公开(公告)号：CN118147091A

公开(公告)日：2024-06-07

申请号：CN202410399264.2

申请日：2024-04-03

Applicant: 中南林业科技大学

Inventor： 熊颖 ,  孟萌 ,  马小勇 ,  余丽萍 ,  李旺 ,  任佳丽

IPC: C12N7/01 ,  C07K7/06 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/115 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58 ,  C12R1/92

Abstract: 本发明公开了一种用于检测大肠杆菌O157:H7的噬菌体、其制备方法及应用。其中的噬菌体为双功能化噬菌体O157S‑M13K07‑SBP。本发明利用噬菌体O157S‑M13K07‑SBP诱导并放大的FRET传感方法检测大肠杆菌O157:H7。噬菌体O157S‑M13K07‑SBP的P8蛋白上展示有链霉亲和素结合肽SBP，使链霉亲和素标记的荧光供体(QD460‑SA)和链霉亲和素标记的荧光受体(QD620‑SA)限域在噬菌体P8蛋白的N端，引发多个FRET发生。同时在噬菌体O157S‑M13K07‑SBP的P3蛋白上展示了能够特异性识别大肠杆菌O157:H7的肽段O157S。该检测方法可以降低样品基质荧光的干扰以及提高灵敏度。

公开(公告)号：CN116987677A

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202310500233.7

申请日：2023-05-06

Applicant: 中南林业科技大学

Inventor： 熊颖 ,  孟萌 ,  姜颖 ,  李旺 ,  任佳丽

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/62 ,  G01N33/543 ,  G01N33/569 ,  G01N33/535 ,  G01N33/58 ,  C12R1/92

Abstract: 本发明提供一种功能化噬菌体探针的制备方法及其在大肠杆菌检测中的应用。所述功能化噬菌体为链霉亲和素结合肽(SaBP)融合表达在M13K07噬菌体主要衣壳蛋白P8蛋白N端的重组噬菌体(M13KO7@SaBP)。本发明通过定点突变法，将编码SaBP(MDVEAWLGAR)的基因插入M13K07噬菌体P8蛋白基因的N端，制备成M13K07@SaBP，利用M13噬菌体丰富的P8蛋白(约2700个)以及生物素‑链霉亲和素的超强结合力，实现稳定的信号放大，并结合磁分离技术，降低食品样品基质的干扰，构建灵敏度高、样品基质干扰小的大肠杆菌检测方法。