靶向猕猴ATM基因敲除的sgRNA及应用

    公开(公告)号:CN119410643A

    公开(公告)日:2025-02-11

    申请号:CN202510020412.X

    申请日:2025-01-07

    Abstract: 本发明公开了一种靶向猕猴ATM基因敲除的sgRNA及应用,属于生物技术领域。本发明提供的靶向猕猴ATM基因的sgRNA核苷酸序列如SEQ ID NO:2、6、7、8任一序列所示。本发明还提供利用sgRNA靶向敲除猕猴ATM基因的方法:基于CRISPR/Cas9系统针对猕猴ATM基因设计多个sgRNA,靶向猕猴ATM基因敲除的sgRNA与Cas9蛋白或将靶向猕猴ATM基因敲除的sgRNA与Cas9 mRNA混合物共同注射至猕猴胚胎,再将胚胎移植到受体雌猴体内,生产得ATM基因敲除猕猴。该方法为建立非人灵长类AT动物模型提供新方法,为研究AT患者小脑退行性表型、病理特征以及内在的分子机制、解析致病机制和药物筛选提供了研究基础。

    一种检测Leber遗传性视神经病线粒体DNA突变G10680A的特异性引物

    公开(公告)号:CN102146443B

    公开(公告)日:2013-01-16

    申请号:CN201110001713.6

    申请日:2011-01-06

    Inventor: 姚永刚 张阿梅

    Abstract: 本发明涉及一种检测Leber遗传性视神经病线粒体DNA突变G10680A的特异性引物,属Leber遗传性视神经病变研究技术领域。本发明基于AS-PCR的原理,将突变特异的引物3′端第一位设计成A碱基L10680A,同时在引物3′端第二位引入一个错配碱基(碱基A突变成碱基T,形成T/T错配),在线粒体DNA序列的4866-5461区域,设计一对内参引物L4887/H5442。采用上述两对引物(L10680A/H10972和L4887/H5442),在一个PCR反应中对待测标本DNA样品进行扩增。PCR扩增产物经琼脂糖电泳检测,依据突变特异的电泳图谱对G10680A突变进行基因分型,实现突变基因的快速检测。本发明具有简单、快速、经济、灵敏的特点。本发明对于Leber遗传性视神经病变的遗传研究及咨询具有重要的意义。

    一种用于检测TTR基因突变G307C的试剂盒

    公开(公告)号:CN103266181B

    公开(公告)日:2014-08-13

    申请号:CN201310236550.9

    申请日:2013-06-14

    Inventor: 姚永刚 张阿梅

    Abstract: 一种用于检测TTR基因突变G307C的试剂盒,属于遗传性视力研究技术领域。该试剂盒包括用于检测位于TTR基因的突变G307C所需试剂和能选的用于扩增TTR基因的试剂及PCR引物。检测过程:用酚氯仿或柱吸附方法提取获得的血液样本的基因组DNA,用引物设计软件Primer5和Oligo6设计PCR扩增引物,将得到的序列与GenBank中的序列(序列号:NM_000371)进行比对,确定TTR基因突变G307C的存在,按照开放阅读框进行翻译,确定氨基酸突变p.G83R的存在。优点在于:试剂盒能简便、快捷、准确的测定玻璃体淀粉样变患者TTR基因的突变位点,为该类患者的失明提供诊断和治疗服务及参考;为家族性失明患者原因的基因筛查提供准确和简单的方法;为利用这一突变作为检测靶点开展失明的基因治疗奠定坚实的基础。

    Leber遗传性视神经病变线粒体DNA突变G10680A的快速检测方法

    公开(公告)号:CN102146443A

    公开(公告)日:2011-08-10

    申请号:CN201110001713.6

    申请日:2011-01-06

    Inventor: 姚永刚 张阿梅

    Abstract: 本发明涉及一种Leber遗传性视神经病变线粒体DNA突变G10680A的快速检测方法,属Leber遗传性视神经病变研究技术领域。本发明基于AS-PCR的原理,将突变特异的引物3′端第一位设计成A碱基L10680A,同时在引物3′端第二位引入一个错配碱基(碱基A突变成碱基T,形成T/T错配),在线粒体DNA序列的4866-5461区域,设计一对内参引物L4887/H5442。采用上述两对引物(L10680A/H10972和L4887/H5442),在一个PCR反应中对待测标本DNA样品进行扩增。PCR扩增产物经琼脂糖电泳检测,依据突变特异的电泳图谱对G10680A突变进行基因分型,实现突变基因的快速检测。本发明具有简单、快速、经济、灵敏的特点。本发明对于Leber遗传性视神经病变的遗传研究及咨询具有重要的意义。

    一种快速鉴别5种家畜肉和肉干制品种类的方法

    公开(公告)号:CN101712996A

    公开(公告)日:2010-05-26

    申请号:CN200910218335.X

    申请日:2009-12-14

    Abstract: 本发明涉及一种基于线粒体12S rRNA基因440bp片段的遗传变异,采用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,鉴定猪、山羊、黄牛、水牛、牦牛5种家畜肉和肉干制品种类的方法,属于生物高技术领域。本发明的鉴定方法包括样本基因组DNA提取,PCR扩增,限制性内切酶消化,酶切产物检测,及样本鉴定的主要步骤。本发明的鉴定方法具有快速、简单、经济、准确的特点,能在新鲜肉类和商品化肉干样本大规模检测中应用。该方法的建立在动物食品检验检疫、防止商业欺诈、建立食品回溯追查系统几方面都具有重要意义。

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