公开(公告)号：CN119552903A

公开(公告)日：2025-03-04

申请号：CN202411487655.6

申请日：2024-10-24

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 许健 ,  储岳峰 ,  张思岚 ,  刘立元 ,  郑福英 ,  支飞杰 ,  罗意

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/04 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于但不限于基因工程技术技术领域，公开了一种布鲁氏菌效应蛋白BspE基因缺失株的构建方法及应用，利用同源重组及SacB反向筛选技术构建BspE基因缺失株，以牛种布鲁氏菌A19疫苗株菌液为模板，PCR扩增得到BspE基因上、下游同源臂，将胶回收的BspE基因上、下游同源臂进行融合PCR扩增，将获得的融合片段与pUC19‑SacB质粒进行连接、转化，获得重组质粒pUC19‑ΔBspE。将该质粒电转化至牛种布鲁氏菌A19感受态细胞，经卡那抗性及蔗糖压力筛选，PCR鉴定及测序，所得阳性转化子即为牛种布鲁氏菌BspE缺失株，该缺失疫苗毒株提高了抗菌细胞因子及特异性布鲁氏菌抗体IgG的水平，是一种新型的布鲁氏菌候选减毒疫苗毒株，具有较好的市场前景。

公开(公告)号：CN119876040A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202510065662.5

申请日：2025-01-16

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 许健 ,  储岳峰 ,  罗意 ,  马春慧 ,  郑福英 ,  刘立元 ,  牟雪梅 ,  吕皓晴 ,  宋国栋

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/12 ,  C07K14/23 ,  C07K1/22 ,  C12N15/70 ,  C12N15/31 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于细胞工程技术领域，公开了一种新的特异性结合Bp26重组蛋白的优势单克隆抗体及应用，表位的序列为ASPDMAILNL，为布鲁氏菌Bp26蛋白的最优势表位，针对其分泌特异性结合Bp26重组蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株6E8于2025年1月7日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C202543。针对布鲁氏菌Bp26重组蛋白的单克隆抗体能与Bp26蛋白特异性结合，具有较好的阻断效果。检测布鲁氏菌血清抗体的阻断ELISA方法以Bp26重组蛋白为抗原、特异性结合布鲁氏菌重组蛋白的单克隆抗体为检测抗体建立而成。本发明的阻断ELISA抗体检测方法比用于检测布鲁氏菌血清抗体的间接血凝试剂盒具有更高的特异性和敏感性。

公开(公告)号：CN119824112A

公开(公告)日：2025-04-15

申请号：CN202411795266.X

申请日：2024-12-09

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 许健 ,  储岳峰 ,  袁律峰 ,  吕皓晴 ,  刘颖 ,  郑福英 ,  刘立元

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明公开了一种羊支原体Mo、Mccp、Mmc三重PCR检测方法的建立及应用，通过采用高通量Mauve基因组共线性分析三种羊支原体基因组相互之间的特异性差异区段，设计并筛选出能够鉴别诊断三种羊支原体特异性引物，通过引物序列扩增、测序，鉴定出三种新的羊支原体鉴别诊断靶标分子，分别为Mo鉴别诊断的靶标分子DprA，Mccp鉴别诊断的靶标分子MCCPF38_00240，Mmc鉴别诊断的靶标分子restriction endonuclease subunit S。利用新靶标特异性区段，建立了能够同步鉴别诊断三种羊支原体(Mo、Mccp、Mmc)的三重PCR方法。本发明的PCR方法具有临床便捷、快速诊断的特点，能够在羊支原体诊断的临床中广泛使用，具有较好的市场前景和经济价值。