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公开(公告)号：CN118652848B
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411140759.X
申请日：2024-08-20
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
Abstract: 本发明公开了一种豹纹鳃棘鲈脑细胞系的构建方法及其应用。该豹纹鳃棘鲈脑细胞系的构建方法包括：步骤A：豹纹鳃棘鲈脑组织预处理；步骤B：豹纹鳃棘鲈脑细胞原代培养；步骤C：豹纹鳃棘鲈脑细胞传代培养。所构建的豹纹鳃棘鲈脑细胞系稳定性好，细胞分裂旺盛，传代时间较短，能够稳定传代80代以上，可提供大量的豹纹鳃棘鲈脑来源细胞，细胞能够维持良好的生长状态，可以对其进行冷冻保存。本发明所构建的豹纹鳃棘鲈脑细胞系对神经坏死病毒具有敏感性，接毒后均出现细胞病变。本发明细胞系可直接应用于病原特性研究及外源基因功能研究等。
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公开(公告)号：CN118086596B
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202410483745.1
申请日：2024-04-22
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
Abstract: 本发明公开了一种用于检测石斑鱼神经坏死病毒的引物组、试剂盒及其应用，引物组包括以下引物：上游引物NNV‑PCR‑1‑Fw：5’‑GTTCCCTAGTGCGTATC‑3’，下游引物NNV‑PCR‑1‑Rw：5’‑CTTCCAGCCGTGTATAG‑3’。本发明还提供了一种检测石斑鱼神经坏死病毒的一步PCR检测方法，包括以下步骤：步骤S1：提取待检石斑鱼样品头部或肝部的总RNA；步骤S2：反转录提取的所述总RNA，得到cDNA；步骤S3：以反转录得到的cDNA为模板，通过上述引物组进行PCR扩增。本发明提供的引物可实现利用一步PCR对石斑鱼神经坏死病毒进行检测，并且通过设计合适的引物长度，避免引物过长降低特异性和产量，本发明的PCR引物具备特异性较强、灵敏度较高的优点。
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公开(公告)号：CN118086596A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410483745.1
申请日：2024-04-22
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
Abstract: 本发明公开了一种用于检测石斑鱼神经坏死病毒的引物组、试剂盒及其应用，引物组包括以下引物：上游引物NNV‑PCR‑1‑Fw：5’‑GTTCCCTAGTGCGTATC‑3’，下游引物NNV‑PCR‑1‑Rw：5’‑CTTCCAGCCGTGTATAG‑3’。本发明还提供了一种检测石斑鱼神经坏死病毒的一步PCR检测方法，包括以下步骤：步骤S1：提取待检石斑鱼样品头部或肝部的总RNA；步骤S2：反转录提取的所述总RNA，得到cDNA；步骤S3：以反转录得到的cDNA为模板，通过上述引物组进行PCR扩增。本发明提供的引物可实现利用一步PCR对石斑鱼神经坏死病毒进行检测，并且通过设计合适的引物长度，避免引物过长降低特异性和产量，本发明的PCR引物具备特异性较强、灵敏度较高的优点。
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公开(公告)号：CN118652848A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202411140759.X
申请日：2024-08-20
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
Abstract: 本发明公开了一种豹纹鳃棘鲈脑细胞系的构建方法及其应用。该豹纹鳃棘鲈脑细胞系的构建方法包括：步骤A：豹纹鳃棘鲈脑组织预处理；步骤B：豹纹鳃棘鲈脑细胞原代培养；步骤C：豹纹鳃棘鲈脑细胞传代培养。所构建的豹纹鳃棘鲈脑细胞系稳定性好，细胞分裂旺盛，传代时间较短，能够稳定传代80代以上，可提供大量的豹纹鳃棘鲈脑来源细胞，细胞能够维持良好的生长状态，可以对其进行冷冻保存。本发明所构建的豹纹鳃棘鲈脑细胞系对神经坏死病毒具有敏感性，接毒后均出现细胞病变。本发明细胞系可直接应用于病原特性研究及外源基因功能研究等。
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