公开(公告)号：CN103436603B

公开(公告)日：2015-01-21

申请号：CN201310296488.2

申请日：2013-07-15

Applicant: 东华大学

Inventor： 周宇荀 ,  管清华 ,  肖君华 ,  李凯

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种鉴定子鼠基因型的PCR方法，包括：（1）通过Blast两种品系小鼠的线粒体序列，找到4个SNP位点，选取其中一个位点以子代小鼠线粒体DNA为模板进行PCR扩增；（2）PCR结束后对PCR产物凝胶电泳检测，若出现阳性条带，则进行LDR反应；其中，LDR反应中，每一个SNP位点设计三条探针；（3）LDR结束后，对LDR产物进行凝胶电泳检测，电泳结束后，利用软件提取泳道数据，即可。本发明通过鉴定子代小鼠母本，比较子代表型差异，将母体效应和基因类型联系起来，补充了以往研究中通过改变孕鼠的营养状况或药物激素暴露等方式，从环境因素揭示母体效应的不足，扩展了人们对母体效应的遗传学机制的认识。

公开(公告)号：CN103866009A

公开(公告)日：2014-06-18

申请号：CN201410067044.6

申请日：2014-02-26

Applicant: 东华大学

Inventor： 薛慧慧 ,  肖君华 ,  周宇荀 ,  李凯

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/686 ,  C12Q2525/207 ,  C12Q2525/301 ,  C12Q2563/107

Abstract: 本发明涉及一种改进的茎环引物qRT-PCR检测miRNA的方法，包括：（1）miRNA检测引物的设计：茎环引物包括两部分，通用的茎环序列和与靶标miRNA3’端互补配对的特异引物序列，其中与靶标miRNA互补配对的碱基数为11bp；qPCR的下游引物针对通用的茎环序列，上游引物针对靶标miRNA的5’端；在所述上游引物的5’末端增加GC尾巴，以使上下游引物的退火温度相近；（2）将靶标miRNA反转录成cDNA；（3）定量PCR扩增并采用SYBR？Green？qPCR检测法进行检测。本发明的方法特异性好、灵敏性高，且只需合成一种下游引物，采用SYBR？Green？I荧光染料法，大大节约了成本。

公开(公告)号：CN103436603A

公开(公告)日：2013-12-11

申请号：CN201310296488.2

申请日：2013-07-15

Applicant: 东华大学

Inventor： 周宇荀 ,  管清华 ,  肖君华 ,  李凯

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种鉴定子鼠基因型的PCR方法，包括：（1）通过Blast两种品系小鼠的线粒体序列，找到4个SNP位点，选取其中一个位点以子代小鼠线粒体DNA为模板进行PCR扩增；（2）PCR结束后对PCR产物凝胶电泳检测，若出现阳性条带，则进行LDR反应；其中，LDR反应中，每一个SNP位点设计三条探针；（3）LDR结束后，对LDR产物进行凝胶电泳检测，电泳结束后，利用软件提取泳道数据，即可。本发明通过鉴定子代小鼠母本，比较子代表型差异，将母体效应和基因类型联系起来，补充了以往研究中通过改变孕鼠的营养状况或药物激素暴露等方式，从环境因素揭示母体效应的不足，扩展了人们对母体效应的遗传学机制的认识。

公开(公告)号：CN101921828B

公开(公告)日：2012-11-07

申请号：CN201010102179.3

申请日：2010-01-28

Applicant: 东华大学

Inventor： 赵丽亚 ,  李凯 ,  田俊策 ,  叶恭银 ,  陈强 ,  周宇荀 ,  肖君华

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种检测农田生态环境的高通量多重LDR分型试剂盒，包括：农田16种物种的线粒体COI基因通用引物，上游：5′-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3′；下游：5′-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3′；农田16种物种的线粒体COI基因的特异探针序列；以及PCR扩增和LDR检测程序所用试剂。本发明的试剂盒针对COI基因的通用引物有效扩增出所有目标物种序列，保证了各目标序列以及其中低拷贝的模板可被检测到；各目标物种的特异探针进一步又保证了特异性，使各目标序列完全区分出来，实现多重分型定量，从而了解田间捕食结构的变化，维护农田生态环境。

公开(公告)号：CN101078028B

公开(公告)日：2011-08-31

申请号：CN200710038929.3

申请日：2007-03-30

Applicant: 东华大学

Inventor： 贺明星 ,  李凯 ,  肖君华 ,  周宇荀

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种两次bio-bar-code核酸检测技术，步骤包括：(1)磁珠探针、待测DNA和第一组纳米金探针混合，杂交；(2)分离磁珠，洗涤，加洗脱液，继续保温杂交，磁分离，洗涤；(3)重新悬浮沉淀，加入第二组纳米金探针，混合，杂交；(4)分离磁珠，洗涤，加洗脱液，去磁珠，检测上清液。该方法操作简单，特异性和灵敏度较高，易于自动化，有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN101502248B

公开(公告)日：2011-07-27

申请号：CN200810202245.7

申请日：2008-11-05

Applicant: 东华大学

Inventor： 周宇荀 ,  戴春花 ,  管清华 ,  周玉梅 ,  肖君华

IPC: A01K67/02 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及线粒体替代实验小鼠品系C57BL/6J-MitC3H/HeJ的构建，包括：(1)回交取C3H和B6两种品系的小鼠，以C3H做母本，B6做父本杂交得F1代；将F1代母鼠与B6雄鼠杂交得C3B61，为回交一代；以此轮回杂交十代，得到回交十代的小鼠C3B610；(2)鉴定回交(a)通过Blast两品系小鼠的线粒体序列，找到4个SNP位点，本实验通过扩增线粒体片段再对片段进行测序，鉴定回交小鼠的线粒体DNA；(b)从小鼠全基因组中随机选取40个STR位点，对40个STR位点进行引物设计，鉴定回交小鼠的基因组DNA。本发明用于研究小鼠性发育启动的影响。

公开(公告)号：CN101245388B

公开(公告)日：2011-02-09

申请号：CN200810034460.0

申请日：2008-03-11

Applicant: 东华大学

Inventor： 范忠鹏 ,  朱旺升 ,  于明辉 ,  周宇荀 ,  李凯 ,  肖君华

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及利用通用荧光引物和构象敏感凝胶电泳筛查单核苷酸多态性位点法，该方法首先利用通用引物方案对目的核酸序列区段进行PCR扩增，再应用F-CSGE技术进行高通量快速检测，最后通过DNA测序技术对筛查出的位点进行最终确证。与其他检测方法比较，本发明方法通量更高，检测速度更快，成本更低，可用于检测未知SNP和致病基因的单碱基突变，用于未知单碱基多态性、基因突变、单碱基插入或缺失等单碱基改变的筛查和确认。

公开(公告)号：CN203329755U

公开(公告)日：2013-12-11

申请号：CN201320287927.9

申请日：2013-05-23

Applicant: 东华大学

Inventor： 肖君华 ,  陈科 ,  徐福义 ,  晁天柱 ,  周宇荀 ,  李凯

IPC: B01L9/06

Abstract: 本实用新型提供了一种单面96孔易于多孔道移液器取样的离心管架，其特征在于，包括长方体形的底座，底座的上表面为孔洞排布面，孔洞排布面上设有96个孔洞，所述的96个孔洞沿孔洞排布面的长度方向排列为12列，沿孔洞排布面的宽度方向排列为8行。与现有技术相比，本实用新型的有益效果是，可以在稳定直立摆放1.5毫升离心管的同时，方便地使用多孔道移液器取样和加样，操作简单，使实验准确快速进行。