公开(公告)号：CN116555449A

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202211384851.1

申请日：2022-11-07

Applicant: 中国计量大学

Inventor： 蒋晗 ,  方结红 ,  吕晨泽 ,  潘雷明 ,  顾秀英 ,  肖朝耿 ,  刘鹏鹏 ,  陈宗伦 ,  黄光荣 ,  唐玉龙

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/6804 ,  C12N15/11 ,  C12R1/19 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种基于RPA‑LFD同时检测多种关键耐药基因的试剂盒及其应用，所述试剂盒包含针对上述风险耐药基因的引物和探针，所述特异性RPA引物的上游引物RPA‑F、下游引物RPA‑R和探针的核苷酸序列依次如SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：9所示；探针5’端标记荧光基团，3’端进行封闭修饰，探针序列内部修饰四氢呋喃脱碱基位点，并对引物浓度、乙酸镁溶液浓度、RPA扩增温度、扩增时间进行优化。本发明还提供了一种侧向层析检测试纸条法(LFD)，配合TSR‑200测试条读取器，可针对RPA扩增产物进行多重定性及半定量检测。所述试剂盒检测时间仅需20‑40分钟，灵敏度高，全程在37℃环境下进行，最低可检测出10copies/uL的样本，特异性好，对致病菌风险耐药基因的多重快速检测具有重要意义。