公开(公告)号：CN104419719B

公开(公告)日：2017-08-25

申请号：CN201310392856.3

申请日：2013-09-02

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 李宁 ,  孙照霖 ,  康倩倩 ,  吴森 ,  李秋艳 ,  温啸 ,  赵蕊

IPC: C12N15/85 ,  A61D19/00 ,  A01K67/027 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明属于基因工程领域，本发明提供了一种转基因猪筛选标记基因敲除的方法，利用猪精子特异诱导启动子启动Cre/loxP位点特异重组酶系统，建立的自我剪切元件PCN，正常进行打靶筛选阳性克隆，进行SCNT获得founder阳性转基因猪后，通过配种，自我剪切敲除标记基因。其中剪切元件PCN中：P代表猪精子特异启动子，C代表Cre酶基因，N代表打靶时所需的正筛选标记neo基因。由于Cre酶是在精子成熟时特异启动，因此后代即可获得敲除筛选标记neo基因的猪，因此方便的获得筛选标记基因敲除的猪。

公开(公告)号：CN118956961A

公开(公告)日：2024-11-15

申请号：CN202411428497.7

申请日：2024-10-14

Applicant: 中国农业大学三亚研究院

Inventor： 吴森 ,  杜旭光 ,  段小月 ,  郭亮 ,  杜唱 ,  侯乃鹏 ,  陈超磊

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种用于分离多基因纯合编辑细胞的报告质粒和筛选方法。报告质粒包括目标区域靶位点插入序列和携带荧光蛋白的报告基因的质粒骨架；目标区域靶位点插入序列在报告基因的起始密码子后插入；目标区域靶位点插入序列包括：需同时编辑的所有基因或所有目标区域靶位点序列中打靶效率最低的目标区域靶位点序列，以及目标区域靶位点插入序列的序列长度为非3的倍数、且不含起始密码子和终止密码子。筛选方法的步骤包括：将基因编辑质粒以及报告质粒共转染入目的细胞；转染后，分选出阳性细胞群，得到同时编辑的多基因纯合编辑细胞。本发明的目的是解决现有技术无法从目的细胞中有效分离出多基因编辑细胞问题。

公开(公告)号：CN115806978A

公开(公告)日：2023-03-17

申请号：CN202111076501.4

申请日：2021-09-14

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 吴森 ,  张丽君 ,  郭紫航 ,  秦毓敏 ,  杜旭光

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N5/10 ,  C12N15/08 ,  C12N13/00

Abstract: 本发明提供一种异源染色体定向转移的方法，通过向抗药性基因中人为添加包含loxP序列的功能性内含子，并将其拆分为带有包含loxP序列的重叠区域的两部分，拆分后的两部分抗药性基因分别插入供体物种及受体物种的目标染色体中(两部分抗药性基因在Cre重组酶的作用下发生Cre/loxP位点特异性重组，并回复抗药功能)，并借助异种细胞融合方法实现异源染色体定向转移。本方法可广泛应用于基因功能研究、人类疾病模型构建、治疗性抗体开发及药理药效测试等方面。

公开(公告)号：CN109112160B

公开(公告)日：2021-08-31

申请号：CN201810981815.0

申请日：2018-08-27

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 吴森 ,  赵要风 ,  杜旭光 ,  余大为 ,  王靖 ,  邹惠影 ,  冯涛

IPC: C12N15/87 ,  C12N5/10 ,  C12N5/16 ,  C12N15/00

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开了一种提高哺乳动物克隆胚胎受体妊娠率的方法。本发明利用诱导性多能干细胞(iPS细胞)作为供体细胞，通过对RTL1进行剂量补偿表达之后，显著提高了克隆胚胎的妊娠率。

公开(公告)号：CN110402305A

公开(公告)日：2019-11-01

申请号：CN201680091302.1

申请日：2016-11-30

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 吴森 ,  胥春龙 ,  齐晓兰 ,  杜旭光 ,  邹慧影

IPC: C40B40/08 ,  C12N15/10 ,  C12N15/85

Abstract: 提供了包含多个PB介导的CRISPR系统多核苷酸的基因组文库，其包含侧翼为最小的piggybac反向重复元件的最小向导RNA。还提供了使用所述多核苷酸文库进行体内基因组规模筛选的方法。

公开(公告)号：CN119913201A

公开(公告)日：2025-05-02

申请号：CN202411863571.8

申请日：2024-12-17

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 吴森 ,  姜菁桦 ,  高菲 ,  杜旭光 ,  王彩英

