一种用于牛肉产品溯源鉴别的微卫星引物组合及其检测试剂盒

    公开(公告)号:CN105779629A

    公开(公告)日:2016-07-20

    申请号:CN201610301474.9

    申请日:2016-05-09

    CPC classification number: C12Q1/6888 C12Q2600/16

    Abstract: 本发明公开了一种牛肉产品溯源鉴别的微卫星引物组合及其检测试剂盒。本发明提供了本发明提供的用于鉴定牛肉的成套引物,为如下1)或2):1)由引物对BM1818、ILSTS005、INRA032、INRA035、BM1824、HEL5、HEL13、ILSTS006、CSRM60、INRA005、INRA037、INRA063、ETH10、ETH225、INRA023和TGLA1225组成;2)由引物组A、引物组B、引物组C和引物组D组成;所述引物组A由引物对BM1818、ILSTS005、INRA032和INRA035组成;本发明方法中选取的16个微卫星标记具有多态性高、标记间不连锁、扩增片段具有多态性,易于基因分型,且将不同标记位点的引物序列分组并利用不同荧光染料修饰,可实现分组多重PCR检测、节约成本、缩短时间、提高效率。

    一种利用数字PCR检测食品中菌落总数的方法

    公开(公告)号:CN103667462A

    公开(公告)日:2014-03-26

    申请号:CN201310613501.2

    申请日:2013-11-27

    CPC classification number: C12Q1/6851 C12Q2531/113 C12Q2563/173 C12Q2563/159

    Abstract: 本发明公开了一种利用数字PCR检测食品中菌落总数的方法。该方法包括如下步骤:1)富集待测食品中的细菌,将富集物与与DNA结合物共同孵育,获得PCR扩增模板;所述DNA结合物为不能穿过完整的细胞膜,但能与细胞膜受损后暴露出来的DNA结合的物质;2)配制PCR反应体系,进行数字PCR反应;所述PCR反应体系中含有所述PCR扩增模板、细菌通用引物对、荧光染料、dNTP和DNA聚合酶;3)根据反应产生的荧光信号,计算所述待测液体食品中的菌落总数。本方法无需对食品中细菌进行分离培养,检测时间缩短至2-3小时;同时大大减少了背景DNA和基质的干扰,灵敏度低至1个拷贝;而且该方法无需设置标准曲线,根据结果可直接判读样品中的菌落总数,大大简化了操作步骤。

    一种用于牛肉产品溯源鉴别的微卫星引物组合及其检测试剂盒

    公开(公告)号:CN105779629B

    公开(公告)日:2019-03-01

    申请号:CN201610301474.9

    申请日:2016-05-09

    Abstract: 本发明公开了一种牛肉产品溯源鉴别的微卫星引物组合及其检测试剂盒。本发明提供了本发明提供的用于鉴定牛肉的成套引物,为如下1)或2):1)由引物对BM1818、ILSTS005、INRA032、INRA035、BM1824、HEL5、HEL13、ILSTS006、CSRM60、INRA005、INRA037、INRA063、ETH10、ETH225、INRA023和TGLA122组成;2)由引物组A、引物组B、引物组C和引物组D组成;所述引物组A由引物对BM1818、ILSTS005、INRA032和INRA035组成;本发明方法中选取的16个微卫星标记具有多态性高、标记间不连锁、扩增片段具有多态性,易于基因分型,且将不同标记位点的引物序列分组并利用不同荧光染料修饰,可实现分组多重PCR检测、节约成本、缩短时间、提高效率。

    一种利用数字PCR检测食品中大肠菌群数量的方法

    公开(公告)号:CN103667463A

    公开(公告)日:2014-03-26

    申请号:CN201310613503.1

    申请日:2013-11-27

    CPC classification number: C12Q1/6851 C12Q2531/113 C12Q2563/173 C12Q2563/107

    Abstract: 本发明公开了一种利用数字PCR检测待测食品中大肠菌群数量的方法。该方法包括如下步骤:1)富集待测食品中的细菌,将富集物与DNA结合物共同孵育,获得PCR扩增模板;所述DNA结合物为不能穿过完整的细胞膜,但能与细胞膜受损后暴露出来的DNA结合的物质;2)配制PCR反应体系,进行数字PCR反应;所述PCR反应体系中含有所述PCR扩增模板、大肠菌群通用引物对、荧光染料、dNTP和DNA聚合酶;3)根据反应产生的荧光信号,计算所述待测食品中的大肠菌群数量。本方法无需对食品中细菌进行分离培养,检测时间短至3-4小时;同时减少了背景DNA和基质的干扰,灵敏度低至1个拷贝;且该方法无需设置标准曲线,根据结果可直接判读样品中的大肠菌群数量,大大简化了操作步骤。

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