一种从天山马鹿皱胃黏膜中分离纯化糖蛋白的方法及应用

    公开(公告)号:CN116947961A

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202310504212.2

    申请日:2023-05-07

    Abstract: 本发明公开了一种从天山马鹿皱胃黏膜中分离纯化糖蛋白的方法及其应用,该方法以天山马鹿皱胃黏膜为原料,首先将新鲜的天山马鹿皱胃黏膜剥离,再进行干燥脱脂,超声,以磷酸盐缓冲液进行提取,离心,将上清液透析、冷冻干燥至白色粉末,获得糖蛋白粗提物,产率为33.4%,再将粗提物利用离子交换色谱和凝胶色谱纯化获得具有抗炎活性的两种糖蛋白单体,其中一种为酸性糖蛋白,一种为中性糖蛋白。产率分别为3.74%和2.71%,总糖含量为19.67%和11.65%,蛋白含量为51.57%和55.98%,糖醛酸含量为5.12%和3.68%。两种糖蛋白单体分子量在45kDa‑60kDa之间,经高效液相纯度检测表明:两种糖蛋白纯度分别为97%和93%;两种糖蛋白对环氧化酶抑制率分别为84.90%和78.67%。

    一种基于响应面法优化天山马鹿皱胃糖蛋白超声辅助提取的方法及应用

    公开(公告)号:CN116178482B

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202211562019.6

    申请日:2022-12-07

    Abstract: 本发明涉及一种基于响应面法优化天山马鹿皱胃糖蛋白超声辅助提取的方法及应用,该方法将天山马鹿皱胃表面冲洗干净,取下黏膜部位,分割成正方形,放入‑80℃冰箱冷冻,用冷冻干燥机去除原料中的水分,将干燥的天山马鹿粉碎,过筛,脱脂,分离脂溶性部位和水溶性固体,将不溶性固体自然风干,利用Design Expert11软件进行Box‑Behnken设计,以提取物的蛋白含量为响应值,采用三因素三水平的响应面分析法优化天山马鹿皱胃糖蛋白的超声辅助提取,离心,用透析袋进行透析脱盐,真空冷冻干燥,即得天山马鹿皱胃糖蛋白。与传统方法相比,该方法提取步骤简易、操作成熟,易于扩大规模生产,提取物蛋白和总糖含量增加,且抗氧化活性更高,是制备天山马鹿总糖蛋白理想方法之一。

    一种基于响应面法优化天山马鹿皱胃糖蛋白超声辅助提取的方法及应用

    公开(公告)号:CN116178482A

    公开(公告)日:2023-05-30

    申请号:CN202211562019.6

    申请日:2022-12-07

    Abstract: 本发明涉及一种基于响应面法优化天山马鹿皱胃糖蛋白超声辅助提取的方法及应用,该方法将天山马鹿皱胃表面冲洗干净,取下黏膜部位,分割成正方形,放入‑80℃冰箱冷冻,用冷冻干燥机去除原料中的水分,将干燥的天山马鹿粉碎,过筛,脱脂,分离脂溶性部位和水溶性固体,将不溶性固体自然风干,利用Design Expert11软件进行Box‑Behnken设计,以提取物的蛋白含量为响应值,采用三因素三水平的响应面分析法优化天山马鹿皱胃糖蛋白的超声辅助提取,离心,用透析袋进行透析脱盐,真空冷冻干燥,即得天山马鹿皱胃糖蛋白。与传统方法相比,该方法提取步骤简易、操作成熟,易于扩大规模生产,提取物蛋白和总糖含量增加,且抗氧化活性更高,是制备天山马鹿总糖蛋白理想方法之一。

    一种从野生条斑钳蝎中分离纯化透明质酸酶的方法及应用

    公开(公告)号:CN114507655A

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN202210203340.9

    申请日:2022-03-03

    Abstract: 本发明公开了一种从野生条斑钳蝎中分离纯化透明质酸酶的方法及应用,该方法由条斑钳蝎毒素为研究对象,通过电刺激法收集蝎素;利用冷冻干燥机进行干燥至白色粉末,在‑20℃冰箱储存备用;以透明质酸酶活力为导向,分别利用阳离子交换凝胶色谱,分子筛纯化;再利用制备性凝胶高效液相制备得到高纯度、高活力的透明质酸酶的方法。通过检测和评价结果表明:从条斑钳蝎中得到的透明质酸酶分子量为55KD,产率为1.5%,经高效液相检测其纯度达到90%以上,效价达到2300U/mg,通过红外检测,在1610cm‑1及1480cm‑1附近具有明显特征峰,为酰胺键标志。且得到的透明质酸酶具有较好的抗氧化活性。该方法操作简便,重复性强,得率高;为毒素来源的透明质酸酶新资源的开发利用提供技术支撑和科学依据。

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