公开(公告)号：CN119552903A

公开(公告)日：2025-03-04

申请号：CN202411487655.6

申请日：2024-10-24

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 许健 ,  储岳峰 ,  张思岚 ,  刘立元 ,  郑福英 ,  支飞杰 ,  罗意

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/04 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于但不限于基因工程技术技术领域，公开了一种布鲁氏菌效应蛋白BspE基因缺失株的构建方法及应用，利用同源重组及SacB反向筛选技术构建BspE基因缺失株，以牛种布鲁氏菌A19疫苗株菌液为模板，PCR扩增得到BspE基因上、下游同源臂，将胶回收的BspE基因上、下游同源臂进行融合PCR扩增，将获得的融合片段与pUC19‑SacB质粒进行连接、转化，获得重组质粒pUC19‑ΔBspE。将该质粒电转化至牛种布鲁氏菌A19感受态细胞，经卡那抗性及蔗糖压力筛选，PCR鉴定及测序，所得阳性转化子即为牛种布鲁氏菌BspE缺失株，该缺失疫苗毒株提高了抗菌细胞因子及特异性布鲁氏菌抗体IgG的水平，是一种新型的布鲁氏菌候选减毒疫苗毒株，具有较好的市场前景。

公开(公告)号：CN118581113A

公开(公告)日：2024-09-03

申请号：CN202410767292.5

申请日：2024-06-14

Applicant: 兰州大学 ,  中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 储岳峰 ,  支飞杰 ,  刘科蒙 ,  耿好 ,  苏梦茹

IPC: C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及生物领域，特别是涉及一种牛种布鲁氏菌arsR2基因缺失菌株构建方法及其应用。本发明提出了一个与布鲁氏菌毒力相关的arsR2基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。实验证明arsR2基因缺失不影响布鲁氏菌的生长。与亲本株和回补株相比，布鲁氏菌株ΔarsR2在RAW264.7细胞中存在极显著减少现象。感染小鼠3周后，布鲁氏菌株ΔarsR2感染小鼠脾重与亲本株和回补株相比呈现显著降低的趋势。本发明还提供一株减毒的布鲁氏菌ΔarsR2，能够用于制备布鲁氏菌减毒活疫苗。本发明为布鲁氏菌新疫苗的研发提供了新的技术手段。