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公开(公告)号：CN101633915B
公开(公告)日：2011-06-08
申请号：CN200910056686.5
申请日：2009-08-20
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的酶的布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶的制备方法，具体步骤如下：分别设计引物，扩增布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶的α亚基和β亚基基因；将α亚基和β亚基基因分别克隆到原核表达载体pET21a(+)中，构建pET21a(+)-PheRSα及pET21a(+)-PheRSβ表达载体；将α亚基的操纵子亚克隆到pET21a(+)-PheRSβ中，形成重组共表达载体pET21a(+)-PheRSαβ；将重组共表达载体pET21a(+)-PheRSαβ转化大肠杆菌BL21(DE3)RIPL中，IPTG诱导表达；收集裂解后的菌液上清，纯化蛋白，得布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶。本发明构建布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶(PheRS)的重组质粒，表达纯化出布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶蛋白，为抗寄生虫药物的筛选奠定了基础。
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公开(公告)号：CN101519649A
公开(公告)日：2009-09-02
申请号：CN200910045963.2
申请日：2009-01-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的杂交瘤细胞株及其制备方法，制备杂交瘤细胞株具体为：表达hAG2蛋白；免疫小鼠；制备滋养细胞；制备小鼠脾细胞；将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞混合；细胞融合及培养；检测融合细胞，选取阳性杂交瘤细胞，反复克隆培养，得到杂交瘤细胞株，该杂交瘤细胞株的保藏号为CCTCC－C200902。用上述杂交瘤细胞注射小鼠，收集腹水，离心，收集上清液，纯化、鉴定即得hAG2单克隆抗体。本发明的杂交瘤细胞株可稳定、高分泌率地分泌hAG2单克隆抗体，本发明的hAG2单克隆抗体滴度达1×10－6，能与天然及变性的hAG2蛋白结合，且抗原表位位于hAG2蛋白的表面。
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公开(公告)号：CN104593333B
公开(公告)日：2017-07-21
申请号：CN201410769174.4
申请日：2014-12-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/574 , A61K39/395 , A61P35/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种稳定表达抗AGR2人源化单克隆抗体的CHO细胞株及其应用。本发明提供一种稳定表达抗AGR2人源化单克隆抗体的CHO细胞株K70E10‑1D6，所述细胞株的保藏号为CCTCC NO：C2014189。本发明所提供的CHO细胞株K70E10‑1D6能够稳定表达抗AGR2人源化单克隆抗体，且制备获得的抗AGR2人源化单克隆抗体能够与AGR2特异性结合，亲和力高达9.09×108L/mol，并能够抑制乳腺癌细胞MCF7的生长。
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公开(公告)号：CN101519649B
公开(公告)日：2010-11-03
申请号：CN200910045963.2
申请日：2009-01-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的杂交瘤细胞株及其制备方法，制备杂交瘤细胞株具体为：表达hAG2蛋白；免疫小鼠；制备滋养细胞；制备小鼠脾细胞；将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞混合；细胞融合及培养；检测融合细胞，选取阳性杂交瘤细胞，反复克隆培养，得到杂交瘤细胞株，该杂交瘤细胞株的保藏号为CCTCC-C200902。用上述杂交瘤细胞注射小鼠，收集腹水，离心，收集上清液，纯化、鉴定即得hAG2单克隆抗体。本发明的杂交瘤细胞株可稳定、高分泌率地分泌hAG2单克隆抗体，本发明的hAG2单克隆抗体滴度达1×10-6，能与天然及变性的hAG2蛋白结合，且抗原表位位于hAG2蛋白的表面。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104593333A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201410769174.4
申请日：2014-12-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/574 , A61K39/395 , A61P35/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种稳定表达抗AGR2人源化单克隆抗体的CHO细胞株及其应用。本发明提供一种稳定表达抗AGR2人源化单克隆抗体的CHO细胞株K70E10-1D6，所述细胞株的保藏号为CCTCC NO：C2014189。本发明所提供的CHO细胞株K70E10-1D6能够稳定表达抗AGR2人源化单克隆抗体，且制备获得的抗AGR2人源化单克隆抗体能够与AGR2特异性结合，亲和力高达9.09×108L/mol，并能够抑制乳腺癌细胞MCF7的生长。
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公开(公告)号：CN101633915A
公开(公告)日：2010-01-27
申请号：CN200910056686.5
申请日：2009-08-20
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的酶的布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶的制备方法，具体步骤如下：分别设计引物，扩增布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶的α亚基和β亚基基因；将α亚基和β亚基基因分别克隆到原核表达载体pET21a(+)中，构建pET21a(+)-PheRSα及pET21a(+)-PheRSβ表达载体；将α亚基的操纵子亚克隆到pET21a(+)-PheRSβ中，形成重组共表达载体pET21a(+)-PheRSαβ；将重组共表达载体pET21a(+)-PheRSαβ转化大肠杆菌BL21(DE3)RIPL中，IPTG诱导表达；收集裂解后的菌液上清，纯化蛋白，得布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶。本发明构建布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶(PheRS)的重组质粒，表达纯化出布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶蛋白，为抗寄生虫药物的筛选奠定了基础。
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公开(公告)号：CN104630131B
公开(公告)日：2017-08-15
申请号：CN201510019471.1
申请日：2015-01-15
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N5/071 , C07K14/755 , G01N33/68 , C12Q1/02
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种稳定表达人凝血八因子的CHO细胞株及其应用。本发明提供一种稳定表达人凝血八因子的CHO细胞株，所述细胞株的名称为：中国仓鼠卵巢细胞CHO‑S/H9C2，所述细胞株的保藏号为：CCTCC No：C2014191。本发明所述的稳定表达人凝血八因子的CHO细胞株，能够稳定表达人凝血八因子，细胞传代40次后，通过活性试剂盒检测，细胞培养上清液中人凝血八因子保持在7IU/ml以上。
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公开(公告)号：CN104630131A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510019471.1
申请日：2015-01-15
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N5/071 , C07K14/755 , G01N33/68 , C12Q1/02
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种稳定表达人凝血八因子的CHO细胞株及其应用。本发明提供一种稳定表达人凝血八因子的CHO细胞株，所述细胞株的名称为：中国仓鼠卵巢细胞CHO-S/H9C2，所述细胞株的保藏号为：CCTCC No：C2014191。本发明所述的稳定表达人凝血八因子的CHO细胞株，能够稳定表达人凝血八因子，细胞传代40次后，通过活性试剂盒检测，细胞培养上清液中人凝血八因子保持在7IU/ml以上。
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公开(公告)号：CN101497917A
公开(公告)日：2009-08-05
申请号：CN200910046686.7
申请日：2009-02-26
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/25
Abstract: 一种药物筛选技术领域的布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶活性的检测方法，该方法步骤如下：取预反应液，加到含DMSO(二甲基亚砜)的离心管中，水浴；向离心管中加入ATP，使ATP的终浓度为2mM－8mM，混匀，水浴；从离心管中取反应液滴加在定性滤纸片上，在三氯乙酸溶液中洗涤滤纸片；在酒精中漂洗滤纸片；将滤纸片置于红外灯下烘干；闪烁计数仪检测。本发明的方法能够进行以布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶为靶标的抗锥虫药物的筛选。本发明尤其适用小量药物筛选，具有操作简便、快速准确、廉价的优点。
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