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公开(公告)号：CN110055238A
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201910395291.1
申请日：2019-05-13
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N9/16
Abstract: 一种海参花碱性磷酸酶的提取方法，属于酶学领域。所述方法如下：取海参花，清洗干净，沥干水分；将海参花均匀的涂在平皿上进行冻干；将海参花冻干粉装入超临界CO2萃取设备的进料釜中萃取分离；向海参花冻干粉中加入Tris-HCl缓冲液均质离心，得到海参花ALP粗酶液；将海参花ALP粗酶液进行阴离子交换层析，填料为DEAE-阴离子层析介质。本发明的优点是：海参花经过冷冻干燥后，去除掉多余的水分，再经超临界CO2萃取，去除掉多余的脂肪，同时实现了排除水分和脂肪的干扰，并且还具有一定的杀菌作用，解决传统提取工艺中有机溶剂残留等问题，具有更好的碱性磷酸酶的提取和纯化效果。
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公开(公告)号：CN117164722A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202310995697.X
申请日：2023-08-09
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明涉及一种螺旋束DAMP4‑PR‑FO融合蛋白D2L及其制备方法和应用，属于生物工程技术领域，其序列如序列表SEQ ID No.1所示。制备方法是：将DAMP4和PR‑FO通过柔性长连接序列连接，根据密码子偏好性，对序列进行密码子优化构建毕赤酵母高效表达平台；最后选择性地沉淀细胞蛋白质污染物。融合蛋白D2L改善了PR‑FO的酶稳定性并且有良好的盐离子、血清、热、蛋白酶稳定性。本制备方法有效地降低了生产成本，提高了重组产物回收率。
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公开(公告)号：CN110200048A
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201910395293.0
申请日：2019-05-13
Applicant: 东北农业大学
IPC: A22C17/16
Abstract: 一种小肠粘膜刮取装置，涉及一种刮肠机。两个横杆与两个纵杆围合成矩形结构，其中一个横杆多个固定夹，纵杆外有环套，两个横杆与滚珠丝杠两端连接，滚珠丝杠与步进电机连接，步进电机与横杆连接；滚珠丝杠上有滚珠丝母，滚珠丝母与两个环套之间有矩形框，矩形框内底面与下刮刀连接，内顶面通过弹簧与上刮刀连接，上刮刀与下刮刀对应配合，矩形框上端中部有通孔，上刮刀中部有与通孔对应的螺纹孔，限位螺杆的下端分别间隙地穿过对应的通孔后与对应的螺纹孔螺纹连接。本发明解决了现有技术对黏膜刮除和保持肠衣完整性不能兼得的问题。
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公开(公告)号：CN110055237A
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201910394507.2
申请日：2019-05-13
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N9/16
Abstract: 一种碱性磷酸酶的提取方法，属于酶学领域。所述方法如下：1、取新鲜猪（牛）小肠，刮取肠粘膜。2、将刮取下来的肠粘膜均匀的薄涂在平皿中于冻干机中进行冻干，冻干后磨成粉。3、将肠粘膜装入超临界CO2萃取设备的进料釜中，萃取，完成后保留釜中肠粘膜粗粉。4、向肠粘膜粗粉中加入水，匀质，调pH6.5，加硫酸铵和丙酮，于4℃静置40min，9000r/min离心20min，取上清液加入丙酮，静置，离心，取最终的沉淀物冻干。本发明的优点是：肠粘膜经过冷冻干燥后，去除掉多余的水分，再经超临界CO2萃取，去除掉多余的脂肪，同时实现了排除水分和脂肪的干扰，并且还具有一定的杀菌作用，较传统工艺要具有更好的碱性磷酸酶的提取效果。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113402613A
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202110066637.0
申请日：2021-01-19
