一种漆酶突变体LacF-25及其表达菌株和应用

    公开(公告)号:CN119709663A

    公开(公告)日:2025-03-28

    申请号:CN202510011486.7

    申请日:2025-01-04

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明公开了一种漆酶突变体LacF‑25及其表达菌株和应用。本发明以毛栓菌(Trametes hirsuta)AH28‑2漆酶为出发酶通过分子对接,分析位置结构,获得突变基因。含有突变基因的工程菌诱导表达后,获得氧化转化毒素能力提升的漆酶突变酶LacF‑25。突变体LacF‑25在pH 7,50℃条件下,对AFB1的氧化转化能力提升至出发酶的1.14倍。以ABTS为底物时,突变酶LacF‑25在35‑50℃条件下,稳定提升至出发酶的5‑9倍,该突变酶在氧化转化黄曲霉毒素中具有潜在应用价值。

    一种灰盖鬼伞菌来源的漆酶及其重组表达菌株和高效表达方法

    公开(公告)号:CN119552836A

    公开(公告)日:2025-03-04

    申请号:CN202411662540.6

    申请日:2024-11-20

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明公开了一种灰盖鬼伞菌来源的漆酶及其重组表达菌株和高效表达方法,属于微生物学和生物工程技术领域。本发明以黑曲霉MA70.15为实验菌株,采用随机整合策略,使得pC3‑PcitA‑SPGlaA‑lcc9‑TtrpC‑pyrG表达载体以连续九个拷贝的形式整合在了宿主菌柠檬酸合酶的启动子上游区域。本发明为了探究发酵培养基中微粒及渗透调节剂对重组黑曲霉发酵产漆酶的影响,添加了不同种类及浓度的微粒和渗透调节剂,使得重组菌AnRcgL1的摇瓶发酵漆酶酶活达到1566.7 U/L,1 L发酵罐发酵酶活达到1961 U/L,成功实现了漆酶Lcc9在黑曲霉中的重组高效表达。

    一种生淀粉水解酶突变体及其表达菌株和应用

    公开(公告)号:CN119242617A

    公开(公告)日:2025-01-03

    申请号:CN202411731468.8

    申请日:2024-11-29

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明公开了一种生淀粉水解酶突变体及其表达菌株和应用。本发明以来自Pontibacillussp.ZY的α‑淀粉酶AmyZ1为出发酶,通过分子对接确定底物结合亚位点,对+1位点199位残基进行定点突变,获得葡萄糖产量更高的突变酶L199F。该突变酶用在工业制糖工艺时,以玉米生淀粉为底物,液化2h后的DE值可达35%,是出发酶的1.44倍;糖化18h后DE值即可达到99%,较出发酶提前5小时。因此,该突变酶在以玉米生淀粉为底物的制糖工业领域具有较高的潜在应用价值。

    一种灰盖鬼伞来源的蛋白酶基因的重组表达及其重组酶降解大豆渣的应用

    公开(公告)号:CN116814594A

    公开(公告)日:2023-09-29

    申请号:CN202310729760.5

    申请日:2023-06-16

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明公开了一种灰盖鬼伞来源的蛋白酶基因的重组表达及其重组酶降解大豆渣的应用,属于分子生物学和基因工程领域。本发明实现了灰盖鬼伞来源的蛋白酶基因mpr的同源重组表达。获得的灰盖鬼伞重组菌株经摇瓶发酵后的胞外蛋白酶酶活可达41000U/L左右。纯化后的蛋白酶的比酶活为204.38U/mg。酶学性质分析结果表明,该蛋白酶的最适温度为50℃,且在30‑50℃范围内保持1h后该蛋白酶能保持70%以上的酶活;该蛋白酶的最适pH为8.0,在pH范围6.5‑9.0时,该蛋白酶的酶活效率能保持在70%以上,同时,该蛋白酶可有效将大豆渣蛋白水解成小分子肽。

    一种β-葡萄糖苷酶突变体、其重组表达质粒及转化的工程菌株

    公开(公告)号:CN104726435A

    公开(公告)日:2015-06-24

    申请号:CN201510172770.9

    申请日:2015-04-13

    Applicant: 安徽大学

    CPC classification number: C12Y302/01021

    Abstract: 本发明通过基因定点突变的方法获乙醇耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶的基因、突变质粒、工程菌,并可在将工程菌诱导表达后,获得乙醇耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶。本发明以来自海洋未培养微生物来源的β-葡萄糖苷酶为基础,通过PCR定点突变,获得突变基因。在35℃条件下,相对野生型β-葡萄糖苷酶蛋白,获得的突变蛋白的乙醇耐受浓度IC50提高了1.8倍,且葡萄糖耐受浓度提高2倍,pH及温度稳定性提高,底物亲和力及催化效率得以提升。该突变体能够在较短时间内高效水解大豆异黄酮糖苷制备苷元,具有潜在应用价值。

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