-
公开(公告)号:CN103387989B
公开(公告)日:2016-05-18
申请号:CN201310328291.2
申请日:2012-09-24
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , C12Q1/68
Abstract: 上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAM D及其制备方法,涉及一种核酸。提供具有高特异性和高亲和力的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法与应用。所述上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体具有G四聚体结构或者茎环结构,制备方法包括:设计并合成单链DNA随机寡核苷酸库,筛选目的寡核苷酸序列,并通过流式分析法鉴定其与靶蛋白结合的特异性和亲和力。筛选获得的核酸适体无毒性,分子量小,渗透性好,易于合成与标记,只特异性识别EpCAM蛋白,并且特异性识别表达EpCAM蛋白的细胞系,对不表达此蛋白的细胞系不具有识别功能。
-
公开(公告)号:CN103911432A
公开(公告)日:2014-07-09
申请号:CN201410076295.0
申请日:2014-03-04
Applicant: 厦门大学
IPC: C12Q1/68 , C12N15/115
CPC classification number: C12N15/1034
Abstract: 单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法。涉及一种核酸适体筛选技术,建立快速、高效的单克隆表面展示核酸适体筛选新方法。所述方法包括如下步骤:(1)将氨基修饰的正向引物通过NHS-氨基反应偶联到NHS修饰的微球表面;(2)将寡核苷酸文库通过液滴单分子微乳PCR以单克隆的形式扩增到偶联有正向引物的微球表面,每个微球上仅展示一种核酸序列;(3)通过单克隆微球库与靶标相关作用,可视化地考察表面展示序列与靶标的结合程度;(4)直接挑选获得能和靶标分子结合的单克隆微球,获取微球上的DNA序列,即可获得高质量核酸适体。该方法快速、高效、经济,实现了分子识别可视化监测,并可在无需克隆、测序、合成的条件下实现了富集库中核酸适体的快速筛选,获得选择性好、亲和力强的核酸适体。
-
公开(公告)号:CN103387988A
公开(公告)日:2013-11-13
申请号:CN201310328256.0
申请日:2012-09-24
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , C12Q1/68
Abstract: 上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAM Ccut及其制备方法,涉及一种核酸。提供具有高特异性和高亲和力的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法与应用。所述上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体具有G四聚体结构或者茎环结构,制备方法包括:设计并合成单链DNA随机寡核苷酸库,筛选目的寡核苷酸序列,并通过流式分析法鉴定其与靶蛋白结合的特异性和亲和力。筛选获得的核酸适体无毒性,分子量小,渗透性好,易于合成与标记,只特异性识别EpCAM蛋白,并且特异性识别表达EpCAM蛋白的细胞系,对不表达此蛋白的细胞系不具有识别功能。
-
公开(公告)号:CN114354913B
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202111675939.4
申请日:2021-12-31
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种外泌体PD‑L1糖基化检测方法,包括如下步骤:1)用PD‑L1适体即序列PDL1‑S‑T1,标记外泌体PD‑L1;2)通过修饰环炔基DBCO的DNA即序列DBCO‑S‑T2,与代谢标记的外泌体表面糖上叠氮的无铜环加成反应标记外泌体的糖;3)加入DNA连接臂,所述的连接臂分别具有和序列PDL1‑S‑T1的至少一段互补的序列以及和序列DBCO‑S‑T2的至少一段互补的序列;4)加入探针H1和H2,其中,所述的探针H1和探针H2互补,且其中一探针分别具有和序列PDL1‑S‑T1的至少一段互补的序列以及和序列DBCO‑S‑T2的至少一段互补的序列;5)扩增,检测扩增信号,得到外泌体PD‑L1糖基化信息。
-
公开(公告)号:CN115449511B
公开(公告)日:2024-01-12
申请号:CN202211040291.8
申请日:2022-08-29
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N5/09 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种基于代谢标记策略的新生肿瘤源外泌体选择性分离方法,包括如下步骤:1)非天然糖对肿瘤靶标进行糖代谢标记使得新生外泌体带有叠氮基团;2)分离外泌体或获取具有外泌体的样品;3)在步骤2)的外泌体或具有外泌体的样品中加入能与靶标蛋白以及叠氮基团反应的捕获连接体,所述的捕获连接体为DBCO‑肿瘤靶标蛋白适配体‑Biotin;4)接着加入单链DNA结合蛋白SSB;5)对修饰上捕获连接体的外泌体进行捕获及分离,得到的外泌体即定义为新生肿瘤源外泌体。本发明方法可以在不改变外泌体表面蛋白表达的情况下在混合体系样本中靶向亲和识别新生肿瘤源外泌体,从而更有效的进行新生肿瘤源外泌体分析。