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明涉及一种抗菌肽LL37活性中心衍生肽二倍体抗菌肽LG及其制备方法和应用，LL37的17‑29氨基酸残基FD是其活性中心。抗菌肽LG序列如序列表SEQ ID No.1所示。以解决FD抗菌活性不高，并且存在盐离子的环境下导致抗菌活性有较大降低的问题。制备方法是：将FD的衍生肽FR，通过直接连接、刚性连接肽AEAAAKA连接和柔性连接肽GGGGS连接的设计，获得三种二倍体并以“选择指数”作为评价指标进行筛选，本发明得到的抗菌肽LG与原活性中心片段FD相比，抗菌活性提升了近20倍；抗菌肽LG与衍生肽FR相比，抑菌活性提升了约3倍，具有更好的盐离子稳定性，具有开发成新型抗菌药物的潜力。
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公开(公告)号：CN110128569A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910394506.8
申请日：2019-05-13
Applicant: 东北农业大学
IPC: C08B37/10
Abstract: 一种肝素钠的提取方法，属于多糖领域。所述方法如下：猪小肠洗净，刮取肠粘膜并收集至超临界CO2萃取装置反应釜中。向反应釜中加入质量5%的胰蛋白酶，搅拌使其充分混合。设置萃取压力为20MPa，分离压力为8MPa，反应1.5~2h。将混合物过滤，去除滤液，沉淀物用蒸馏水漂洗并去除滤液。将沉淀物薄涂在平皿中于冻干机中进行冻干，磨粉。将粉状的肠粘膜装入超临界CO2萃取设备的进料釜中，设置萃取压力为20MPa，分离压力为8MPa，萃取1.5~2h，去除多余的脂肪，即得肝素钠。本发明的优点是：通过超临界CO2促进胰蛋白酶的酶促反应的发生，大大缩短了反应时间，超临界CO2萃取法还具有一定的杀菌作用，较传统工艺要具有更好的提取效果。
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公开(公告)号：CN113402613B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN202110066637.0
申请日：2021-01-19
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明涉及一种抗菌肽LL37活性中心衍生肽二倍体抗菌肽LG及其制备方法和应用，LL37的17‑29氨基酸残基FD是其活性中心。抗菌肽LG序列如序列表SEQ ID No.1所示。以解决FD抗菌活性不高，并且存在盐离子的环境下导致抗菌活性有较大降低的问题。制备方法是：将FD的衍生肽FR，通过直接连接、刚性连接肽AEAAAKA连接和柔性连接肽GGGGS连接的设计，获得三种二倍体并以“选择指数”作为评价指标进行筛选，本发明得到的抗菌肽LG与原活性中心片段FD相比，抗菌活性提升了近20倍；抗菌肽LG与衍生肽FR相比，抑菌活性提升了约3倍，具有更好的盐离子稳定性，具有开发成新型抗菌药物的潜力。
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公开(公告)号：CN110200048B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201910395293.0
申请日：2019-05-13
Applicant: 东北农业大学
IPC: A22C17/16
Abstract: 一种小肠粘膜刮取装置，涉及一种刮肠机。两个横杆与两个纵杆围合成矩形结构，其中一个横杆多个固定夹，纵杆外有环套，两个横杆与滚珠丝杠两端连接，滚珠丝杠与步进电机连接，步进电机与横杆连接；滚珠丝杠上有滚珠丝母，滚珠丝母与两个环套之间有矩形框，矩形框内底面与下刮刀连接，内顶面通过弹簧与上刮刀连接，上刮刀与下刮刀对应配合，矩形框上端中部有通孔，上刮刀中部有与通孔对应的螺纹孔，限位螺杆的下端分别间隙地穿过对应的通孔后与对应的螺纹孔螺纹连接。本发明解决了现有技术对黏膜刮除和保持肠衣完整性不能兼得的问题。
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公开(公告)号：CN117164722B
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202310995697.X
申请日：2023-08-09
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明涉及一种螺旋束DAMP4‑PR‑FO融合蛋白D2L及其制备方法和应用，属于生物工程技术领域，其序列如序列表SEQ ID No.1所示。制备方法是：将DAMP4和PR‑FO通过柔性长连接序列连接，根据密码子偏好性，对序列进行密码子优化构建毕赤酵母高效表达平台；最后选择性地沉淀细胞蛋白质污染物。融合蛋白D2L改善了PR‑FO的酶稳定性并且有良好的盐离子、血清、热、蛋白酶稳定性。本制备方法有效地降低了生产成本，提高了重组产物回收率。
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