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公开(公告)号：CN104450696B
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201410721269.9
申请日：2015-01-05
Abstract: 本发明的目的是提供一种双重组位点的双向启动植物表达载体系统，由一个双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL和两个分别带有特异重组位点的克隆载体p‑FRT、p‑loxp组成。本发明所提供的双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL是经改造的含有特定DNA分子的植物表达载体，本发明所提供的两个分别带有特异重组位点的克隆载体是在出发载体的多克隆位点分别插入特定DNA分子的重组载体。本发明的克隆载体p‑FRT、克隆载体p‑loxp经过XcmI酶或EcorV酶消化后形成带有T末端或平末端的载体，可以直接与目的基因的PCR产物连接达到克隆的目的。克隆载体p‑FRT、克隆载体p‑loxp上的目的基因在对应的重组酶的介导下，可以分别通过特异位点重组将双重组位点双向表达植物表达载体上的荧光蛋白报告基因替换，达到将目的基因转移至植物表达载体的目的，过程中只需要重组酶介导，不需其它操作，简便易行。
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公开(公告)号：CN101544976A
公开(公告)日：2009-09-30
申请号：CN200910083479.9
申请日：2009-05-06
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体。双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体是在出发载体的多克隆位点插入如下DNA分子的重组表达载体：自5’末端依次含有EcoRI酶识别序列、NoS终止子、SacI酶识别序列、kpnI酶识别序列、红色荧光蛋白基因、SmalI酶识别序列、BamHI酶识别序列、XbalI酶识别序列、双向启动子、XholI酶识别序列、SpeI酶识别序列、绿色荧光蛋白、HindIII酶识别序列、HpaI酶识别序列、SalI酶识别序列、NoS终止子和Clal酶识别序列；所述双向启动子的核苷酸序列为序列表中序列1自5’末端第5917－6834位。本发明的双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体具备通过直接酶切连接简单操作就可以用于融合功能基因的目的。
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公开(公告)号：CN104450696A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410721269.9
申请日：2015-01-05
Abstract: 本发明的目的是提供一种双重组位点的双向启动植物表达载体系统，由一个双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL和两个分别带有特异重组位点的克隆载体p-FRT、p-loxp组成。本发明所提供的双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL是经改造的含有特定DNA分子的植物表达载体，本发明所提供的两个分别带有特异重组位点的克隆载体是在出发载体的多克隆位点分别插入特定DNA分子的重组载体。本发明的克隆载体p-FRT、克隆载体p-loxp经过XcmI酶或EcorV酶消化后形成带有T末端或平末端的载体，可以直接与目的基因的PCR产物连接达到克隆的目的。克隆载体p-FRT、克隆载体p-loxp上的目的基因在对应的重组酶的介导下，可以分别通过特异位点重组将双重组位点双向表达植物表达载体上的荧光蛋白报告基因替换，达到将目的基因转移至植物表达载体的目的，过程中只需要重组酶介导，不需其它操作，简便易行。
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公开(公告)号：CN101544976B
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN200910083479.9
申请日：2009-05-06
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体。双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体是在出发载体的多克隆位点插入如下DNA分子的重组表达载体：自5’末端依次含有EcoRI酶识别序列、NoS终止子、SacI酶识别序列、kpnI酶识别序列、红色荧光蛋白基因、SmalI酶识别序列、BamHI酶识别序列、XbalI酶识别序列、双向启动子、XholI酶识别序列、SpeI酶识别序列、绿色荧光蛋白、HindIII酶识别序列、HpaI酶识别序列、SalI酶识别序列、NoS终止子和Clal酶识别序列；所述双向启动子的核苷酸序列为序列表中序列1自5’末端第5917-6834位。本发明的双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体具备通过直接酶切连接简单操作就可以用于融合功能基因的目的。
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