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公开(公告)号：CN117802080A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202311735618.8
申请日：2023-12-15
Abstract: 本发明公开了C3‑差向异构酶突变体及在生产D‑阿洛酮糖中的应用，属于生物工程领域。本发明利用结晶的方法得到了C3‑差向异构酶KeDt3e的晶体并解析了其三维结构，并通过对关键区域的氨基酸突变，获得了具有高底物选择性、热稳定性及催化效率的酶突变体。以表达KeDt3e M5的重组菌株作为生物催化剂进行全细胞转化，在2.5L发酵罐下，转化2h，D‑阿洛酮糖产量可达167.7g/L。该生产过程简单、原料易得、杂质少，具有较好的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN117683759A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311752427.2
申请日：2023-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种3‑脱氢莽草酸脱水酶突变体及产原儿茶酸的重组大肠杆菌，突变体ApAroZR363A的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，通过出发序列的第363位精氨酸突变为丙氨酸得到；本发明还基于该突变体构建了一株重组大肠杆菌，具体地：通过阻断碳流从3‑脱氢莽草酸流向下游莽草酸，敲除了大肠杆菌中3‑脱氢莽草酸脱氢酶基因aroE成功构建了一株高产3‑脱氢莽草酸的底盘菌株，并引入具有抵抗产物抑制的高活性3‑脱氢莽草酸脱水酶突变体ApAroZR363A在底盘菌株中构建原儿茶酸生物合成路径，最终建立了一个高效生物合成原儿茶酸的大肠杆菌重组菌株。
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公开(公告)号：CN114214293B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202111599580.7
申请日：2021-12-24
Applicant: 无锡阿科力科技股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌细胞色素P450环氧酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过对来源于恶臭假单胞菌的细胞色素P450环氧酶进行改造，克服了之前野生型的酶因为过氧化氢逸散和酸醇对质子转化率低而导致的催化效率低的局限，最终得到最佳突变体Q6(PpCytPA250V/T255E/S296V/A297P/P298N)，以此突变体为催化剂，以降冰片烯为底物，转化后10mL规模摇瓶产量为72.05g/L，摩尔产率为61.59％，单位菌体生产环氧降冰片烷的能力为3.6g/g，几乎不产生羟基化副产物。因此大大降低了之前的高菌体量以及繁复的后期分离纯化过程，为环氧降冰片烷的工业化生产和绿色生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113929787B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202111255656.4
申请日：2021-10-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种调控生物被膜改善莽草酸生产性能的策略，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段，利用生物被膜自组装系统，将异源目的蛋白固定在细胞生物被膜上来改善接触面积，提高目的蛋白的表达，有效提高底物淀粉的利用效率，使得发酵体系中莽草酸浓度提高。该方法设计简单，系统元件少，菌株生长负荷低，对菌株的生长情况和存活率没有显著影响。利用本发明构建的莽草酸生产菌株为发酵菌株，以淀粉为底物进行发酵生产，莽草酸产量和生产强度分别提高到47.5g/L和0.66g/L/h，具有较好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN113025546B
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202110292484.1
申请日：2021-03-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种多酶级联转化L‑酪氨酸生产酪醇的方法，属于生物工程技术领域。本发明所述的生产方法在将中间产物转化为酪醇的过程中利用一辅酶再生体系，通过将NADP+转化为NADPH，降低反应成本，提高整体转化效率。更进一步地，通过模块化组装和基因重复表达实现各酶的平衡表达，避免了中间产物的积累。并从反应的pH、温度对催化体系进行优化，可使得酪醇产量达到21.84g/L，转化率达到95.5％。从而大大降低了的底物成本和环境污染等问题，为酪醇的工业化生产和绿色生产奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112280725B
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202011185169.0
申请日：2020-10-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效生产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法。本发明敲除E.coli FMME‑N‑2产琥珀酸菌株的副产物编码基因得到菌株E.coli FMME‑N‑5（ΔfocA‑pflB‑ΔldhA‑Δpta‑ackA）；过表达来自产琥珀酸放线杆菌磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶pck和施式芽孢杆菌亚磷酸酯脱氢酶ptxD，筛选获得高效生产琥珀酸的工程菌；此工程菌株在7.5L发酵罐上采用两阶段发酵策略，发酵96 h，琥珀酸产量达到了137 g/L,琥珀酸得率达到1 g/g葡萄糖、生产强度为1.43 g/L/h，副产物乳酸、甲酸不积累，乙酸1‑2 g/L，具有一定的工业化生产潜力。
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公开(公告)号：CN111004787B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202010009417.X
申请日：2020-01-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种链霉菌磷脂酶D突变体、改造方法及其应用，属于生物工程技术领域。本发明的改造方法通过PLD的蛋白质改造，设计最佳突变体，克服了之前野生型的酶由于不能催化大体积底物而导致催化活性的降低，并通过实验验证。最终得到最佳突变体Q357F/Y405A，其kcat/Km(1.25mM‑1s‑1)较野生型提高了58％，磷脂酰丝氨酸的转化率为50.8％，产量达到38.6g/L，用本发明的方法可以大大降低成本，加快了酶转化法生产磷酯酰丝氨酸的工业化进程。
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公开(公告)号：CN114231507A
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202111611347.6
申请日：2021-12-27
Applicant: 无锡阿科力科技股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种胆分节杆菌胆碱氧化酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过对来源于的胆分节杆菌的胆碱氧化酶进行改造，克服了之前野生型的酶底物特异性和区域选择性的局限，最终得到最佳突变体Q5(AcCOxS101A/H351V/V355T/F357R/T357Q)，其转化1,4‑环己烷二甲醇生成1,4‑环己烷二甲醛的摩尔转化率为野生型的6.8倍，有效的提高了胆碱氧化酶AcCOx的催化效率，为1,4‑环己烷二甲醛的工业化制备奠定了基础。
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公开(公告)号：CN110923261B
公开(公告)日：2021-12-17
申请号：CN201911322346.2
申请日：2019-12-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种增强酿酒酵母抗高渗胁迫能力的方法，属于生物工程技术领域。利用质粒pY13过表达基因ELO2，构建过表达菌株BY4741/pY13‑ELO2，使得菌株抗高渗胁迫能力增强，具体表现为胁迫条件下，过表达菌株生物量提高29％，存活率提高22.1％；正常条件下，细胞膜上C20:0,C22:0和C24:0的脂肪酸含量分别提高了52.3％、94.1％和14.4％。上述结果表明过表达基因ELO2可以提高酵母菌株在高渗胁迫条件下的生存能力。
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公开(公告)号：CN111269900A
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN202010185968.1
申请日：2020-03-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种L-氨基酸脱氨酶突变体的制备及其应用，属于基因工程技术领域。本发明的改造方法通过pmirLAAD的蛋白质改造，通过分析pmirLAAD产物结合位点周围柔性Loop环结构，并设计最佳突变体，克服了之前野生型的酶由于产物抑制而导致催化效率的降低，并通过实验验证。最终得到最佳突变体pmirLAADM4，催化效率(1.61mM-1·min-1)和产物抑制常数(5.4mM)较对照分别提高了5.2倍和5.7倍。α-酮异戊酸的产量可达到96.5g/L，转化率>97％用本发明的方法可以大大降低成本，加快了酶转化法生产α-酮异戊酸的工业化进程。
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