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公开(公告)号：CN109609453A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201910117703.5
申请日：2019-02-15
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/0786
Abstract: 本发明涉及一种树鼩小胶质细胞培养基与其体外分离培养及纯化的方法，属于生物技术领域。本发明培养基以DMEM/F12完全培养基为基础培养基，并在基础培养基中加入10%胎牛血清、1%双抗、1%MGS和0.04%B27。本发明同时提供一种树鼩小胶质细胞体体外分离培养及纯化的方法，采用上述树鼩小胶质细胞培养基，包括消化脑组织、制备单细胞悬液、混合胶质细胞培养、小胶质细胞分离纯化等步骤，应用本发明树鼩小胶质细胞体外分离培养及纯化的方法可以培养出纯度较高、活力较强的树鼩小胶质细胞，基本可以满足医学、生物学等研究领域对小胶质细胞相关实验研究的要求。
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公开(公告)号：CN107475198A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710715979.4
申请日：2017-08-21
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所 , 昆明医科大学
IPC: C12N5/0793
Abstract: 本发明涉及一种树鼩多巴胺能神经元细胞分离培养方法，属于细胞分离培养技术领域。本发明将3日龄内的离体树鼩大脑放入预冷的含2%双抗的D-Hank's液中，去除软膜血管，剥离出大脑皮质及中脑组织，用D-Hank's液清洗后，剪碎，离心，弃上清，胰酶消化后，过细胞筛，滤液离心，弃上清，用神经元专用培养基重悬细胞，转入PDL包被的细胞板上培养，培养3d后换液，以后每3天换一次液；当细胞贴壁并长至70%-80%时，进行酪氨酸羟化酶及Nestin蛋白的双荧光免疫鉴定。利用本方法分离培养出的神经元细胞成活率高达95%，能为进一步的神经系统疾病的研究提供可靠的实验材料。
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公开(公告)号：CN109609453B
公开(公告)日：2022-07-19
申请号：CN201910117703.5
申请日：2019-02-15
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/0786
Abstract: 本发明涉及一种树鼩小胶质细胞培养基与其体外分离培养及纯化的方法，属于生物技术领域。本发明培养基以DMEM/F12完全培养基为基础培养基，并在基础培养基中加入10%胎牛血清、1%双抗、1%MGS和0.04%B27。本发明同时提供一种树鼩小胶质细胞体体外分离培养及纯化的方法，采用上述树鼩小胶质细胞培养基，包括消化脑组织、制备单细胞悬液、混合胶质细胞培养、小胶质细胞分离纯化等步骤，应用本发明树鼩小胶质细胞体外分离培养及纯化的方法可以培养出纯度较高、活力较强的树鼩小胶质细胞，基本可以满足医学、生物学等研究领域对小胶质细胞相关实验研究的要求。
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公开(公告)号：CN106244549B
公开(公告)日：2019-11-29
申请号：CN201610690263.9
申请日：2016-08-19
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
Abstract: 本发明公开一种树鼩角膜内皮细胞的体外分离及纯化方法，经树鼩角膜内皮原代细胞的分离、纯化、CECs的传代培养，得到角膜内皮细胞。分离得到的角膜内皮细胞具有较高的细胞活力，在传至P3代可以实现树鼩角膜内皮细胞的纯化，纯化的细胞具有典型的内皮细胞形态，经NSE免疫荧光鉴定，染色率高。该方法纯化效率大大提高，价格低廉、使用方便，可以获得大量树鼩角膜内皮细胞。实现树鼩角膜内皮细胞的体外培养，填补了目前没有针对树鼩这一物种特定的角膜内皮原代细胞体外培养技术的空白，本发明提供的原代细胞的取材及纯化方法操作简单，价格低廉，体外培养的树鼩角膜内皮细胞可以在长期的传代培养过程中维持良好的细胞形态。
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公开(公告)号：CN103276055B
公开(公告)日：2015-02-18
申请号：CN201310104794.1
申请日：2013-03-28
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
Abstract: 一种以树鼩IL-2质粒为标准品的TAQMAN探针荧光定量PCR方法，包括以树鼩IL-2基因为目标，设计TAQMANPCR引物和探针，设计实验找到最优条件下引物的退火温度、引物浓度、探针浓度，提纯树鼩IL-2质粒计算IL-2基因片段拷贝数，以计算好的树鼩IL-2质粒用10倍梯度稀释，配制拷贝数为105～109copies阳性质粒建立标准曲线，并检测其灵敏性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101692800B