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/54 ,  C12N5/10 ,  A01K67/0278 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/11 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供一种制备鸡永生化细胞系的方法。该方法包括构建条件性过表达TERT（Telomerase Reverse Transcriptase端粒酶逆转录酶）的质粒系统，通过卵巢注射并育种获得条件性过表达TERT的转基因鸡和分离诱导获得鸡永生化细胞系，本发明获得的鸡永生化细胞系具有原代细胞特征且对病毒易感，可以用于病毒繁殖、检测和流感病毒疫苗生产等，该方法能够在短时间内获得鸡的各器官、各部位的永生化细胞系，在疫苗产业具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN119639657A

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202510115535.1

申请日：2025-01-24

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 吴森 ,  高鑫 ,  杜旭光 ,  高晨 ,  高菲

IPC: C12N5/071 ,  C12N5/0735

Abstract: 本发明公开了一种MK2206在调节早期胚胎发育中细胞命运转变中的应用，属于生物技术领域。本发明通过添加MK2206，将多能性干细胞重编程为一种全能性细胞，本发明通过MK2206小分子作用，调控代谢通路方法，无需进行基因编辑，就可以有效调控细胞命运从多能性向全能性的转变。具体为：MK2206通过抑制AKT信号通路，进而提高了2C基因的表达，同时MK2206还抑制糖酵解，促进TCA循环中间产物的积累，进而促进多能性向全能性的转变。本发明提供了一种新的方法来精确调控细胞命运转变及代谢调控，为再生医学、干细胞研究以及胚胎发育的优化提供了新的技术手段。

公开(公告)号：CN118853671A

公开(公告)日：2024-10-29

申请号：CN202410860562.7

申请日：2024-06-28

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 吴森 ,  李攀 ,  杜旭光 ,  董鼎才 ,  高菲 ,  谢宇洋 ,  黄泓林 ,  孙思维 ,  马昭 ,  何诚 ,  赖锦盛

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了一种基于脱硫弧菌I‑C型CRISPR基因编辑系统及其应用，属于基因编辑技术领域。上述基因编辑系统包括CRISPR RNA、I‑C型编辑器piggyBac载体和DNA剪切模块；I‑C型编辑器piggyBac载体包括Cascade组件、Cas3蛋白及Puro抗性基因所述Cascade组件由Cas5c蛋白、Cas7c蛋白、Cas8c蛋白和Cas11c蛋白复合而成，通过不同的2A肽连接，受同一CMV启动子调控。本发明所得基因编辑系统在哺乳动物细胞和动物中能够进行精确高效基因组编辑和碱基编辑。利用优化的编辑器和成对的PAM内向crRNAs，在人类和猪细胞系的多个内源位点实现了定义性的缺失。

公开(公告)号：CN114763559B

公开(公告)日：2024-07-19

申请号：CN202110057414.8

申请日：2021-01-15

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 吴森 ,  杜旭光 ,  鲁恒星

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/55 ,  C12N15/90

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种不依赖于同源重组的靶向性基因捕获系统及其应用。本发明提供一种不依赖于同源重组的靶向性基因捕获系统，该系统包含以下模块：Cas9蛋白识别位点模块，识别Cas9蛋白识别位点的sgRNA表达模块，基因捕获模块，Cas9蛋白表达模块以及识别基因捕获靶位点的sgRNA表达模块。该系统可实现高效的靶向性基因捕获，在多种哺乳动物细胞中均具有较高的敲入效率，极大地简化了突变型等位基因的制备，为高效向哺乳动物细胞中引入靶向性突变提供了新的路径。

公开(公告)号：CN117106701A

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202311046566.3

申请日：2023-08-18

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 吴森 ,  秦毓敏 ,  杜旭光 ,  高菲

IPC: C12N5/074 ,  C12Q1/02 ,  A61K35/12 ,  A61P17/02 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及干细胞技术领域，尤其涉及一种多功能干细胞及其应用。所述多功能干细胞biPSCs‑70的保藏编号为：CGMCC NO.45635。本发明利用非整合的质粒电转小棕蝠胚胎成纤维细胞后，成功获得了一种无外源基因整合蝙蝠诱导多能性干细胞，该多能性干细胞具备在多种动物胚胎进行嵌合的能力，能够分化为内胚层、外胚层和中胚层细胞。本发明提供的多功能干细胞biPSCs‑70自我更新能力和分化能力较强，对于蝙蝠特性的研究具有重要意义。