用于检测单碱基突变位点的引物和探针及检测方法

    公开(公告)号:CN113308519A

    公开(公告)日:2021-08-27

    申请号:CN202110738032.1

    申请日:2021-06-30

    Inventor: 钟涛 赵百慧

    Abstract: 本发明提供一种用于检测单碱基突变位点的引物和探针及检测方法。本发明提供的单碱基突变位点检测方法,当模板为野生型时,阻遏引物在与正向引物竞争结合模板时会更有优势,随着反应的进行,由阻遏引物与反向引物产生的扩增产物越来越多,同时反应体系中的反向引物越来越少,进一步阻遏正向引物的工作,由于阻遏引物与反向引物的扩增子不包含与探针的互补序列,因此不产生荧光信号。本发明的引物探针设计方法与现有方法相比,在检测单碱基突变位点时具有更高的特异性,即在检测野生型靶核酸序列时,假阳性情况会更小,更有利于突变型的检测。

    等温扩增核酸靶序列的方法

    公开(公告)号:CN113481283A

    公开(公告)日:2021-10-08

    申请号:CN202110733555.7

    申请日:2021-06-30

    Abstract: 本发明提供一种等温扩增核酸靶序列的方法。该方法适用于双链DNA、单链DNA、单链RNA,包括切口酶和链置换酶的联合反应,在进行双链DNA和单链DNA检测时,采用3条引物和1条探针,而进行单链RNA检测时,可以为3条引物和1条探针,也可以是2条引物和1条探针。探针为分子信标,扩增过程中不发生降解,仅用于特异性结合目标片段,提供荧光信号,保证反应的特异性。本发明采用与引物之间在靶序列上的结合区域没有重叠的信标探针来实时判断结果,信标探针结合目标序列具有很强的特异性;同时反应后不开管,进一步避免假阳性的产生;反应在恒定温度下进行,耗时短,8min内即可完成检测,更符合POCT检测需求。

    一种诺如病毒核酸检测试剂盒及其使用方法

    公开(公告)号:CN113930545A

    公开(公告)日:2022-01-14

    申请号:CN202111173449.4

    申请日:2021-10-08

    Abstract: 本发明的一种诺如病毒通用型核酸检测试剂盒及使用方法,包括诺如病毒反应液、阳性对照液和阴性对照液,诺如病毒反应液为预分装至八连管中的冻干粉。其中,诺如病毒反应液中含有多条不同荧光标记的探针、引物、酶混合物、增强剂、冻干保护剂、10xbuffer、核苷酸混合物等,可以在同一反应体系中检测是否感染诺如病毒。通过内源性内参对样本采集、核酸提取、扩增和检测整个过程进行监控,避免因假阴性结果而导致的误判。探针为包括荧光报告基团和淬灭基团的寡核苷酸。当探针完整时,由于淬灭基团空间位置上靠近报告基团从而抑制报告基团发出荧光。引物延伸时,与模板结合的探针被Taq酶(5’→3’外切核酸酶活性)切断,报告基团与淬灭基团分离,产生荧光信号,从而实现对诺如病毒在核酸水平上的检测。

    一种甲型、乙型流感病毒核酸检测试剂盒及使用方法

    公开(公告)号:CN113789411A

    公开(公告)日:2021-12-14

    申请号:CN202111173429.7

    申请日:2021-10-08

    Abstract: 本发明的一种甲型、乙型流感病毒核酸检测试剂盒及使用方法,包括甲/乙型流感病毒反应液、阳性对照液和阴性对照液。其中,甲乙流病毒反应液中含有多条不同荧光标记的探针、引物、酶混合物、增强剂、冻干保护剂、10xbuffer、核苷酸混合物等,可以在同一反应体系中检测是否感染甲型、乙型流感病毒。通过内源性内参对样本采集、核酸提取、扩增和检测整个过程进行监控,避免因假阴性结果而导致的误判。当探针完整时,由于淬灭基团空间位置上靠近报告基团从而抑制报告基团发出荧光。引物延伸时,与模板结合的探针被Taq酶(5’→3’外切核酸酶活性)切断,报告基团与淬灭基团分离,产生荧光信号,从而实现对甲型、乙型流感病毒在核酸水平上的检测。

    甲型流感病毒H8N7和H13N6的联合检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN110373497B

    公开(公告)日:2021-11-02

    申请号:CN201910539532.5

    申请日:2019-06-20

    Abstract: 本发明公开了一种甲型流感病毒H8N7和H13N6的联合检测试剂盒,试剂盒包括病毒核酸快速提取试剂、PCR扩增试剂、PCR酶混合液、H8N7检测试剂、H13N6检测试剂、阳性对照品、阴性对照品;H8N7检测试剂包含H8N7扩增引物和探针;H13N6检测试剂包含H13N6扩增引物和探针。本发明采用的病毒核酸快速提取试剂配方可用于病毒RNA快速提取,大大缩短了提取时间、提升了提取效率,且对后续PCR扩增体系具有促进作用,提高PCR检测效率;且本发明针对甲型流感病毒H8N7亚型和H13N6亚型的特异性扩增引物探针为首创且设计独特,特异性好,灵敏度高,能够实现高效、精准的分型检测甲型流感病毒H8N7亚型和H13N6亚型。本发明还提供了甲型流感病毒H8N7和H13N6的检测方法,以及甲型流感病毒H13N6的检测试剂盒及检测方法。

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