-
公开(公告)号:CN114990047A
公开(公告)日:2022-09-02
申请号:CN202210535247.8
申请日:2022-05-17
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种新生外泌体的分离检测方法,包括如下步骤:1)非天然糖对肿瘤细胞或肿瘤小鼠进行糖代谢标记使得新生外泌体带有叠氮基团;2)分离外泌体或获取具有外泌体的样品;3)在步骤2)的外泌体或具有外泌体的样品中加入能与叠氮基团反应的捕获连接体;4)对修饰上捕获连接体的外泌体进行分离捕捉,得到的外泌体即为新生外泌体。本发明方法可以在不改变外泌体表面蛋白表达的情况下在混合体系样本中选择性的捕获新生成的外泌体,从而更有效的进行新生外泌体分析。
-
公开(公告)号:CN114250221A
公开(公告)日:2022-03-29
申请号:CN202010995577.6
申请日:2020-09-21
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/10 , C12N15/115 , G01N33/569 , A61K31/7088 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种SARS‑CoV‑2 RBD中和核酸适体的筛选方法及核酸适体,其包括如下序列中的至少一种:SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:15。本发明的核酸适体更容易与RBD蛋白结合并“击垮”RBD蛋白与受体ACE2之间的相互作用,其对SARS‑CoV‑2具有很强的中和效应以及高度的结合亲和力,能够有效地抑制病毒对细胞的侵染。由于本发明的核酸适体特有的生产周期短、生产成本低、免疫原性低等优点,使其在检测、预防和治疗新冠病毒方面很好地节约了时间成本,对于目前新冠病毒的防治具有重要意义,并且在临床上亦有很好的应用前景。
-
公开(公告)号:CN111849994A
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN202010246548.X
申请日:2020-03-31
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115 , G01N33/569 , A61K31/7088 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种SARS-CoV-2 S蛋白或RBD蛋白的核酸适配体,所述的核酸适配体包括如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列。本发明的核酸适体能够提供SARS-CoV-2 S蛋白或RBD蛋白的快速、精准检测,同时适配体与血管紧张素转换酶(ACE2)有竞争作用,高效阻断SARS-CoV-2 S蛋白或RBD蛋白和ACE2结合,从而抑制病毒感染细胞,可作为药物用于防御和治疗SARS-CoV-2相关疾病,成为抗病毒的潜在药物。满足家庭、社区等多种应用场景的筛查需求,减少非必要的患者聚集,补充现有诊断和治疗体系。
-
公开(公告)号:CN111443197A
公开(公告)日:2020-07-24
申请号:CN202010143064.2
申请日:2020-03-04
Applicant: 厦门大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种肝癌循环肿瘤细胞表型分析方法,包括如下步骤,1)构建包括两个处理单元的微流控芯片,其中,每个处理单元包括:由多个横截面为三角形的微柱组成的微阵列、以及位于该三角形微阵列入口一侧的两个进样口和位于该三角形微阵列出口一侧的两个出样口;两个处理单元分别修饰上皮细胞粘附分子EpCAM抗体和去唾液酸糖蛋白受体ASGPR抗体2)样品分别从两个处理单元的入口进入,并从出口流出;3)对两个处理单元捕获后的循环肿瘤细胞通过免疫染色法鉴定上皮表型与非上皮表型。本发明方法能够提高肝癌循环肿瘤细胞的捕获效率、纯度和检出率,并可对肝癌循环肿瘤细胞进行表型分析。
-
公开(公告)号:CN110004149A
公开(公告)日:2019-07-12
申请号:CN201910308366.8
申请日:2019-04-17
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115 , G01N33/68 , G01N33/574 , A61K47/26 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种程序性死亡受体-配体1(PD-L1)的核酸适体及其应用,涉及一种核酸。提供能够高特异性识别、高亲和力结合PD-L1的核酸适体。所述核酸适体可通过基于琼脂糖微珠分离-流式细胞术分析的蛋白SELEX方法筛选制备。所述核酸适体具有富含G碱基、具有茎环结构、易合成和标记、成本低、稳定性好、非免疫原性等特点,并且利用该核酸适体实现了PD-L1蛋白、表达PD-L1蛋白的肿瘤细胞系及肿瘤细胞系分泌的表达PD-L1蛋白外泌体的特异性识别,验证了其在生化分析检测领域中的应用,并有望作为检测PD-L1表达水平的分子识别工具,而应用于临床医学肿瘤免疫研究领域PD-1/PD-L1抑制剂疗效的精准预测和动态监测。
-
-
-
-
-
-
-
-
-