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公开(公告)号：CN118652848B
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411140759.X
申请日：2024-08-20
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
Abstract: 本发明公开了一种豹纹鳃棘鲈脑细胞系的构建方法及其应用。该豹纹鳃棘鲈脑细胞系的构建方法包括：步骤A：豹纹鳃棘鲈脑组织预处理；步骤B：豹纹鳃棘鲈脑细胞原代培养；步骤C：豹纹鳃棘鲈脑细胞传代培养。所构建的豹纹鳃棘鲈脑细胞系稳定性好，细胞分裂旺盛，传代时间较短，能够稳定传代80代以上，可提供大量的豹纹鳃棘鲈脑来源细胞，细胞能够维持良好的生长状态，可以对其进行冷冻保存。本发明所构建的豹纹鳃棘鲈脑细胞系对神经坏死病毒具有敏感性，接毒后均出现细胞病变。本发明细胞系可直接应用于病原特性研究及外源基因功能研究等。
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公开(公告)号：CN118086596B
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202410483745.1
申请日：2024-04-22
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
Abstract: 本发明公开了一种用于检测石斑鱼神经坏死病毒的引物组、试剂盒及其应用，引物组包括以下引物：上游引物NNV‑PCR‑1‑Fw：5’‑GTTCCCTAGTGCGTATC‑3’，下游引物NNV‑PCR‑1‑Rw：5’‑CTTCCAGCCGTGTATAG‑3’。本发明还提供了一种检测石斑鱼神经坏死病毒的一步PCR检测方法，包括以下步骤：步骤S1：提取待检石斑鱼样品头部或肝部的总RNA；步骤S2：反转录提取的所述总RNA，得到cDNA；步骤S3：以反转录得到的cDNA为模板，通过上述引物组进行PCR扩增。本发明提供的引物可实现利用一步PCR对石斑鱼神经坏死病毒进行检测，并且通过设计合适的引物长度，避免引物过长降低特异性和产量，本发明的PCR引物具备特异性较强、灵敏度较高的优点。
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公开(公告)号：CN118058213B
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202410472613.9
申请日：2024-04-19
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
IPC: A01K61/10 , A23K10/20 , A23K10/22 , A23K20/158 , A23K20/174 , A23K50/80
Abstract: 本发明公开了一种豹纹鳃棘鲈室内工厂化全人工繁育方法，包括以下步骤：步骤S1‑1：从豹纹鳃棘鲈群体中选择无病、无伤、无畸形的豹纹鳃棘鲈作为储备亲鱼进行室内初次营养强化培育，得到优质亲鱼；步骤S1‑2：对优质亲鱼进行室内二次发育营养强化培育，得到成熟亲本。本发明实现豹纹鳃棘鲈车间亲鱼强化—人工催产—室内孵化—车间标苗到养成全过程的豹纹鳃棘鲈人工养殖，避免了“野种家养”模式中对野外环境的依赖性和诸多不可控因素。并且，本发明提供的人工繁育方法适配于陆基工厂化的养殖方式，进一步提高生长环境的可控性以及各培育环节的透明度，为豹纹鳃棘鲈规模化繁育与养殖提供技术支撑，也为系统开展豹纹鳃棘鲈良种培育工作提供基础。
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公开(公告)号：CN118058213A
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202410472613.9
申请日：2024-04-19
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
IPC: A01K61/10 , A23K10/20 , A23K10/22 , A23K20/158 , A23K20/174 , A23K50/80
Abstract: 本发明公开了一种豹纹鳃棘鲈室内工厂化全人工繁育方法，包括以下步骤：步骤S1‑1：从豹纹鳃棘鲈群体中选择无病、无伤、无畸形的豹纹鳃棘鲈作为储备亲鱼进行室内初次营养强化培育，得到优质亲鱼；步骤S1‑2：对优质亲鱼进行室内二次发育营养强化培育，得到成熟亲本。本发明实现豹纹鳃棘鲈车间亲鱼强化—人工催产—室内孵化—车间标苗到养成全过程的豹纹鳃棘鲈人工养殖，避免了“野种家养”模式中对野外环境的依赖性和诸多不可控因素。并且，本发明提供的人工繁育方法适配于陆基工厂化的养殖方式，进一步提高生长环境的可控性以及各培育环节的透明度，为豹纹鳃棘鲈规模化繁育与养殖提供技术支撑，也为系统开展豹纹鳃棘鲈良种培育工作提供基础。
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公开(公告)号：CN117802249A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202410232310.X
申请日：2024-03-01
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , G16B20/20 , G06N3/0455 , G06N3/0464 , G06N3/08 , G16B40/00
