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公开(公告)号：CN104155291A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410210646.2
申请日：2014-05-19
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明提供了一种磷脂酶Dα活性的测定方法，是使用酶联比色法测定磷脂酶Dα活性的方法。其技术方案是以磷脂酰胆碱为底物，磷脂酶Dα催化水解其末端的磷酸二酯键生成磷脂酸和胆碱，胆碱在胆碱氧化酶的催化作用下生成甜菜碱和H2O2，生成的H2O2在过氧化物酶催化下将4-氨基安替匹林和重蒸酚氧化成粉红色物质，测定该粉红物质的吸光度值，并根据事先制作的胆碱标准曲线，来确定相应的胆碱含量，并以此推算出磷脂酶Dα的活性。在200ul磷脂酶Dα的反应体系中，蛋白含量和Ca2+浓度在10ug和10mM为宜。本发明是一种高效便捷，灵敏度高，危害低，结果稳定，适于同时测定大量样品的磷脂酶Dα活性检测方法。
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