毒保护率强,接种后母猪流产率及死产率明显减少,仔猪发病率也显著降低,能有效地预防猪盖他病毒的流行和传播,有着广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN105567736A
公开(公告)日:2016-05-11
申请号:CN201610077764.X
申请日:2016-02-03
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/861 , C12N7/01
Abstract: 本发明涉及一种缺失E3区复制完全型重组腺病毒4型载体系统的构建及其应用。本发明提供的系统包括一个骨架质粒、一个穿梭质粒和一个包装细胞系,所述的骨架质粒含有腺病毒AdV4基因组左侧1-26569bp的片段,所述的腺病毒AdV4基因组具有缺失基因,缺失基因为E3区基因;所述的穿梭质粒含有用于插入目的基因的克隆位点以及腺病毒AdV4基因组右侧反向重复序列;所述的包装细胞系为HEK-293细胞系。由于人源腺病毒AdV4基因组安全可靠,因此在其可以感染的宿主中有望被用作基因治疗及重组疫苗使用。即本发明产生的重组AdV4腺病毒具有安全广泛的应用。
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公开(公告)号:CN107338226B
公开(公告)日:2020-09-08
申请号:CN201710397798.1
申请日:2017-05-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N7/00 , A61K39/235 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一株新分离的禽腺病毒4型HNJZ株,其微生物保藏编号为CGMCC NO.13385,该毒株具有良好的特异性和免疫原性,可作为灭活疫苗生产毒株及检验用毒种,用于预防禽类的肝炎‑心包积液综合症。本发明还公开了一种由禽腺病毒4型HNJZ株制备的疫苗组合物,所述疫苗组合物含有经灭活的禽腺病毒4型HNJZ株和药学上可接受的佐剂。该疫苗组合物有良好的免疫原性,免疫后可产生较强免疫力,攻毒保护率强,能有效地预防禽腺病毒的流行和传播,有着广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN108950083A
公开(公告)日:2018-12-07
申请号:CN201810974990.7
申请日:2018-08-24
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2537/143 , C12Q2521/107
Abstract: 本发明公开了一种用于同时检测猪盖他病毒(GETV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪A群轮状病毒(PoRV)的多重RT‑PCR引物组,该多重RT‑PCR引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:10所示。本发明还公开了一种利用多重RT‑PCR引物组直接从样品中一次检出GETV、PEDV、TGEV、PDCoV和PoRV的多重RT‑PCR检测方法。与现有普通RT‑PCR相比,该检测方法特异性强,灵敏度高,能够实现同时鉴别GETV、PEDV、TGEV、PDCoV和PoRV五种病毒,而且检测结果准确,检测效率高。
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公开(公告)号:CN101406700A
公开(公告)日:2009-04-15
申请号:CN200710189712.2
申请日:2007-10-10
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61K39/295 , A61K39/002 , A61P35/00
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域。涉及一种混合免疫抗原及其在建立单克隆抗体杂交瘤细胞株的方法中的应用,其主要技术特征为利用抗生素、病毒和细菌3大类中的至少两种免疫抗原作为混合抗原,一次免疫小鼠后用一次融合、每种抗体分别单独筛选的方法,同时获得能分别稳定分泌抗不同抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,且每种抗体只与各自相应的特异性抗原发生反应,而不与其他类型的抗原发生交叉反应。突破了传统方法中每只小鼠只能免疫一种纯化抗原的做法。采用本方法所分泌的多种单克隆抗体的效价都与传统方法制备的单抗效价相似,特异且稳定,提高了生产效率,节约了时间,降低了成本。
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公开(公告)号:CN117467621A
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202211148578.2
申请日:2022-09-21
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N7/00 , C12N7/08 , C12N15/50 , C07K14/165 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及致弱的猪流行性腹泻病毒变异毒株、快速致弱猪流行性腹泻病毒变异毒株的方法及该毒株的应用。该致弱的猪流行性腹泻病毒变异毒株E蛋白编码基因缺失了ATTATAAGCATT,S蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO:1所示的序列相比有99.6%的同源性,SA蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO:2所示的序列相比有99.5%的同源性。该方法采用CaCO2细胞,对猪流行性腹泻病毒变异毒株HeNAY16传代不超过50代,最快30代便实现了致弱,在传代过程中不添加胰酶。该致弱的猪流行性腹泻病毒变异毒株HeNAY16‑R具有很好的安全性,可有效预防由猪流行性腹泻病毒感染所造成的新生仔猪的腹泻以及死亡。
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公开(公告)号:CN110484511B
公开(公告)日:2022-11-29
申请号:CN201910649881.2
申请日:2019-07-18
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了杂交瘤细胞株、其分泌的识别盖他病毒单克隆抗体及应用。其中的杂交瘤细胞株包括分泌识别盖他病毒C蛋白的单克隆抗体的K1G4F4杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体能与目的抗原发生高效价的特异性结合,单克隆抗体制备成检测试剂盒检测临床样品,特异性强、灵敏度高、稳定性好。
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