Abstract: 本发明公开了一种东星斑育种全基因组SNP芯片的制备方法及应用，包括：基于深度学习卷积神经网络模型构建东星斑样品群体全基因组范围的SNP位点分型，通过深度学习长短期记忆神经网络模型优化探针，通过多目标优化选择算法筛选过滤东星斑SNP标记，利用深度学习卷积神经网络联合自编码器进行缺失基因型填充，进而获得50K位点的液相芯片池。本发明首次将HD‑Marker技术、深度学习模型和多目标优化选择算法用于东星斑SNP芯片的设计开发，该芯片具有位点灵活、操作简单等优点，可应用于东星斑全基因组选择育种、不同群体东星斑的遗传背景分析、东星斑性状关联分析。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113774014B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202110993847.4
申请日：2021-08-27
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
IPC: C12N5/075 , C12N5/02 , C12Q1/6834
Abstract: 本发明提供一种东星斑卵原细胞的分离纯化方法及其鉴定和应用，采用本发明的分离纯化方法，可从卵原细胞占比为10％左右的卵巢细胞悬液中，分离纯化得到占比在85.6～90.3％的卵原细胞；而且该方法对细胞的损伤小，获得的细胞活力高，操作过程，简单方便，所用仪器普遍，易于推广和应用；东星斑卵原细胞的鉴定方法，采用杂交显示技术，使用Nanos2探针标记卵原细胞，可快速识别东星斑卵原细胞；本发明的东星斑卵原细胞的分离纯化方法为东星斑生殖发育研究以及后期借助生殖细胞移植技术应用卵原干细胞来扩增东星斑雄性个体提供了技术保障。
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公开(公告)号：CN116516028A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310760826.7
申请日：2023-06-27
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种豹纹鳃棘鲈抗神经坏死病毒性状相关的SNP位点及其应用，包括6个SNP位点，各SNP位点前后碱基片段的序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.6所示。本发明提供的SNP分子标记可用于豹纹鳃棘鲈分子标记辅助育种，加快选育抗病豹纹鳃棘鲈品种，为豹纹鳃棘鲈的抗病选育工作提供参考依据。
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公开(公告)号：CN114410746A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202210317704.6
申请日：2022-03-29
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6869 , C12Q1/6888 , C40B50/06 , G16B20/20 , G16B50/00
Abstract: 本发明提供一种东星斑分子溯源选择育种方法及其应用，提供了一种东星斑分子溯源选择育种方法，结合国内东星斑等鱼类育种现状，实现对现存的连续多代样本进行低成本基因组重测序，通过分子溯源分析它们的亲缘关系，完成对连续多代鱼类亲缘关系的鉴定，综合多代间的优良性状，科学辅助鱼类新品种选育工作，为鱼类新品种培育提供了一种科学高效的育种方法；本发明的方法能够在性成熟周期长且已培育多代而未进行系统选育鱼类的育种工作中具有广阔的应用前景，能够成为鱼类良种培育的有力工具，对于东星斑、杉斑、虎斑以及老鼠斑等已培育多代而未科学地选育的鱼类等水产养殖品种的育种工作具有重要意义。
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公开(公告)号：CN119286772B
公开(公告)日：2025-02-25
申请号：CN202411826753.8
申请日：2024-12-12
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明公开了一种海水鱼类成肌细胞体外增殖方法，培养基以基础培养基为背景培养基；培养基包含终浓度为20‑200 ng/mL的IGF2蛋白；IGF2蛋白为豹纹鳃棘鲈来源。本发明利用上述培养基对传代细胞进行培养得到豹纹鳃棘鲈体外增殖的成肌细胞，成功实现了豹纹鳃棘鲈成肌细胞的体外培养，且成肌细胞的数量达到30000个，体外增殖率达到87%。为探究成肌细胞自身功能、基因调控机制提供原料，并为进一步探究海水鱼类成肌细胞对期生长速度的影响提供离体验证实验前提条件，也为海水鱼类的良种繁育奠定基础。
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公开(公告)号：CN116818466A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310987366.1
申请日：2023-08-07
Applicant: 中国海洋大学三亚海洋研究院
Abstract: 本发明提出了一种虹彩细胞的石蜡切片方法，在取样固定步骤时，选用包括苯酚和甲醛作为组织固定液，所述组织固定液中苯酚的体积浓度为1～2％，甲醛的质量浓度为6～8％。本发明解决了传统固定方式获得的虹彩细胞固定不充分问题，获得了清晰形态的虹彩细胞组织切片，对虹彩细胞种类鉴定及组织学分析有重要意义。
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