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公开(公告)号：CN119040349A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202411107672.2
申请日：2024-08-13
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体为一种响应镁离子浓度变化的牛种布鲁氏菌的基因及其应用，所述基因为BAB_RS26535、BAB_RS26540、BAB_RS26545、BAB_RS26550、BAB_RS26555中的任一个或多个；核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5所示。本发明确定了牛种布鲁氏菌适应低浓度镁离子环境的决定性基因，对通过转基因技术提高生物对低浓度镁离子环境的适应性具有一定意义。
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公开(公告)号：CN119162115A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411373701.X
申请日：2024-09-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C12P21/08 , C07K16/12 , C07K14/32 , G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种炭疽杆菌的LF蛋白单克隆抗体细胞株制备、单抗筛选、抗体检测试剂盒及其应用，所述LF蛋白的核酸序列如SEQ ID No.1所示，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述LF蛋白单克隆细胞株LF‑mAb于2024年3月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.45833。本发明采用枯草芽孢杆菌表达系统制备了具有生物学活性的可溶性rLF蛋白，通过免疫小鼠、克隆筛选，获得了特异性单克隆抗体LF‑mAb并进行HRP标记，以rLF蛋白为包被抗原，HRP标记特异性单克隆抗体为检测抗体，建立了炭疽阻断ELISA抗体检测方法。
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公开(公告)号：CN119162115B
公开(公告)日：2025-04-29
申请号：CN202411373701.X
申请日：2024-09-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C12P21/08 , C07K16/12 , C07K14/32 , G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种炭疽杆菌的LF蛋白单克隆抗体细胞株制备、单抗筛选、抗体检测试剂盒及其应用，所述LF蛋白的核酸序列如SEQ ID No.1所示，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述LF蛋白单克隆细胞株LF‑mAb于2024年3月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.45833。本发明采用枯草芽孢杆菌表达系统制备了具有生物学活性的可溶性rLF蛋白，通过免疫小鼠、克隆筛选，获得了特异性单克隆抗体LF‑mAb并进行HRP标记，以rLF蛋白为包被抗原，HRP标记特异性单克隆抗体为检测抗体，建立了炭疽阻断ELISA抗体检测方法。
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公开(公告)号：CN118580997A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410683199.6
申请日：2024-05-30
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种炭疽杆菌LT毒素制备方法及应用，通过将炭疽杆菌PA基因克隆入pColdTF，构建了pCold‑TF‑rPA质粒，转化至大肠杆菌表达株BL21得到rPA蛋白；通过将炭疽杆菌LF基因克隆入pColdII，构建了pColdⅡ‑rLF质粒，转化至大肠杆菌表达株BL21得到rLF蛋白，将rPA蛋白与胰蛋白酶在室温下孵育30min得到rPA(T)蛋白；将rPA(T)蛋白与rLF蛋白按照浓度比1：3（100ng：300ng）混合得到炭疽杆菌LT毒素。本发明采用冷表达系统对全长PA和全长LF进行制备后得到高活性LT毒素，通过加入免疫后血清，通过抑制LT毒性的方式，评价疫苗免疫后的效价。
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