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN200910095042.7
申请日：2009-10-09
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
Abstract: 一种野生树鼩实验动物化中的人工繁殖法，包括亲本来源、亲本人工驯养、人工繁殖、怀孕亲本母树鼩的筛选及隔离饲养、新生小树鼩的饲喂以及离乳六个步骤，通过严格控制相关条件，可有效的提高树鼩的繁殖成活率，在生殖季节受孕率可达90％，成活率达到88％以上，使树鼩的人工繁殖达到动物实验化的规模化生产，满足市场要求。
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公开(公告)号：CN101692800A
公开(公告)日：2010-04-14
申请号：CN200910095042.7
申请日：2009-10-09
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
Abstract: 一种野生树鼩实验动物化中的人工繁殖法，包括亲本来源、亲本人工驯养、人工繁殖、怀孕亲本母树鼩的筛选及隔离饲养、新生小树鼩的饲喂以及离乳六个步骤，通过严格控制相关条件，可有效的提高树鼩的繁殖成活率，在生殖季节受孕率可达90％，成活率达到88％以上，使树鼩的人工繁殖达到动物实验化的规模化生产，满足市场要求。
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公开(公告)号：CN108486156A
公开(公告)日：2018-09-04
申请号：CN201810037266.1
申请日：2018-01-15
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N15/867 , C12N5/10 , C12Q1/02
Abstract: 本发明涉及一种永生化树鼩小肠上皮细胞系及其构建方法与应用，属于细胞技术领域。本发明通过用慢病毒介导hTERT基因转染获得的细胞系，激活了树鼩肠上皮细胞的端粒酶活性，能够迅速、有效的建立永生化的树鼩肠上皮细胞，所建立的永生化树鼩肠上皮细胞成功越过了复制衰老，获得了永生性，并且该永生化树鼩肠上皮细胞保持了与原代树鼩肠上皮细胞十分相近的表型，保持了细胞接触抑制和细胞增殖的密度限制，用呼肠孤病毒感染以后能够出现CPE，所以能够用于病毒感染等研究。
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公开(公告)号：CN105941308B
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201610296868.X
申请日：2016-05-06
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: A01K67/02
Abstract: 本发明涉及一种通过药物净化和筛选法培育清洁级实验树鼩的方法，属于培育清洁级实验动物技术领域。该方法包括体外寄生虫净化、肠道蠕虫净化、沙门氏菌和志贺氏菌净化、弓形虫筛选、疱疹病毒筛选等步骤。本发明方法简单，利用药物净化与和筛选法相结合，将实验树鼩的微生物和寄生虫等级由普通级净化为清洁级，效果明显。本发明体外寄生虫和肠道蠕虫的净化率达到100%，沙门氏菌和志贺氏菌净化率达到97.5%，同时采用筛选法剔除了弓形虫、疱疹病毒和皮肤病原真菌阳性的个体，建立了一种通过药物净化和筛选法培育清洁级实验树鼩的方法。在国内实属首创，填补了迄今为止国内尚无培育清洁级实验树鼩的空白。
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公开(公告)号：CN105941308A
公开(公告)日：2016-09-21
申请号：CN201610296868.X
申请日：2016-05-06
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: A01K67/02
CPC classification number: A01K67/02
Abstract: 本发明涉及一种通过药物净化和筛选法培育清洁级实验树鼩的方法，属于培育清洁级实验动物技术领域。该方法包括体外寄生虫净化、肠道蠕虫净化、沙门氏菌和志贺氏菌净化、弓形虫筛选、疱疹病毒筛选等步骤。本发明方法简单，利用药物净化与和筛选法相结合，将实验树鼩的微生物和寄生虫等级由普通级净化为清洁级，效果明显。本发明体外寄生虫和肠道蠕虫的净化率达到100%，沙门氏菌和志贺氏菌净化率达到97.5%，同时采用筛选法剔除了弓形虫、疱疹病毒和皮肤病原真菌阳性的个体，建立了一种通过药物净化和筛选法培育清洁级实验树鼩的方法。在国内实属首创，填补了迄今为止国内尚无培育清洁级实验树鼩的空白。
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